合成赤藓糖醇的重组解脂耶氏酵母菌的构建方法及其菌株技术

本发明专利技术公开了一种合成赤藓糖醇的重组解脂耶氏酵母菌的构建方法及其菌株。采用解脂耶氏酵母为合成底盘，通过代谢工程改良手段，对该酵母进行基因编辑，增强其合成赤藓糖醇的能力，阻断合成副产物的途径。所述酵母菌株为解脂耶氏酵母Yarrowia lipolytica ery949‑4ΔCGMCC No.19351。以发酵初始浓度为50～350克/升的葡萄糖作为碳源，以发酵初始浓度为5～30克/升的氮源以及无机盐类为原料，高温灭菌，冷却后接入所述解脂耶氏酵母菌株，在有氧的条件下进行连续发酵或分批补料发酵；发酵结束后，从发酵液中提纯赤藓糖醇。该菌株能以葡萄糖等碳源为原料高效合成赤藓糖醇，不合成副产物(如甘露醇等)，不消耗利用赤藓糖醇。

Construction method and strain of recombinant Yersinia lipolytica for erythritol synthesis

【技术实现步骤摘要】
合成赤藓糖醇的重组解脂耶氏酵母菌的构建方法及其菌株
本专利技术属于食品生物
，涉及一种合成赤藓糖醇的重组解脂耶氏酵母菌的构建方法及其菌株；更具体涉及以解脂耶氏酵母菌为底盘微生物，通过代谢工程、基因工程的手段来构建高效发酵合成赤藓糖醇的方法，利用该方法获得能以葡萄糖等碳源发酵合成赤藓糖醇的重组解脂耶氏酵母菌，以及利用该重组菌株来发酵合成赤藓糖醇的方法。
技术介绍
赤藓糖醇(Erythritol)是一种自然存在的四元醇，在海藻以及真菌中常作为一种细胞内碳源储存物质，在一些水果如葡萄、瓜类与梨中均发现有赤藓糖醇的存在(Munroetal.FoodChemToxicol.1988；36(12):1139-74.)。在10％浓度下，甜度为同等蔗糖浓度的70％。由于赤藓糖醇的零热量以及非龋齿性以及非发酵性，广泛用于食品的配料中，如专利技术专利EP0303295A2、EP0676147A1、EP0719094A1、WO2012013296A3、EP0726713A4等均描述了赤藓糖醇在食品中的应用。赤藓糖醇还可以与其它功能糖(醇)进行复配应用于食品中(本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种能高效合成赤藓糖醇的重组解脂耶氏酵母菌株的构建方法，其特征在于，以解脂耶氏酵母菌株为底盘微生物，通过代谢工程或基因工程手段，构建以葡萄糖、甘油、淀粉中的一种或几种为碳源发酵高效合成赤藓糖醇的重组解脂耶氏酵母菌株的方法。/n

【技术特征摘要】
1.一种能高效合成赤藓糖醇的重组解脂耶氏酵母菌株的构建方法，其特征在于，以解脂耶氏酵母菌株为底盘微生物，通过代谢工程或基因工程手段，构建以葡萄糖、甘油、淀粉中的一种或几种为碳源发酵高效合成赤藓糖醇的重组解脂耶氏酵母菌株的方法。


2.如权利要求1所述的能高效合成赤藓糖醇的重组解脂耶氏酵母菌株的构建方法，其特征在于，所述底盘微生物为基因组中含有与SEQIDNO.1序列具有97％及以上同源性的DNA序列的解脂耶氏酵母菌株。


3.如权利要求1所述的能高效合成赤藓糖醇的重组解脂耶氏酵母菌株的构建方法，其特征在于，在底盘微生物解脂耶氏酵母细胞中表达以下基因的一种或一种以上：
(1)编码己糖激酶的基因；
(2)编码转酮酶的基因；
(3)编码转醛酶的基因；
(4)编码4-磷酸-赤藓糖磷酸化酶的基因。


4.如权利要求1或3所述的能高效合成赤藓糖醇的重组解脂耶氏酵母菌株的构建方法，其特征在于，包括在底盘微生物解脂耶氏酵母细胞中敲除其自身的以下基因中的一种或一种以上：
(1)6-磷酸葡萄糖异构酶基因；
(2)甘露醇脱氢酶基因；
(3)阿拉伯糖醇脱氢酶基因；
(4)赤藓糖醇脱氢酶基因。


5.一种如权利要求1-4中任一项所述的构建方法构建得到的能高效合成赤藓糖醇的重组解脂耶氏酵母菌株。


6.一株能高效合成赤藓糖醇的重组解脂耶氏酵母菌株，其特征在于，所述菌株为解脂耶...

【专利技术属性】
技术研发人员：程海荣，王楠，池萍，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：上海;31