一种豆瓣酱中特丁基对苯二酚含量的检测方法技术

本发明专利技术属于特丁基对苯二酚含量检测技术领域，公开了一种豆瓣酱中特丁基对苯二酚含量的检测方法，采用超高效液相色谱方法，以甲醇为豆瓣酱中特丁基对苯二酚的提取溶剂，HLB(hydrophile‑lipophile balance)固相萃取小柱净化；十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱分离，水和甲醇混合溶剂为流动相，荧光检测器的激发检测波长为293±2nm，发射波长为332±2nm。本发明专利技术的方法操作简单可靠，可有效消除杂质干扰，有机溶剂消耗少，重现性好，获得良好的检测效果。

A method for the determination of TERT butylhydroquinone in bean paste

【技术实现步骤摘要】
一种豆瓣酱中特丁基对苯二酚含量的检测方法
本专利技术属于食品安全检测
，尤其涉及一种豆瓣酱中特丁基对苯二酚含量的检测方法。
技术介绍
目前，最接近的现有技术：特丁基对苯二酚(TBHQ)是食品工业中广泛使用的一种抗氧化剂。它可以提高食品的稳定性，特别适用于动植物脂肪以及富脂食品。另外，它还可以有效抑制细菌及霉菌生长，对黄曲霉等危害人体健康的霉菌有很好的抑制作用。但由于其具有潜在的毒性和致癌作用，为保护人体健康，各国明确规定了其在食品中的最大使用限量。一些发达国家和地区出于维护本国经济利益和保护人们健康的需要，对食品中特丁基对苯二酚的残留量等卫生指标提出了严格的限量要求，尤其是日本禁止其在食品中使用。由于豆瓣酱中油脂含量高、样品基体复杂，对目标物干扰严重，使用现行的技术极易出现假阳性结果。且现行的检测技术主要采用以下两种手段：⑴采用凝胶色谱净化，该技术手段需要额外购置金额较大的凝胶色谱设备。该设备操作繁琐对人员素质要求较高，且使用过程需要消耗一定量的有机溶剂；⑵使用大量的有机溶剂进行反复的萃取，需要低压旋转蒸干和(或者)氮气吹干，该技术手段操作繁琐且对环境和人体健康带来潜在的危害。以上两种手段均存在操作繁锁，消耗时间，使用大量的有机试剂不但提高经济成本而且对环境和人体健康带来潜在的风险和隐患，且现有的检测方法灵敏度较差。综上所述，现有技术存在的问题是：需额外的大金额设备投入，存在操作不便，消耗有机试剂种类多且消耗量大，检测杂质干扰明显，灵敏度较差，检测误差较大。解决上述技术问题的难度：含油食品中油脂含量高、样品基体复杂，对目标物干扰严重。解决上述问题的最关键是建立有效的前处理净化步骤，尽可能去除杂质干扰，同时选择检测灵敏度高的仪器手段，从而获得较好的检测方法。解决上述技术问题的意义：本专利技术建立前处理简单、定性准确、灵敏度高的，适应当前测工作需要的检测方法，对于有效控制食品生产和加工过程中合理使用特丁基对苯二酚，保障人民身体健康具有重大意义。同时应用本专利技术的检测过程中减少有机试剂的使用，可以更好的保护环境和检测人员的人身健康。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种豆瓣酱中特丁基对苯二酚含量的检测方法。本专利技术是这样实现的，一种豆瓣酱中特丁基对苯二酚含量的检测方法，所述豆瓣酱中特丁基对苯二酚含量的检测方法采用超高效液相色谱方法，以甲醇为豆瓣酱中特丁基对苯二酚提取溶剂，HLB(hydrophile-lipophilebalance)固相萃取小柱净化；十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱分离，水和甲醇混合溶剂为流动相，激发检测波长为293±2nm，发射检测波长为332±2nm。进一步，所述豆瓣酱中特丁基对苯二酚含量的检测方法的色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，用超高效液相色谱仪(配荧光检测器)进行检测；流动相是甲醇-水，流速0.25-0.4ml/min；柱温是20-40℃。进一步，所述豆瓣酱中特丁基对苯二酚含量的检测方法的样品处理：称量特丁基对苯二酚标准物质约为50.0mg，放入50ml容量瓶中，加入色谱纯甲醇溶解后并定容至刻度线。进一步，称量称取2g豆瓣酱试样于50mL离心管中，加入甲醇5mL作为提取剂提取，漩涡15s，振荡提取10min，6000r/min离心5min，移除上清液；残渣再加入5mL提取液，重复提取1次，合并上清液后，取5ml，加入水10ml，10000r/min离心15min，上清液待净化。进一步，固相萃取柱活化用3ml甲醇，2ml水；上样：全部待净化液过柱，流速不能超过1滴/s；淋洗用3mL50％甲醇；洗脱：1ml80％甲醇，收集该溶液于仪器配套的2mL样品小瓶中，供超高效液相色谱仪分析。进一步，所述豆瓣酱中特丁基对苯二酚含量的检测方法的对标准品与样品进行自动进样，用外标法以峰面积计算特丁基对苯二酚的含量。综上所述，本专利技术的优点及积极效果为：本专利技术采用超高效液相色谱方法，以甲醇为特丁基对苯二酚提取溶剂，十八烷基硅烷键合硅胶的固相萃取柱净化，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱分离，甲醇和水为流动相，超高效液相色谱配荧光检测器检测。本专利技术的方法操作简单(与现有技术的对比见表1，可有效消除杂质干扰(与现有技术的对比见图和图)，获得良好的检测效果。表1本专利技术与现有技术比较表附图说明图1是本专利技术实施例提供的豆瓣酱中特丁基对苯二酚含量的检测方法流程图。图2是本专利技术实施例提供的特丁基对苯二酚标准物质的超高效液相色谱图。图3是本专利技术实施例提供的未净化的豆瓣酱样品超高效液相色谱检测谱图。图4是本专利技术实施例提供的净化后的豆瓣酱样品超高效液相色谱检测谱图。图5是本专利技术实施例提供的应用本专利技术的含有特丁基对苯二酚的豆瓣酱样品检测谱图。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种豆瓣酱中特丁基对苯二酚含量的检测方法，下面对本专利技术作详细的描述。如图1所示，本专利技术实施例提供的豆瓣酱中特丁基对苯二酚含量的检测方法包括以下步骤：S101：采用超高效液相色谱方法，以甲醇为豆瓣酱中特丁基对苯二酚提取溶剂，HLB固相萃取小柱净化；S102：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱分离，水和甲醇混合溶剂为流动相，激发检测波长为293±2nm，发射检测波长为332±2nm。在本专利技术的优选实施例中，色谱条件：色谱柱是以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，用超高效液相色谱仪(配荧光检测器)进行检测；色谱柱的温度是35℃；流动相是甲醇-水，流速0.35ml/min，采用梯度洗脱的方法见下表2。表2流动相梯度洗脱时间程序表甲醇(％)水(％)预平衡10900.0010905.00901012.009010在本专利技术的优选实施例中，样品处理：精密称量标准品约为50.0mg，放入50mL容量瓶中，加入色谱纯甲醇溶解后定容至刻度线。称取2±0.1g豆瓣酱试样于50mL离心管中，加入甲醇5mL作为提取剂提取，漩涡15s，超声提取10min，6000r/min离心5min，移除上清液。残渣再加入5mL提取液，重复提取1次，合并上清液后，取5ml，加入水10ml，10000r/min离心10min，上清液待净化。固相萃取柱净化用3ml甲醇，2ml水。上样：全部待净化液过柱，流速不能超过1滴/s；淋洗用3mL50％甲醇；洗脱：1ml80％甲醇，收集该溶液于仪器配套的2mL样品小瓶中作为待测样品液，供超高效液相色谱仪分析。在本专利技术的优选实施例中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种豆瓣酱中特丁基对苯二酚含量的检测方法，其特征在于，所述豆瓣酱中特丁基对苯二酚含量的检测方法采用超高效液相色谱方法，以甲醇为豆瓣酱中特丁基对苯二酚的提取溶剂，HLB(hydrophile-lipophile balance)固相萃取小柱净化；十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱分离，水和甲醇混合溶剂为流动相，荧光检测器的激发检测波长为293±2nm，发射波长332±2nm。/n

