一种注射用安替安吉肽冻干制剂的冻干方法技术

本发明专利技术属于冻干制剂技术领域，具体涉及一种注射用安替安吉肽冻干制剂的冻干方法。所述注射用安替安吉肽冻干制剂的冻干方法，其特征在于，包括：(1)预冻：第一阶段导热油温度在20～60分钟内达到0～‑10℃，保持1～2小时；第二阶段导热油温度在30～60分钟内达到‑30～‑45℃，保持2～4小时；(2)一次升华；(3)解析干燥；(4)压力升测试合格后结束冻干工艺。所述冻干方法极大的提高了冻干品的性状，保证安替安吉肽的稳定性，其质量标准符合国家药品标准所规定的各项指标；同时所得冻干品具有外观美观，完好率高，性状和生物活性稳定等优点。

【技术实现步骤摘要】
一种注射用安替安吉肽冻干制剂的冻干方法
本专利技术属于冻干制剂
，具体涉及一种注射用安替安吉肽冻干制剂的冻干方法。
技术介绍
安替安吉肽(简称：HM-3)为化学合成的十八肽，是整合素阻断剂类合成多肽。研究发现，它能够有效抑制内皮细胞的迁移，但对肿瘤细胞增殖无影响；Matrigel实验显示安替安吉肽对新生血管生成有显著抑制作用；分析多肽对体内移植瘤的影响，也表明安替安吉肽可以有效抑制肿瘤组织的毛细血管，说明此多肽无细胞毒性，是通过抑制内皮细胞迁移和血管发生发展而达到抗肿瘤的效果。此多肽序列设计中加入了整合素配体序列，一些肿瘤在发生、发展过程中会高表达某些整合素亚型，如αvβ3，安替安吉肽与其结合抑制其表达及下游分子，则能够抑制肿瘤的发生和发展。进一步通过基因芯片分析发现，在有效剂量下，安替安吉肽能够上调CTSL1，KiSS-1，Syk，SSTR2基因转录，而抑制肿瘤相关基因ETV4，Myc基因转录。对安替安吉肽作用的胞内信号进行深入研究，发现在安替安吉肽的作用下，VEGF、PDGF-A、Bcl-2、Akt1信号分子随着剂量的升高呈现表达下调，MEK1蛋白也有不同程度的下调。同时检测了受体integrinαvβ3和α5β1，发现多肽对integrinαvβ3的表达影响较大，而对α5β1表达几乎无影响，这说明安替安吉肽主要通过integrinαvβ3发挥其生物活性：通过整合素αvβ3下游ERK和Akt信号通路抑制内皮细胞迁移；同时，安替安吉肽可以直接抑制VEGF蛋白的表达，从而达到抑制血管生成，起到抗肿瘤的作用效果。真空冷冻干燥技术是一种将水溶液在低温下冻结，而后在真空状态下将其中的水分不经过液体状态而直接升华干燥的技术，其干燥后的物质具有物理和化学性质基本不变，形状基本不变，有效成分损失小，复水性好，密封保存周期长。真空冷冻干燥技术为稳定性差的多肽类药物提供了稳定的保存方法。CN102178656A公开了一种HM-3多肽冻干粉制剂，按重量份数为HM-3多肽5～100份，辅料20～90份，pH调节剂1～10份，其中HM-3多肽冻干粉制剂的pH为5～7；所述的辅料为右旋糖酐、甘露醇；pH调节剂为氢氧化钠、碳酸钠、氢氧化钾、氢氧化钙、磷酸氢二钠或醋酸钠。其冻干过程是：预冻：设定板层温度为-60℃～-20℃，样品在一个小时内温度下降至-30℃～-10℃，保温2～5个小时；一次干燥：在真空度0～30Pa下设定板层温度为-20℃～-5℃，保温10～20个小时；二次干燥：设定板层温度10～30℃，保温5个小时以上，冻干至符合冻干的终点判断；此即为HM-3多肽冻干粉制剂。上述冻干方法虽一定程度提高了冻干制剂的稳定性，但所得产品的外观良好率低，较大几率出现裂缝和萎缩，凹凸不平等现象，增大了损失率，提高了生产成本。
技术实现思路
为了克服上述技术问题，本专利技术提供一种注射用安替安吉肽冻干制剂的冻干方法。所述冻干方法极大的提高了冻干品的性状，保证安替安吉肽的稳定性，其质量标准符合国家药品标准所规定的各项指标；同时所得冻干品具有外观美观，完好率高，性状和生物活性稳定等优点。本专利技术所述的注射用安替安吉肽冻干制剂的冻干方法，包括：(1)预冻第一阶段导热油温度在20～60分钟内达到0～-10℃，保持1～2小时；第二阶段导热油温度在30～60分钟内达到-30～-45℃，保持2～4小时；(2)一次升华；(3)解析干燥；(4)压力升测试合格后结束冻干工艺。冻干技术一般分为预冻、一次升华和解析干燥三个步骤。预冻是冻干过程的第一环节，也是非常重要的一个环节。有研究表明，预冻的速率影响产品的冰晶尺寸，从而影响后期的升华速率、产品的复溶性、外观、生物活性等，因此预冻的控制非常关键。预冻过程中，冰晶的数量和大小受二个因素影响，即成核速率和晶体生长速率，他们又都受温度的影响。一般降温速率越大，溶液的过冷度和过饱和度愈大，临界结晶的粒度则愈小，成核速度越快，容易形成颗粒较多尺寸较小的细冰晶。因而冰晶升华后，物料内形成的孔隙尺寸较小，干燥速率低，但干后复水性好。而慢速降温，容易形成大颗粒的冰晶,冰晶升华后形成的水气逸出通道尺寸较大，有利于提高干燥速率，但冻干后复水性差。冰晶的大小影响干燥速率和干燥后产品的溶解速度和产品质量。大的冰晶利于升华，小的冰晶不利于升华；大的冰晶溶解慢，小的冰晶溶解快；冰晶越小干燥后越能反映产品的原来结构。但同时研究人员也意识到有些理论知识是在受热均匀且比较理想的状态下提出来的，而在实际生产或实验中环境难以控制并实现这种理想状态，因而如何解决实际生产中的上述问题，对于本领域技术人员仍然是并不容易的。本专利技术通过对预冻步骤进行优化，分阶段降温并合理控制保温时间，从而使冻结体内形成一个均匀、颗粒大小适度的结晶结构，以便使冻结体内上部的冰晶升华后留下一个均匀细密的多孔结构，使得下部的冰晶升华的水汽能顺畅地逸出，从而完成整个冻结体的升华过程。所得冻干制剂具有外观美观，完好率高，性状和生物活性稳定等优点。研究发现，采用瓶冻的冻干方法后，瓶冻的受热不均匀现象明显。根据对瓶装制品板层预冻过程的研究，样品初温越高，料液上下部分的温度梯度越大，冰晶生长速度越慢。若降温速率较慢，则溶液形成的冰晶比较粗大，冰界面由下向上推进的速度较慢，溶液中溶质迁移时间充足，溶液表面冻结层溶质的积聚也就相对密集。因而导致上表层的溶质往往较多，密度较高，而下底层密度较小，结构疏松。这种分层现象，在骨架差的制品上体现得最为明显，或者底部萎缩，或者中间断层，或者顶部突起，或者顶部脱落一层硬壳，不一而足。但是降温速率也不能过快，过快形成的冰晶细小，使升华阻力加大，延长干燥时间，增加生产成本。所以，合适的预冻速率对于一个产品尤为重要。根据本专利技术的一些实施例，所述一次升华包括：所述导热油温度在2～10小时内达到-25～0℃，保持8～24小时，真空度为10～50Pa。一次升华的目的是使冻干体中的自由水升华逸出。升华过程必须加热，否则产品得不到热量会降低升华速率延长干燥时间，但如果加热过多会使产品温度超过共晶点或崩解点温度而使产品熔化，造成冻干失败。冻干箱的板层是升华产品的总热源，升华产品由辐射，传导和对流三种分式得到的热量均来自板层，因此通过控制板层温度便可控制升华产品的温度。产品的温度不能超过共晶点温度，不然产品同没有冻实一样会起泡或熔化。产品的温度也不能超过崩解点温度，不然产品发生崩解，堵塞升华通道，产品也会发生熔化。但板层温度是完全可以超过共晶点或崩解点温度的。因为只有板层温度与产品温度间存在温度差，才能产生热量的传递，促进升华。除此之外，热量的对流传递方式受到真空的影响，它取决于冻干箱内压力的大小，实验表明，如果压力小于0.1毫巴，则对流传热小得可以忽略不计，如果压力大于0.1毫巴，则对流传热明显增加。因此产品在升华时，真空度并不是越高越好，也就是压力并不是越低越好，而是需要一个合适的压力，即能产生对流而又不影响升华的压力。根据如上原理，本专利技术又将一次升华本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种注射用安替安吉肽冻干制剂的冻干方法，其特征在于，/n包括：/n(1)预冻/n第一阶段导热油温度在20～60分钟内达到0～-10℃，保持1～2小时；/n第二阶段导热油温度在30～60分钟内达到-30～-45℃，保持2～4小时；/n(2)一次升华；/n(3)解析干燥；/n(4)压力升测试合格后结束冻干工艺。/n

