一种产孢培养基和细菌芽孢的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种细菌芽孢的制备方法。该方法是利用活化培养基和种子培养基培养细菌，接种于产孢培养基，35‑37°C、150‑200 rpm振荡培养20‑24 h，在培养液中加入0.02%(v:v)triton x‑100继续培养40‑60 min，获得大量高纯度芽孢。本发明专利技术通过对产孢培养基配方、培养条件及营养体处理的探索，有力解决了常规芽孢制备过程需要时间长，步骤繁琐，芽孢质量不能保障的问题。与本领域已知的方法相比，本发明专利技术的芽孢制备方法可在短时间内获得大量高纯度芽孢，且不影响芽孢的形态、萌发率和耐热性基本特性。对开发基于芽孢形式的各种生物制剂，降低生产成本，增加生产效益，确保产品质量具有重要应用价值。

A preparation method of sporulation medium and bacterial spore

【技术实现步骤摘要】
一种产孢培养基和细菌芽孢的制备方法
本专利技术属于芽孢制备
，具体涉及一种细菌芽孢的制备方法。
技术介绍
芽孢是某些细菌在生长发育后期，由于环境中营养的缺乏或有害代谢产物的过多积累，使其在细胞内形成一个圆形或者椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体。芽孢是整个生物界抗热、抗化学药物、抗辐射等抗逆性最强的生物体之一。研究细菌芽孢有着重要的理论和实践意义，具体表现为：1．不同细菌的芽孢具有不同的特点，芽孢的有无、形态、大小和着生位置等是细菌分类和鉴定的依据或重要参考。2．芽孢具有较强的耐热性，将含菌悬浮液进行热处理，杀死所有营养细胞，可以筛选出形成芽孢的细菌种类，有利于提高产芽孢菌种的筛选效率。3．芽孢对低温、干燥等不良环境有很强的抵抗力，可以保持生命力达数十年之久，在实验室是保存菌种的好材料，有利于菌种的长期保藏。4．许多产芽孢细菌是强致病菌。例如炭疽芽孢杆菌、肉毒梭菌和破伤风梭菌等，是否能杀灭一些代表菌的芽孢是衡量和制定各种消毒灭菌标准的主要依据。5．有些产芽孢细菌可伴随产生有用的产物，如苏云本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种细菌芽孢制备中应用的产孢培养基，其特征在于，所述的产孢培养基组成为：每1000 mL蒸馏水中加入的酵母粉0.3-0.5 g，蛋白胨0.3-0.5 g，葡萄糖0.8-1 g，K

【技术特征摘要】
1.一种细菌芽孢制备中应用的产孢培养基，其特征在于，所述的产孢培养基组成为：每1000mL蒸馏水中加入的酵母粉0.3-0.5g，蛋白胨0.3-0.5g，葡萄糖0.8-1g，K2HPO45-7g，KH2PO44-5g，MgSO4·7H2O0.01-0.1g，NaCl0.05-0.2g，CaCl20.01-0.05g，FeSO40.0005-0.001g，调节pH为7.0-7.5。


2.如权利要求1中的一种细菌芽孢制备中应用的产孢培养基，其特征在于，所述的产孢培养基组成为：每1000mL蒸馏水中加入的酵母粉0.3g，蛋白胨0.4g，葡萄糖0.85g，K2HPO45.6g，KH2PO44.5g，MgSO4·7H2O0.08g，NaCl0.15g，CaCl20.04g，FeSO40.0005g，调节pH为7.2。


3.一种应用权利要求1中所述的产孢培养基的细菌芽孢的制备方法，其特征在于，包括步骤如下：
（1）、菌种活化：将细菌在活化培养基划线培养；
（2）、菌种培养：挑取单菌落接种于种子培养基，培养至对数期获得种子菌液，菌体浓度为2×107-6×108CFU/mL；
（3）、芽孢产生：种子菌液接种于所述产孢培养基继续培养；
（4）、裂解营养体：在所述产孢培养液中加入tritonx-100，裂解其中没有形成芽孢的营养体；
（5）、芽孢收集及保存。


4.如权利要求3所述的细菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：王刚，刘凤英，黄秋斌，张娟梅，张海燕，
申请(专利权)人：河南大学，
类型：发明
国别省市：河南;41