一种利用色素蛋白的氧化损伤检测抗氧化剂抗氧化效力的方法技术

本发明专利技术提供了一种利用色素蛋白的氧化损伤检测抗氧化剂抗氧化效力的方法，属于抗氧化剂抗氧化效力测定技术领域。对色素蛋白进行全波长扫描得出蛋白特征吸收峰；在含有色素蛋白和自由基的体系中分别加入阳性抗氧化剂和待测抗氧化剂，根据色素蛋白在特征吸收峰处的吸光值变化利用抗氧化能力公式计算出待测抗氧化剂相当于阳性抗氧化剂的抗氧化当量。本发明专利技术可用于评估抗氧化剂对生物大分子的保护作用，进而评估抗氧化剂的抗氧化效力，准确度更高，更接近于生理的真实水平。

A method of detecting antioxidant activity by oxidative damage of pigment protein

【技术实现步骤摘要】
一种利用色素蛋白的氧化损伤检测抗氧化剂抗氧化效力的方法
本专利技术涉及一种检测抗氧化剂抗氧化效力的方法，属于抗氧化剂抗氧化效力测定

技术介绍
活性氧自由基(ROS)是一类半衰期短、稳定性差且化学性质活泼的物质，包括超氧自由基(O2·-)、羟基自由基(·OH)和过氧化氢(H2O2)等。ROS对生物体具有双重影响：一方面在生物体中，适量的自由基对维持机体正常生理功能及重要生命过程至关重要，如调节机体的新陈代谢与免疫功能，参与细胞的增殖分化、细胞调亡、细胞吸附、神经传导、基因表达等等；另一方面当体内蓄积的自由基过量时就会对机体造成危害，导致生物体正常细胞和组织损伤，过量的自由基会攻击细胞膜上的大分子物质，破坏细胞正常组分，使生物体内正常生理生命功能发生紊乱。活性氧对蛋白质的作用主要包括修饰氨基酸、使肽链断裂、形成蛋白质的交联聚合物、改变构像和免疫原性等五个方面。由活性氧引起的蛋白质氧化性损伤与衰老、肿瘤、糖尿病及许多神经退行性疾病的发生相关。目前检测蛋白质氧化损伤的方法主要是通过检测蛋白质氧化损伤标志物，如测定蛋白质本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用色素蛋白的氧化损伤检测抗氧化剂抗氧化效力的方法，其特征在于，对色素蛋白进行全波长扫描得出蛋白特征吸收峰；在含有色素蛋白和自由基的体系中分别加入阳性抗氧化剂和待测抗氧化剂，根据色素蛋白在特征吸收峰处的吸光值变化，利用抗氧化能力公式计算出待测抗氧化剂相当于阳性抗氧化剂的抗氧化当量。/n

【技术特征摘要】
1.一种利用色素蛋白的氧化损伤检测抗氧化剂抗氧化效力的方法，其特征在于，对色素蛋白进行全波长扫描得出蛋白特征吸收峰；在含有色素蛋白和自由基的体系中分别加入阳性抗氧化剂和待测抗氧化剂，根据色素蛋白在特征吸收峰处的吸光值变化，利用抗氧化能力公式计算出待测抗氧化剂相当于阳性抗氧化剂的抗氧化当量。


2.根据权利要求1所述的的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)对色素蛋白进行全波长扫描得出蛋白特征吸收峰；
(2)以自由基的浓度梯度，设置多个反应体系，每个反应体系中均加入浓度和体积固定的色素蛋白，反应总体积固定，在色素蛋白的特征吸收峰波长处连续测定OD值；
(3)以阳性抗氧化剂的浓度梯度，设置多个反应体系，每个反应体系中均加入浓度和体积固定的色素蛋白、自由基，以不加抗氧化剂的一组为对照组，反应总体积固定，在色素蛋白的特征吸收峰波长处连续测定OD值，找到阳性抗氧化剂的最高和最低浓度检测限；
(4)在步骤(3)的体系中将阳性抗氧化剂换成待测抗氧化剂，检测待测抗氧化剂的抗氧化效力；根据抗氧化能力公式(1.1)计算待测抗氧化剂的抗氧化能力；



其中，AUCsample,AUCcontrol和AUCtrolox分别代表待测样品组、对照组和阳性抗氧化剂组曲线与x轴的积分面积，Ctrolox代表阳性抗氧化剂的浓度，Wsample代表待测样品的质量浓度。


3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述的阳性抗氧化剂包括：trolox或者维生素C，优选trolox。


4.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述的色素蛋白包括：藻蓝蛋白、牛血红蛋白、藻红蛋白、绿色荧光蛋白中的一种或几种，优选藻蓝蛋白、牛血红蛋白中的一种或两种。


5.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述的自由基是由包括：AAPH在内的自由基引发剂引发产生，或者是Fenton反应所产生的羟自由基，优选AAPH在内的自由基引发剂引发产生。


6.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，
藻蓝蛋白为...

【专利技术属性】
技术研发人员：何海伦，刘聪伶，易翠萍，刘丹，李乾斌，黄嘉丰，宦冉，王猛，
申请(专利权)人：中南大学，
类型：发明
国别省市：湖南;43