重组蜘蛛丝蛋白及其制备方法和产业化应用技术

本发明专利技术公开了一类重组蜘蛛丝蛋白系列，及其编码基因、表达、纯化方法，以及所述重组蛛丝蛋白系列在缝合线、生物修复膜、止血材料等生物材料方面的应用。本发明专利技术的重组蜘蛛丝蛋白系列，其由N末端非重复区域(N‑NRT)、核心重复区域(REP)、C末端非重复区域(C‑NRT)组成，其中核心重复区域由1‑30个RepA和/或1‑15个RepB组成，单个RepA氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，单个RepB氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明专利技术设计的一系列新型的原核系统可溶表达的蛛丝蛋白，具有较高的发酵产量和蛋白纯度，以该蛛丝蛋白系列经过简单的静纺或湿纺工艺制备的蛛丝膜、蛛丝纤维分别具有2.5‑6MPa、40‑280MPa的力学强度，且显示出良好的细胞相容性和止血性能，具备医疗领域产业化应用的前景。

【技术实现步骤摘要】
重组蜘蛛丝蛋白及其制备方法和产业化应用
本专利技术涉及一类重组蜘蛛丝蛋白系列，及其编码基因、表达、纯化方法，以及所述重组蛛丝蛋白系列在成丝、成纳米膜等医用制品方面的应用。
技术介绍
蜘蛛丝既有钢般的坚硬，又有橡胶般的弹性。其突出的性能主要表现在：高强度、高弹性、高断裂功，可以说是迄今为止最强韧的材料，被誉为“生物钢”。随着对蜘蛛丝的研究深入，发现蜘蛛丝还具有生物可降解性、超收缩性、耐高温、耐低温及与生物组织的相容性等特性。由于蜘蛛丝这些独特的物理和生物学特性，它在医学、材料、军事和纺织等方面都有着广泛的应用前景。瑞典科学家JanJohansson利用无刺激性化学物质制造出的人工蜘蛛丝具有良好的生物相容性，可应用于脊髓修复或帮助干细胞生长来修复损伤的心脏组织等再生医学研究中，亦可用于自身防护用具等纺织工业应用中(NatureChemicalBiology,DOI:10.1038/nchembio.2269)。鉴于蜘蛛丝蛋白巨大的潜在应用性，国内外学者加强对蜘蛛丝的研究，希望蜘蛛丝能够像蚕丝那样大规模地应用于实际。由于蜘蛛无法驯养和天然蜘蛛本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.重组蜘蛛丝蛋白，其氨基酸序列由N末端非重复区域、核心重复区域、C末端非重复区域组成，其中核心重复区域由1-30个RepA和/或1-15个RepB组成，单个RepA氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，单个RepB氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；所述N末端非重复区域，氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示；所述C末端非重复区域，氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。/n

【技术特征摘要】
1.重组蜘蛛丝蛋白，其氨基酸序列由N末端非重复区域、核心重复区域、C末端非重复区域组成，其中核心重复区域由1-30个RepA和/或1-15个RepB组成，单个RepA氨基酸序列如SEQIDNO：1所示，单个RepB氨基酸序列如SEQIDNO：2所示；所述N末端非重复区域，氨基酸序列如SEQIDNO：3所示；所述C末端非重复区域，氨基酸序列如SEQIDNO：4所示。


2.根据权利要求1所述的重组蜘蛛丝蛋白，其特征在于：所述核心重复区域由5-30个RepA或5-15个RepB组成。


3.根据权利要求1所述的重组蜘蛛丝蛋白，其特征在于：所述核心重复区域由1-5个RepA和1-5个RepB的串联体组成。


4.根据权利要求3所述的重组蜘蛛丝蛋白，其特征在于：所述1-5个RepA的串联体位于整个融合蛋白的靠近N端位置，所述1-5个RepB的串联体位于整个融合蛋白的C端位置。


5.根据权利要求1至4任一项所述的重组蜘蛛丝蛋白，其特征在于：所述核心重复区域由5个RepA串联体、10个RepA串联体、20个RepA串联体、30个RepA串联体、5个RepB串联体、10个RepB串联体、15个RepB串联体、5个RepA加5个RepB串联体，或...

【专利技术属性】
技术研发人员：马永，赵百学，王安良，孙文秀，江辰阳，
申请(专利权)人：江苏京森生物医药新材料科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32