一种异噁唑啉类化合物的高效液相色谱分析方法技术

本发明专利技术公开了一种异噁唑啉类化合物的高效液相色谱分析方法，包括如下步骤：(1)制备供试品溶液：乙腈溶液溶解异噁唑啉类化合物原料药；(2)采用反相高效液相色谱对供试品溶液进行检测，所述反相高效液相色谱检测条件为：流动相：A：乙腈；B：纯化水；洗脱方式：梯度洗脱。本发明专利技术提供的异噁唑啉类化合物的高效液相分析方法，检测灵敏度高，稳定性高，可靠性高，理论塔板数高，同时操作相对简单等，能够有效测出异噁唑啉类化合物含量，有利于保证异噁唑啉类化合物原料药及制剂的质量。

A method for the analysis of isoxazolines by high performance liquid chromatography

【技术实现步骤摘要】
一种异噁唑啉类化合物的高效液相色谱分析方法
本专利技术属于药物分析检测
，具体涉及一种异噁唑啉类化合物的高效液相色谱分析方法。
技术介绍
异噁唑啉类化合物化学名为4-[5-(3,5-二氯苯基)]-4,5-二氢-5-三氟甲基-3-异噁唑基]-2-甲基-N-[2-氧代-2-[2.2.2-三氟乙基)氨基]]苯甲酰胺，是一种新型广谱兽药，属于异噁唑啉类动物杀虫剂，对蜱类、蚤目、虱目、半翅目和双翅目等害虫均有良好的杀虫活性，其毒力高于与常用杀虫剂相当。通过干预γ-氨基丁酸(GABA)门控氯离子通道发挥其作用，与苯基吡唑类，环戊二烯类和大环内酯类等动物杀虫剂相比较而言，异噁唑啉类化合物在分子结构、作用位点、选择性以及交互抗性等方面均有者显著的差异，具有对哺乳动物安全、杀虫活性较高等特性。目前异噁唑啉类化合物并没有统一的质量标准，为了保证异噁唑啉类化合物后续的研究和生产质量，需要对异噁唑啉类原料药进行质量控制。因此，开发一种稳定性好、准确快速的分析方法显得尤为重要。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种稳定性好、重复性好、理论塔板数高、有效排除杂质影响准确定量分析异噁唑啉类化合物的高效液相色谱分析方法。本专利技术所采取的技术方案是：一种异噁唑啉类化合物的高效液相色谱分析方法，包括如下步骤：(1)制备供试品溶液：乙腈溶液溶解异噁唑啉类化合物原料药；(2)采用反相高效液相色谱对供试品溶液进行检测，所述反相高效液相色谱检测条件为：流动相：A：乙腈；B：纯化水；洗脱方式：梯度洗脱。进一步的，上述梯度洗脱程序为：进一步的，上述乙腈溶液的体积浓度为50％～70％。进一步的，上述供试品溶液中异噁唑啉类化合物原料药的浓度为0.5～1.5mg/mL。进一步的，上述反相高效液相色谱中流动相的流速为0.9～1.1mL/min。进一步的，上述反相高效液相色谱的色谱柱温为25℃～35℃。进一步的，上述反相高效液相色谱的进样量为18μL～25μL。进一步的，上述反相高效液相色谱的检测波长为240nm～260nm。进一步的，上述反相高效液相色谱的色谱柱为C18色谱柱：4.6×250mm，5μm。进一步的，上述反相高效液相色谱中进样量为20μL，流动相流速为1.0mL/min，色谱柱柱温为30℃，检测波长为251nm。本专利技术的有益效果是：本专利技术提供的异噁唑啉类化合物的高效液相分析方法，检测灵敏度高，稳定性高，可靠性高，理论塔板数高，同时操作相对简单优点，能够有效测出异噁唑啉类化合物含量，有利于保证异噁唑啉类化合物原料药及制剂的质量。附图说明图1为实施例1中异噁唑啉类化合物供试品溶液的高效液相色谱图。图2为实施例2中异噁唑啉类化合物供试品溶液的高效液相色谱图。图3为异噁唑啉类化合物供试品溶液线性试验关系图。图4为对比例1中异噁唑啉类化合物供试品溶液的高效液相色谱图。图5为对比例2中异噁唑啉类化合物供试品溶液的高效液相色谱图。图6为对比例4中异噁唑啉类化合物供试品溶液的高效液相色谱图。图7为对比例6中异噁唑啉类化合物供试品溶液的高效液相色谱图。具体实施方式下面进一步列举实施例以详细说明本专利技术。同样应理解，以下实施例只用于对本专利技术进行进一步说明，不能理解为对本专利技术保护范围的限制，本领域技术人员根据本专利技术阐述的原理做出的一些非本质的改进和调整均属于本专利技术的保护范围。下述示例具体的工艺参数等也仅是合适范围中的一个示例，即本领域技术人员可以通过本文的说明做合适范围内的选择，而并非要限定于下文示例的具体数据。以下各实施例、对比例和各试验中采用的试剂中，乙腈为国外进口HPLC级别，品牌为Fisher，水为纯化水，以减少基线噪音，采用的高效液相色谱仪为赛默飞Ultimate3000。实施例1：异噁唑啉类化合物的反相高效液相色谱分析方法供试品溶液的制备：称取异噁唑啉类化合物原料约20mg，精密称定于20mL容量瓶中，加适量体积浓度为60％乙腈水溶液溶解并稀释至刻度，混匀。色谱测定条件：色谱柱：C18，规格4.6×250mm，5μm；流动相：A：乙腈；B：纯化水；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；进样量：20μL；梯度洗脱程序：时间(min)流动相A(体积分数，％)流动相B(体积分数，％)0.0208015.0505045.0604055.0901056.0208065.02080在实施例1色谱条件下，供试品溶液的检测色谱图如图1所示。根据图1可以看出，异噁唑啉类化合物保留时间为34.913min，峰形良好，拖尾因子为1.01，峰纯度良好，理论塔板数为67540。实施例2：异噁唑啉类化合物的反相高效液相色谱分析方法供试品溶液的制备：称取异噁唑啉类化合物原料约20mg，精密称定于20mL容量瓶中，加适量体积浓度为60％乙腈水溶液溶解并稀释至刻度，混匀。色谱测定条件：色谱柱：C18，规格4.6×250mm，5μm；流动相：A：乙腈；B：纯化水；流速：0.9mL/min；柱温：30℃；进样量：20μL；梯度洗脱程序：时间(min)流动相A(体积分数，％)流动相B(体积分数，％)0.0208015.0505045.0604055.0901056.0208065.02080在实施例2色谱条件下，供试品溶液的检测色谱图如图2所示。根据图2可以看出，异噁唑啉类化合物保留时间为36.033min，拖尾因子为1.03，峰形较好，理论塔板数为64047。系统适应性实验：异噁唑啉类化合物含量测定的系统适应性试验供试品溶液的制备：称取异噁唑啉类化合物20.65mg，精密称定于20mL容量瓶中，加适量体积浓度为60％乙腈水溶液溶解并稀释至刻度，混匀，得异噁唑啉类化合物浓度为1.0325mg/mL。色谱测定条件：色谱柱：C18，规格4.6×250mm，5μm；流动相：A：乙腈；B：纯化水；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；进样量：20μL；梯度洗脱程序：...

