细胞杀伤剂制造技术

本发明专利技术为具有由序列号1表示的氨基酸序列组成的肽、和选择性结合靶分子的位点的细胞杀伤剂；所述细胞杀伤剂中，由所述序列号1表示的氨基酸序列组成的肽为：全部由L‑氨基酸组成的肽；序列号1表示的氨基酸序列中，第1～14位氨基酸由D‑氨基酸组成、第15～19位氨基酸由L‑氨基酸组成的肽；所述序列号1表示的氨基酸序列中，第1～14位氨基酸为止由L‑氨基酸组成、第15～19位氨基酸由D‑氨基酸组成的肽；或全部由D‑氨基酸组成的肽。

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【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】细胞杀伤剂
本专利技术涉及一种可以选择性诱导靶细胞凋亡的肽药剂。本申请请求基于2017年8月24日提交的日本国专利申请、特愿2017-161556号的优先权，并引用其公开的内容。
技术介绍
细胞凋亡为多细胞生物的细胞死亡中、作为增殖控制机制而被管理/调节的细胞死亡。在多细胞生物中，通过诱导这些细胞的凋亡，来排除在细胞生成和再生过程中产生的不必要的细胞和有害细胞。另外，通过在引起疾病的细胞中诱导细胞凋亡并进行排除，可以期待病情得到改善。因此，也将具有细胞凋亡诱导活性的物质也已经用于医药用途。例如，可以期待通过诱导癌细胞凋亡，来缓解或治愈癌症。当利用诱导细胞凋亡来治疗疾病时，对诱导细胞凋亡的靶细胞的选择性是非常重要的。当靶标选择性低、且在除靶细胞以外的细胞中诱导了凋亡时，则副作用会超过预期的治疗效果，从安全性方面来看不适合作为治疗药。如果能仅针对靶细胞特异性诱导凋亡，则其可以成为充分抑制副作用的有效治疗药。子宫内膜异位症是指子宫内膜细胞在子宫内腔以外的部位增殖的疾病。在许多情况下，子宫内膜细胞在骨盆的腹膜或卵巢中增殖。典型的症状为月经痛(痛经困难)和不孕症，在严重的情况下，会引起剧烈的疼痛，并使人晕厥。另外，也有以子宫内膜异位症为发生母体而引发癌症的情况。子宫内膜细胞在女性荷尔蒙(雌激素)的刺激下增殖。因此，作为子宫内膜异位症的治疗药，使用有抑制雌激素分泌的激素剂，例如低剂量丸剂(低用量ピル)、针对孕酮受体的选择性激动剂(针对卵巢功能及子宫内膜细胞增殖的抑制剂)、促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasinghormone,GnRH)激动剂(卵泡刺激素的分泌抑制剂)。但是，根治疗法只有摘除子宫和卵巢的手术，因此需要开发一种可期待根治子宫内膜异位症的治疗药。例如，专利文献1公开了一种肽组合物，其含有与CNGB3(环状核苷酸门控通道β3(cyclicnucleotide-gatedchannelbeta3))特异性结合的Z13肽与内涵体逃逸肽(endosomalescapepeptide)的融合肽、以及Z13肽与细胞凋亡诱导肽的融合肽。CNGB3是在子宫内膜异位细胞(存在于除子宫内膜以外的子宫内膜细胞)的细胞表面上特异性高表达、而在腹膜表面不表达的分子。通过Z13肽部分将两种肽一起摄入子宫内膜异位症细胞，可选择性地诱导子宫内膜异位症细胞凋亡。实际上，当对患有子宫内膜异位症的狒狒，通过腹腔镜向腹膜施用含有Z13肽与内涵体逃逸肽的融合肽、以及Z13肽与细胞凋亡诱导肽的融合肽的肽组合物时，仅子宫内膜异位症病变的细胞被选择性地诱导凋亡，而相邻的其他细胞则没有被诱导凋亡(参见非专利文献1)。现有技术文献专利文献[专利文献1]美国专利申请第2016/145308号公报说明书专利文献[非专利文献1]Sugihara，etal.，NATURECOMMUNICATIONS，2014年，第5卷，第4478号
技术实现思路
专利技术要解决的课题本专利技术的目的在于，提供一种能够选择性地诱导靶细胞凋亡的肽药物。解决手段本专利技术人为解决上述问题而进行了深入研究，结果发现：与含有Z13肽与内涵体逃逸肽的融合肽、以及Z13肽与细胞凋亡诱导肽的融合肽的肽组合物相比，由特定肽序列组成的内涵体逃逸肽和由特定的肽序列组成的细胞凋亡诱导肽和Z13肽的融合肽，能够以更高的选择性、高效率地诱导表达CNGB3的子宫内膜细胞凋亡。此外还发现CNGB3不仅在子宫内膜和视网膜中表达，其在几个癌细胞中也表达，从而完成了本专利技术。即，本专利技术提供以下的细胞杀伤剂以及子宫内膜异位症模型动物等。[1]一种细胞杀伤剂，其具有由序列号1表示的氨基酸序列组成的肽、和选择性结合靶分子的位点。[2]根据所述[1]的细胞杀伤剂，其中，所述靶分子为存在于细胞或组织表面的分子。[3]根据所述[1]或[2]的细胞杀伤剂，其中，由所述序列号1表示的氨基酸序列组成的肽是：全部由L-氨基酸组成的肽；所述序列号1表示的氨基酸序列中，第1～14位氨基酸由D-氨基酸组成、第15～19位氨基酸由L-氨基酸组成的肽；所述序列号1表示的氨基酸序列中，第1～14位氨基酸由L-氨基酸组成、第15～19位氨基酸由D-氨基酸组成的肽；或全部由D-氨基酸组成的肽。[4]根据所述[1]-[3]中任一项的细胞杀伤剂，其中，所述选择性结合靶分子的位点是肽或蛋白质，由所述序列号1表示的氨基酸序列组成的肽、与所述选择性结合靶分子的位点直接或间接地连接。[5]根据所述[1]-[4]中任一项的细胞杀伤剂，其中，所述靶分子为CNGB3或膜联蛋白I。[6]根据所述[1]的细胞杀伤剂，其中，所述选择性结合靶分子的位点为由序列号2表示的氨基酸序列组成的肽，在由所述序列号1表示的氨基酸序列组成的肽的下游、直接或间接地连接有所述选择性结合靶分子的位点。[7]根据所述[1]的细胞杀伤剂，其中，所述选择性结合靶分子的位点为由序列号3表示的氨基酸序列组成的肽，在所述选择性结合靶分子的位点的下游，直接或间接地连接有由所述序列号1表示的氨基酸序列组成的肽。[8]根据所述[1]-[7]中任一项的细胞杀伤剂，其为细胞异常增殖引起的疾病的治疗剂。[9]根据所述[8]的细胞杀伤剂，其中，所述疾病为子宫内膜异位症或癌症。[10]一种子宫内膜异位症模型动物，其腹腔内中移植有导入了编码CNGB3基因的CNGB3过表达细胞。[11]一种致病细胞表达CNGB3的疾病的疾病发病可能性的评估方法，其包括：测量从被检动物采集的外泌体中的CNGB3，将得到的测量值与预设参考值进行比较，评估所述被检动物发生所述疾病的可能性。[12]根据所述[11]的疾病发病可能性的评估方法，其中，当所述测量值超过所述参考值时，所述被检动物发生所述疾病的可能性评价为高。[13]根据所述[11]或[12]的疾病发病可能性的评估方法，其中，所述外泌体是从所述被检动物采集的血液中分离出来的。[14]根据所述[11]-[13]中任一项的疾病发病可能性的评估方法，其中，使用由序列号2表示的氨基酸序列组成的肽、测量CNGB3。[15]根据所述[11]-[14]中任一项的疾病发病可能性的评估方法，其中，所述被检动物为人类。[16]根据所述[11]-[15]中任一项的疾病发病可能性的评估方法，其中，所述疾病为子宫内膜异位症或癌症。[17]一种生物标记物，其由外泌体中的CNGB3量构成，用于评估有无子宫内膜异位症或癌症的发生。专利技术效果本专利技术提供的细胞杀伤剂，能够非常有效地诱导靶细胞凋亡。因此，该细胞杀伤剂，作为子宫内膜异位症或癌症等细胞异常增殖引起的疾病的治疗剂尤为有效。并且，本专利技术提供的子宫内膜异位症模型动物，可用于针对子宫内膜异位症的治疗剂候选物质的药效试验等。此外，通过本专利技术提供的疾病发本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种细胞杀伤剂，其具有由序列号1表示的氨基酸序列组成的肽、和选择性结合靶分子的位点。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170824 JP 2017-1615561.一种细胞杀伤剂，其具有由序列号1表示的氨基酸序列组成的肽、和选择性结合靶分子的位点。


