一种用于抗菌导尿管抗菌性能的检测方法技术

一种用于抗菌导尿管抗菌性能的检测方法，包括实验菌种、培养基和试剂、菌种的活化、菌悬液的制备、样品制备、标准评判等方面；本发明专利技术的有益效果在于抗菌导尿管样品的制备，依据导尿管本身特性，管体呈圆形，规定表面积为6mm，操作时只需根据不同规格导尿管直径，计算出所需裁剪长度，可直接裁切为圆柱形，制备方便，另外，本方法采用抑菌环差值法，数值统计方便，计算简单，试验时间较短，一人可以独自完成，通常试验完成后48小时可以出检测结果。

A detection method for antibacterial property of antibacterial catheter

【技术实现步骤摘要】
一种用于抗菌导尿管抗菌性能的检测方法
本专利技术属于材料成分效能的检测领域，具体涉及到一种用于抗菌导尿管抗菌性能的检测方法。
技术介绍
抗菌材料是指经抗菌剂处理的具有抗菌性能的各种材料，应用较广泛，如化工、纺织、电子、卫生等各领域，近年来，医用抗菌产品在手术、创伤护理等方面发挥着重要作用，目前市场上已经存在很多具有抗菌性能的医用产品，但抗菌性能检测方法较少，评判标准不统一，会造成针对抗菌或抑菌商标的滥用。抗菌导尿管采用亲水涂层技术，抗菌有效成分涂覆在管体表面，通过药物缓释进行释放，从而达到杀菌或抑菌目的，但目前常用的检测方法是抑菌率检测法，所涉及到的检测设备、耗材及试剂较多，检测时间至少为4天，结果统计比较繁琐。
技术实现思路
针对上述缺陷，本专利技术的目的在于提供一种用于抗菌导尿管抗菌性能的检测方法，该方法能够科学直观的反应抗菌材料的抗菌效果，并且能在短时间内检测出抗菌材料对微生物的杀伤性。为实现上述目的，本专利技术的技术方案如下：一种用于抗菌导尿管抗菌性能的检测方法，其特征在于包括实验菌种、培养基和试剂、菌种的活化、菌悬液的制备、样品制备、标准评判，具体步骤如下：（1）、准备工作（a）实验菌种金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、白色念珠菌、绿脓杆菌，也可以采用其他种类的标准菌种；（b）培养基和试剂胰酪大豆胨琼脂培养、沙氏葡萄糖琼脂培养基、琼脂培养基、pH7.0氯化钠-蛋白胨或生理盐水；（c）菌种活化用移液枪吸取1mL冻存菌液，用棉签在胰酪大豆胨琼脂培养基(细菌)或沙氏葡萄糖琼脂培养基(真菌)上涂抹均匀，细菌在32±2℃条件下培养18-24h，真菌在25±2℃条件下培养48-72h，将培养基贮存于冰箱中，冰箱温度设定为4℃-10℃，作为保存菌，保存期不超过一个月，每周传代一次，传代次数不超过5代；(d)菌悬液制备将真菌或细菌培养物用生理盐水或pH7.0氯化钠-蛋白胨溶液洗下，采用分光光度计或比浊法配制菌液浓度，使菌液浓度达到1×104～9×104cfu/mL，作为菌悬液；(e)样品制备取经灭菌后的抗菌导尿管，在无菌条件下，从有涂过抗菌层的部分开始裁切，裁切要求依据不同规格导尿管直径大小而定，最终裁切成一个表面积为6cm2的圆柱体，普通导尿管裁切操作方法与抗菌导尿管制备方法一致，将制备好的抗菌导尿管样品与普通导尿管样品分别至于3个无菌培养皿中备用；(2)、操作程序(a)菌液涂布用无菌棉签取浓度为1×104～9×104cfu/mL的试验菌悬液，细菌直接涂布在琼脂培养基或胰酪大豆胨琼脂培养基表面，真菌直接涂布在沙氏葡萄糖琼脂培养基表面，均匀涂抹3次，每涂抹1次平板应转动60°，最后将棉签绕平板边缘涂抹一周，盖好无菌培养皿置室温干燥5min；（b）样品帖放每次操作贴放1个含菌培养皿，完成后再打开下一个涂布均匀的含菌培养皿，每个培养皿中贴放1个抗菌导尿管样品和1个普通导尿管样品，共贴放3个培养皿