新属内生真菌TK815及其应用制造技术

本发明专利技术涉及微生物技术领域，特别涉及新属内生真菌TK815及其应用。本发明专利技术的内生真菌TK815是目前有别于现有技术的新菌种，发现于广西百色市乐业县大石围天坑群白洞天坑的土壤中，TK815是Herpotrichiellaceae科的一个新属，将该属微生物命名为Tiankengomelania guangxiense，菌株TK815为该属的模式菌株；该新属微生物的发现丰富了内生真菌的可利用微生物资源，该菌株对铁皮石斛具有良好的促生效果。

New endophytic fungus tk815 and its application

【技术实现步骤摘要】
新属内生真菌TK815及其应用
本专利技术涉及微生物
，特别涉及新属内生真菌TK815及其应用。
技术介绍
内生真菌(Endophyticfungi)广泛存在于健康植物组织器官中，具有极其丰富的物种多样性和功能多样性。作为一类未被充分研究的微生物资源，内生真菌资源种类繁多，包括不少稀有、特殊(或新的分类单元)的菌株，其生态功能也逐渐被人们所发现和揭示。研究表明，内生真菌能与宿主互惠共生，赋予植物优良生长性状，能提高宿主的抗病虫能力及在胁迫环境中的抗逆性，从而可减少化肥、农药的使用。这类真菌具有生态分布广泛、宿主范围广及可分离纯培养的特性，这就决定了它们在农业可持续发展中将发挥越来越重要的作用，具有更为广阔的应用前景。申请人对内生真菌有很深入的研究，一直在不断探索新的内生真菌，例如，申请号为201410220964.7《一种DSE菌株及其在甘蔗生产上的应用》的内生真菌，该真菌由申请人从广西北部湾红树植物分离而得，属于Devriesia属，具有促进铁皮石斛生长的作用；申请号为201610652927.2《防治香蕉枯萎病的内生真菌L-14及其应用》的内生真菌，该真菌由申请人从土壤中诱捕分离获得，属于Schizothecium属，具有防治香蕉枯萎病的作用；申请号为201410220965.1《DSE菌株24L-4及其在铁皮石斛生产上的应用》的内生真菌，该真菌由申请人从茶花叶部组织分离获得，属于Devriesia属；同时，行内含有很多其他申请人发现的内生真菌，例如申请号：201410220965.1《DSE菌株24L-4及其在铁皮石斛生产上的应用》都公布了深色有个内生真菌在促进铁皮石斛生长上的应用，但是，201710833508.3中公布的微生物为平脐疣孢属的某个种(Zasmidiumsp.)而201410220965.1中公布的微生物为德弗霉菌属的某个种(Devriesiasp.)；由于内生真菌与宿主具有良好的互惠共生关系，目前对它的研究尚未停止，自然界中存在很多未被我们认识和发现的新种内生真菌，为了丰富内生真菌的种质资源，有必要进行本申请的研究。
技术实现思路
鉴于上述内容，为了丰富内生真菌的种质资源，有必要对内生真菌进行筛选、分类、研究，申请人在此基础上发掘了一株新属内生真菌TK815，该菌株可与促进铁皮石斛进行共生。为达到上述目的，本专利技术筛选出一种新属菌株TiankengomelaniaguangxienseTK815，其保藏编号为CGMCCNO:14346，该菌株于2017年06月29日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址位于：中国.北京.中国科学院微生物研究所。进一步的，所述菌株从土壤中通过植物诱捕法分离而得。进一步的，所述土壤采集自特殊生境的广西百色市乐业县大石围天坑群白洞天坑的原始森林。本专利技术还提供了所述的新属菌株TiankengomelaniaguangxienseTK815在促进被子植物生长上的应用。进一步的，所述被子植物为铁皮石斛和/或甘蔗。进一步的，所述铁皮石斛为铁皮石斛组培苗和/或盆栽苗，所述甘蔗为甘蔗组培苗和/或盆栽苗。本专利技术还提供了一种分离所述新属菌株TiankengomelaniaguangxienseTK815的方法，采用白菜为诱饵植物诱捕土样中的微生物，将白菜种子催芽后与土样与灭菌育苗基质混合培养，一个月后取出白菜根部洗净消毒后放入分离培养基平板上，待菌丝长出后转化到纯化培养基上纯化，获得所述菌株。进一步的，所述分离培养基为：1/2玉米粉培养基，其组分为：玉米粉琼脂8.5g，琼脂粉15g，补蒸馏水定容至1000mL。进一步的，所述纯化培养基为：CMMY培养基，其组分为：麦芽汁琼脂10g，玉米粉琼脂8.5g，酵母提取物2g，琼脂粉7.5g，补蒸馏水定容至1000mL。