2.根据权利要求1所述的细胞杀伤剂，其中，所述靶分子为存在于细胞或组织表面的分子。


3.根据权利要求1或2所述的细胞杀伤剂，其中，由所述序列号1表示的氨基酸序列组成的肽是：
全部由L-氨基酸组成的肽；
所述序列号1表示的氨基酸序列中，第1～14位氨基酸由D-氨基酸组成、第15～19位氨基酸由L-氨基酸组成的肽；
所述序列号1表示的氨基酸序列中，第1～14位氨基酸由L-氨基酸组成、第15～19位氨基酸由D-氨基酸组成的肽；或
全部由D-氨基酸组成的肽。


4.根据权利要求1-3中任一项所述的细胞杀伤剂，其中，所述选择性结合靶分子的位点为肽或蛋白质，由所述序列号1表示的氨基酸序列组成的肽、与所述选择性结合靶分子的位点直接或间接地连接。


5.根据权利要求1-4中任一项所述的细胞杀伤剂，其中，所述靶分子为CNGB3(cyclicnucleotide-gatedchannelbeta3)或膜联蛋白I。


6.根据权利要求1所述的细胞杀伤剂，其中，所述选择性结合靶分子的位点是，由序列号2表示的氨基酸序列组成的肽，
在由所述序列号1表示的氨基酸序列组成的肽的下游、直接或间接地连接有所述选择性结合靶分子的位点。


7.根据权利要求1所述的细胞杀伤剂，其中，所述选择性结合靶分子的位点是，由序列号3表示的氨基酸序列组成的肽，
在所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：杉原一广，金山尚裕，小野寺雄一郎，柴田俊章，福田道子，野中元裕，
申请(专利权)人：学校法人藤田学园，
类型：发明
国别省市：日本;JP