，用无菌镊子取抗菌导尿管样品，裁切端轻轻贴于培养皿表面，并稍用力按压，使抗菌导尿管样品进入培养基内部，普通导尿管样品操作方法与抗菌导尿管样品操作方法完全一致，普通导尿管样品和抗菌导尿管样品之间相距20mm以上，与培养皿的周缘相距15mm以上，操作完成后，盖好培养皿，以培养皿倒置、抗菌导尿管样品和普通导尿管样品不滑落为准，之后进行培养，细菌培养温度为32℃±2℃、时间为18-24h，真菌培养温度为25±2℃、时间为48-72h，培养结束后，用游标卡尺测量抑菌环的直径(含导尿管直径），并立即记录；（3）、标准评判公式：d3=d1-d2式中：d1代表普通导尿管样品抑菌环直径；d2代表抗菌导尿管样品抑菌环直径；d3代表二者的差值；当普通导尿管样品抑菌环直径减去抗菌导尿管样品抑菌环直径，差值大于2mm者，即判定为有抑菌作用；当普通导尿管样品抑菌环直径减去抗菌导尿管样品抑菌环直径，差值小于或等于2mm者，即判定为无抑菌作用。本专利技术的有益效果在于抗菌导尿管样品的制备，依据导尿管本身特性，管体呈圆形，规定表面积为6mm，操作时只需根据不同规格导尿管直径，计算出所需裁剪长度，可直接裁切为圆柱形，制备方便；另外，本方法采用抑菌环差值法，数值统计方便，计算简单，试验时间较短，一人可以独自完成，通常试验完成后48小时可以出检测结果；本方法所涉及的设备、耗材较少，可大大节约检测成本。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所描述的实施例仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1（采用金黄色葡萄球菌）（1）试验菌制备用接种环取保存金黄色葡萄球菌，以划线法接种到胰酪大豆胨琼脂培养基(细菌)上，在33℃条件下培养24h；（2）菌悬液的制备将细菌培养物用生理盐水或pH7.0氯化钠-蛋白胨溶液洗下，采用分光光度计或比浊法配制菌液浓度，使菌液浓度达到1×104～9×104cfu/mL，作为菌悬液；（3）样品制备经灭菌后的抗菌导尿管，在无菌条件下，从有涂过抗菌层的部分开始裁切，裁切要求依据不同规格导尿管直径大小而定，最终裁切成一个表面积为6cm2的圆柱体，普通导尿管裁切操作方法与抗菌导尿管制备方法一致，将制备好的抗菌导尿管样品与普通导尿管样品分别至于3个无菌培养皿中备用；（4）菌液液布用无菌棉签取浓度为1×104～9×104cfu/mL的试验菌悬液，在胰酪大豆胨琼脂培养基表面均匀涂抹3次，每涂抹1次平板应转动60°，最后将棉签绕平板边缘涂抹一周，盖好平皿置室温干燥5min；（5）样品帖放每次操作贴放1个含菌培养皿，完成后再打开下一个涂布均匀的含菌培养皿，每个培养皿中贴放1个抗菌导尿管样品和1个普通导尿管样品，共贴放3个培养皿，用无菌镊子取抗菌导尿管样品，裁切端轻轻贴于培养皿表面，并稍用力按压，使抗菌导尿管样品进入培养基内部，普通导尿管样品操作方法与抗菌导尿管样品操作方法完全一致，普通导尿管样品和抗菌导尿管样品之间相距20mm以上，与培养皿的周缘相距15mm以上，操作完成后，盖好培养皿，以培养皿倒置、抗菌导尿管样品和普通导尿管样品不滑落为准，之后进行培养，细菌培养温度为32℃±、时间为18h，培养结束后，用游标卡尺测量抑菌环的直径(含导尿管直径），并立即记录；（6）标准评判公式：d3=d1-d2式中：d1代表普通导尿管样品抑菌环直径；d2代表抗菌导尿管样品抑菌直径；d3代表二者的差值；当普通导尿管样品抑菌环直径减去抗菌导尿管样品抑菌环直径，差值大于2mm者，即判定为有抑菌作用；当普通导尿管样品抑菌环直径减去抗菌导尿管样品抑菌环直径，差值小于或等于2mm者，即判定为无抑菌作用；（7）结果...