本专利技术还提供了一种应用所述新属菌株TiankengomelaniaguangxienseTK815促进被子植物生长的方法，所述方法为：将菌株TK815接种到被子植物的组培苗和/或植株中；所述接种方法为将被子植物的组培苗直接接种于含TK815菌株的培养基中。本专利技术具有以下有益效果：(1)本专利技术的内生真菌TK815是目前有别于现有技术的新菌种，发现于广西百色市乐业县大石围天坑群白洞天坑的土壤中，该菌株的亲缘关系与Herpotrichiellaceae科很近。在Herpotrichiellaceae科下选择各属代表物种的ITS+18S+28S序列与菌株TK815的相关序列一起构建系统发育树，结果显示，菌株TK815形成一个独立的分枝，并没有与任何已知种聚在一起；因此判定，TK815是Herpotrichiellaceae科的一个新属，将该种命名为Tiankengomelaniaguangxiense并选菌株TK815为该属的模式菌株。该新属微生物的发现丰富了内生真菌的可利用微生物资源，该菌株对铁皮石斛具有良好的促生效果，该菌株是该地域首次发现的对铁皮石斛具有明显促生效果的内生真菌，填补了目前相关领域研究的空白，对于后续该地区种植铁皮石斛起到一定的指导作用。TK815菌株为广西大石围天坑群白洞天坑原始森林的土壤内生真菌在铁皮石斛生产上的开发利用提供了资源保障。【附图说明】图1是菌株TK815基于ITS序列构建的系统发育树图2是TK815的菌株的形态形态观察图；其中，图A表示菌株的菌落形态；图B-I表示菌株的分生孢子和分生孢子梗；标尺：A＝3cm；B-I＝10μm。图3是平皿培养铁皮石斛苗接种TK815菌株后长势对照；其中，左侧表示对照的平皿苗；右侧表示接种TK815后的平皿苗；图4是盆栽铁皮石斛苗接种TK815菌株后长势对照，其中，左侧表示对照的盆栽苗；右侧表示接种TK815后的盆栽苗。【具体实施方式】本专利技术提供了一株新属菌株TiankengomelaniaguangxienseTK815，其保藏编号为CGMCCNO:14346，该菌株于2017年06月29日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址位于：中国.北京.中国科学院微生物研究所。实施例1：对本专利技术所述的新属菌株TiankengomelaniaguangxienseTK815进行形态鉴定和分子生物学鉴定，具体如下：(1)形态学鉴定：如图2的A部分所示，菌株菌落形态观察为：菌落在CMMY培养基(麦芽汁培养基)上生长缓慢，28℃下培养两周后菌落直径为12-15mm。菌落近圆形，深灰黑色，隆起，有辐射状沟纹。如图2的B-I部分所示，该菌株的菌丝光滑，有隔，浅褐绿色，宽1.6-3.4μm。分生孢子梗直立，有分隔，无分枝或1个分枝，比菌丝稍粗，浅褐绿色，有产孢痕，4.6-87.8×1.7-3μm。分生孢子棍棒状，表面粗糙，端部钝圆，基部平截，浅褐绿色，0-2个分隔，隔膜处缢缩，5.1-14.9×1.1-2.4μm。(2)本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.新属菌株Tiankengomelania guangxiense TK815，其保藏编号为CGMCC NO:14346。/n

【技术特征摘要】
1.新属菌株TiankengomelaniaguangxienseTK815，其保藏编号为CGMCCNO:14346。


2.根据权利要求1所述的新属菌株TiankengomelaniaguangxienseTK815，其特征在于，所述菌株从土壤中通过植物诱捕法分离而得。


3.根据权利要求2所述的新属菌株TiankengomelaniaguangxienseTK815，其特征在于，所述土壤选自广西百色市乐业县大石围天坑群白洞天坑。


4.如权利要求1-3任意一项所述的新属菌株TiankengomelaniaguangxienseTK815在促进被子植物生长上的应用。


5.根据权利要求4所述应用，其特征在于，所述被子植物为铁皮石斛和/或甘蔗。


6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述铁皮石斛为铁皮石斛组培苗和/或盆栽苗；甘蔗为甘蔗组培苗和/或盆栽苗。


7.一种分离如权利要求1-3任意一项所述新属菌株Tiankeng...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢玲，龙艳艳，张艳，张雯龙，农倩，陈艳露，廖仕同，覃丽萍，
申请(专利权)人：广西壮族自治区农业科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：广西;45