【技术保护点】
1.一种异噁唑啉类化合物的高效液相色谱分析方法，包括如下步骤：/n(1)制备供试品溶液：乙腈溶液溶解异噁唑啉类化合物原料药；/n(2)采用反相高效液相色谱对供试品溶液进行检测，所述反相高效液相色谱检测条件为：/n流动相：A：乙腈；B：纯化水；/n洗脱方式：梯度洗脱。/n

【技术特征摘要】
1.一种异噁唑啉类化合物的高效液相色谱分析方法，包括如下步骤：
(1)制备供试品溶液：乙腈溶液溶解异噁唑啉类化合物原料药；
(2)采用反相高效液相色谱对供试品溶液进行检测，所述反相高效液相色谱检测条件为：
流动相：A：乙腈；B：纯化水；
洗脱方式：梯度洗脱。


2.根据权利要求1所述的异噁唑啉类化合物的高效液相色谱分析方法，其特征在于：梯度洗脱程序为：
当时间为0.0min时，流动相中A的体积分数为20％，B的体积分数为80％；
当时间为15.0min时，流动相中A的体积分数为50％，B的体积分数为50％；
当时间为45.0min时，流动相中A的体积分数为60％，B的体积分数为40％；
当时间为55.0min时，流动相中A的体积分数为90％，B的体积分数为10％；
当时间为56.0min时，流动相中A的体积分数为20％，B的体积分数为80％；
当时间为65.0min时，流动相中A的体积分数为20％，B的体积分数为80％。


3.根据权利要求1所述的异噁唑啉类化合物的高效液相色谱分析方法，其特征在于：步骤(1)中所述乙腈溶液的体积浓度为50％～70％。


4.根据权利要求1所述的异噁唑啉类化合...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯绮晴，陈月嫦，黄丽霞，
申请(专利权)人：丽珠集团新北江制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44