【技术特征摘要】
1.一种注射用安替安吉肽冻干制剂的冻干方法，其特征在于，
包括：
(1)预冻
第一阶段导热油温度在20～60分钟内达到0～-10℃，保持1～2小时；
第二阶段导热油温度在30～60分钟内达到-30～-45℃，保持2～4小时；
(2)一次升华；
(3)解析干燥；
(4)压力升测试合格后结束冻干工艺。


2.根据权利要求1所述的注射用安替安吉肽冻干制剂的冻干方法，其特征在于，所述一次升华包括：所述导热油温度在2～10小时内达到-25～0℃，保持8～24小时，真空度为10～50Pa。


3.根据权利要求2所述的注射用安替安吉肽冻干制剂的冻干方法，其特征在于，所述一次升华包括：
第一阶段所述导热油温度在2-5小时内达到-25～-10℃，保持6-12h，真空度为10～50Pa；
第二阶段所述导热油温度在2～5小时内达到-5～0℃，保持1～120分钟，真空度为10～50Pa。


4.根据权利要求1-3任一所述的注射用安替安吉肽冻干制剂的冻干方法，其特征在于，所述解析干燥包括：所述导热油温度在4～16小时内达到5～40℃，保持2～8小时，真空度为0-50Pa。


5.根据权利要求4所述的注射用安替安吉肽冻干制剂的冻干方法，其特征在于，所述解析干燥包括：
第一阶段所述导热油温度在3～6小时内达到20～40℃，保持1～60分钟，真空度为10～50Pa；
第二阶段所述导热油温度在1～60分钟内达到20～40℃，保持2～6小时，真空度为0～5Pa。


6.根据权利要求5所述的注射用安替安吉肽冻干制剂的冻干方法，其特征在于，所述解析干燥还包括：在所述第一阶段之前增加升温阶段，所述升温阶段导热油温度在3～5小时内达到5～10...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯恩承，肖春明，马骉，孔双泉，栾美丽，程玉印，吕晓利，
申请(专利权)人：北京赛升药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11