【技术保护点】
1.一种用于抗菌导尿管抗菌性能的检测方法，其特征在于：包括实验菌种、培养基和试剂、菌种的活化、菌悬液的制备、样品制备、标准评判，具体步骤如下：/n（1）、准备工作/n（a）实验菌种/n金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、白色念珠菌、绿脓杆菌，也可以采用其他种类的标准菌种；/n（b）培养基和试剂/n胰酪大豆胨琼脂培养、沙氏葡萄糖琼脂培养基、琼脂培养基、pH7.0氯化钠-蛋白胨或生理盐水；/n（c）菌种活化/n用移液枪吸取1mL冻存菌液，用棉签在胰酪大豆胨琼脂培养基(细菌)或沙氏葡萄糖琼脂培养基(真菌)上涂抹均匀，细菌在32±2℃条件下培养18-24h，真菌在25±2℃条件下培养48-72h，将培养基贮存于冰箱中，冰箱温度设定为4℃-10℃，作为保存菌，保存期不超过一个月，每周传代一次，传代次数不超过5代；/n (d)菌悬液制备/n将真菌或细菌培养物用生理盐水或pH7.0氯化钠-蛋白胨溶液洗下，采用分光光度计或比浊法配制菌液浓度，使菌液浓度达到1×10

【技术特征摘要】
1.一种用于抗菌导尿管抗菌性能的检测方法，其特征在于：包括实验菌种、培养基和试剂、菌种的活化、菌悬液的制备、样品制备、标准评判，具体步骤如下：
（1）、准备工作
（a）实验菌种
金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、白色念珠菌、绿脓杆菌，也可以采用其他种类的标准菌种；
（b）培养基和试剂
胰酪大豆胨琼脂培养、沙氏葡萄糖琼脂培养基、琼脂培养基、pH7.0氯化钠-蛋白胨或生理盐水；
（c）菌种活化
用移液枪吸取1mL冻存菌液，用棉签在胰酪大豆胨琼脂培养基(细菌)或沙氏葡萄糖琼脂培养基(真菌)上涂抹均匀，细菌在32±2℃条件下培养18-24h，真菌在25±2℃条件下培养48-72h，将培养基贮存于冰箱中，冰箱温度设定为4℃-10℃，作为保存菌，保存期不超过一个月，每周传代一次，传代次数不超过5代；
(d)菌悬液制备
将真菌或细菌培养物用生理盐水或pH7.0氯化钠-蛋白胨溶液洗下，采用分光光度计或比浊法配制菌液浓度，使菌液浓度达到1×104～9×104cfu/mL，作为菌悬液；
(e)样品制备
取经灭菌后的抗菌导尿管，在无菌条件下，从有涂过抗菌层的部分开始裁切，裁切要求依据不同规格导尿管直径大小而定，最终裁切成一个表面积为6cm2的圆柱体，普通导尿管裁切操作方法与抗菌导尿管制备方法一致，将制备好的抗菌导尿管样品与普通导尿管样品分别至于3个无菌培养皿中备用；
(2)、操作程序
(a)菌液涂布
用无...

【专利技术属性】
技术研发人员：翟胜娜，崔景强，王幸幸，杨会平，张云云，张洪亮，司松波，司永飞，赵路颖，刘秋华，江利利，牛利卫，张鹏超，
申请(专利权)人：河南驼人贝斯特医疗器械有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41