一种液相色谱-串联质谱法检测口含烟中四种亚硝基氨基酸的方法技术

一种液相色谱‑串联质谱法检测口含烟中四种亚硝基氨基酸(包括NSAR、NAzCA、NMPA、NMBA)的方法，其特征在于：该方法采用去离子水对口含烟样品进行涡旋萃取，上清液加入硅藻土固相支撑液液萃取柱，用有机溶剂洗脱，收集洗脱液浓缩至干后再用去离子水复溶，最后进液相色谱‑串联质谱联用仪(LC‑MS/MS)分析。本发明专利技术分析测定方法的突出优点是：样品无需衍生化处理，前处理相对简单，准确度高、灵敏度高、精密度好、加标回收率高，适用于大批量样品的分析。可实现各类型口含烟四种亚硝基氨基酸的同时检测。

A method for the determination of four nitroso amino acids in cigarette by liquid chromatography tandem mass spectrometry

【技术实现步骤摘要】
一种液相色谱-串联质谱法检测口含烟中四种亚硝基氨基酸的方法
本专利技术属于口含烟中有害成分的研究，具体涉及一种液相色谱-串联质谱法检测口含烟中四种亚硝基氨基酸的方法。
技术介绍
口含烟是一类通过口腔使用的无烟气烟草制品，产品形式包括美式湿含烟(moistsnuff)、瑞典含烟(snus)、含化型烟草制品(dissolvabletobaccoproducts，DSP)、胶基式烟草制品(口香糖型)、嚼烟、干含烟(Drysnuff)等。该类产品与传统卷烟的区别在于消费者可直接含服或咀嚼消费此类产品。近些年，世界卫生组织烟草控制框架公约(WHOFCTC)禁止烟草烟气在公共场所扩散等限制和禁令对传统卷烟造成强大冲击。在这种背景下，世界各国烟草行业纷纷把口含烟作为重要发展方向之一。在市场发展的同时，口含烟中的有害成分亦受到消费者越来越多的重视。亚硝基氨基酸是烟草中4种主要亚硝基化合物之一，N-亚硝基肌氨酸(N-Nitrososarcosine，NSAR)、3-(N-甲基亚硝基氨基)丙酸(3-(N-methylnitrosamino)本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种液相色谱-串联质谱法检测口含烟中四种亚硝基氨基酸的方法，四种亚硝基氨基酸包括NSAR、NMPA、NMBA、NAzCA，其特征在于：该方法采用去离子水对口含烟样品进行涡旋萃取，上清液加入硅藻土固相支撑液液萃取柱，用有机溶剂洗脱，收集洗脱液浓缩至干后再用去离子水复溶，最后进LC-MS/MS分析。/n

【技术特征摘要】
1.一种液相色谱-串联质谱法检测口含烟中四种亚硝基氨基酸的方法，四种亚硝基氨基酸包括NSAR、NMPA、NMBA、NAzCA，其特征在于：该方法采用去离子水对口含烟样品进行涡旋萃取，上清液加入硅藻土固相支撑液液萃取柱，用有机溶剂洗脱，收集洗脱液浓缩至干后再用去离子水复溶，最后进LC-MS/MS分析。


2.根据权利要求1所述的检测口含烟中四种亚硝基氨基酸的方法，其特征在于：该方法具体包括以下步骤：
a、口含烟样品的萃取：称取一定量口含烟样品于萃取离心管中，加入一定量萃取溶液，涡旋萃取并离心，萃取溶液为含内标的去离子水；
b、口含烟样品的富集及净化：取上清液一定量5mL加入硅藻土固相支撑液液萃取柱，用乙酸乙酯分3次进行萃取洗脱，每次用量10mL，收集洗脱液45℃下浓缩至干，用0.5mL去离子水复溶、混匀；
c、样品的分析：
LC-MS/MS分析所用色谱柱为WatersT3分析柱，规格150mm×2.1mm,3.0μm；柱温：40℃；流动相A和B分别为0.1％的甲酸水溶液和乙腈；梯度洗脱；流速250μL/min；进样体积5μL；
离子源：电喷雾电离源；扫描方式：负离子扫描；检测方式：多反应监测MRM；电喷雾电压：-4500V；气帘气压力：30psi；辅助气1压力：60psi；辅助气2压力：60psi；离子源温度：500℃。


3.根据权利要求1或2所述的检测口含烟中四种亚硝基氨基酸的方法，其特征在于：当口含烟样本为胶基型时，称取1g左右口含烟样本，加入约1mL正己烷分散样本；对于片状含化型口含烟制品，需对其进行研磨，然后称取约1g左右样本；对于美式湿含烟、直接称取1g或1袋于50mL萃取离心管中。


4.根据权利要求1或2所述的检测口含烟中四种亚硝基氨基酸的方法，其特征在于：每个样品萃取溶液用量为5～10mL，涡旋萃取时间约10～30min,涡旋...

【专利技术属性】
技术研发人员：王冰，王晓瑜，余晶晶，蔡君兰，谢复炜，王昇，秦亚琼，赵晓东，刘克建，华辰凤，
申请(专利权)人：中国烟草总公司郑州烟草研究院，
类型：发明
国别省市：河南;41