【技术特征摘要】
1.一种豆瓣酱中特丁基对苯二酚含量的检测方法，其特征在于，所述豆瓣酱中特丁基对苯二酚含量的检测方法采用超高效液相色谱方法，以甲醇为豆瓣酱中特丁基对苯二酚的提取溶剂，HLB(hydrophile-lipophilebalance)固相萃取小柱净化；十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱分离，水和甲醇混合溶剂为流动相，荧光检测器的激发检测波长为293±2nm，发射波长332±2nm。


2.如权利要求1所述的豆瓣酱中特丁基对苯二酚含量的检测方法，其特征在于，所述豆瓣酱中特丁基对苯二酚含量的检测方法的色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，用WatersUPLC进行检测；流动相是甲醇-水，流速0.25-0.4ml/min；柱温是20-40℃。


3.如权利要求1所述的豆瓣酱中特丁基对苯二酚含量的检测方法，其特征在于，所述豆瓣酱中特丁基对苯二酚含量的检测方法的标准物质溶液的配制：称量特丁基对苯二酚标准物质约为50.0mg，放入50mL容量瓶中，加入色谱纯...

【专利技术属性】
技术研发人员：于刚，李永丽，胡江涛，薛康，何开蓉，俞凌云，何会珍，
申请(专利权)人：成都海关技术中心，
类型：发明
国别省市：四川;51