一种定量检测脂联素ADPN的胶乳增强免疫比浊试剂盒及其制备与应用方法技术

本发明专利技术提供了一种定量检测脂联素ADPN的胶乳增强免疫比浊试剂盒，包括脂联素R1试剂和脂联素R2试剂；脂联素R1试剂包括缓冲液A、保护剂A、反应增强剂、防腐剂；脂联素R2试剂包括缓冲液B、保护剂B、防腐剂、包被抗人脂联素抗体的致敏聚苯乙烯胶乳颗粒；其中，包被抗人脂联素抗体的致敏聚苯乙烯胶乳颗粒中的抗人脂联素抗体与致敏聚苯乙烯胶乳颗粒之间通过链亲和素‑生物素系统连接。本发明专利技术还提供了一种定量检测脂联素ADPN的胶乳增强免疫比浊试剂盒的制备与应用方法。本发明专利技术的优点在于：方便快速、灵敏度高、特异性，可定量准确的检测ADPN；它仪器兼容性强，检测成本低，弥补了临床上对ADPN比浊产品的需求。

A latex enhanced immunoturbidimetry kit for quantitative detection of adiponectin ADPN and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种定量检测脂联素ADPN的胶乳增强免疫比浊试剂盒及其制备与应用方法
本专利技术涉及生物检测
，尤其涉及一种定量检测脂联素ADPN的胶乳增强免疫比浊试剂盒及其制备与应用方法。
技术介绍
脂联素(Adiponectin/ADPN)是脂肪细胞分泌的一种内源性生物活性多肽或蛋白质。脂联素是一种胰岛素增敏激素(AnInsulin-sensitizingHormone)，能改善小鼠的胰岛素抗性(Insulinresistance)和动脉硬化症；对人体的研究发现，脂联素水平能预示II型糖尿病和冠心病的发展，并在临床试验表现出抗糖尿病、抗动脉粥样和炎症的潜力。研究人员发现了一种调节脂联素的新化合物，从而为研究脂联素功能和胰岛素敏感性机制提出了一种新途径。胰岛素是由胰脏β细胞分泌出来的激素，主要功能是促进血液中的葡萄糖进入肌肉或脂肪组织，提供人体所需的能量。当胰岛素不能发挥作用时，血液中的葡萄糖便无法转化为人体所需的能量，导致血糖升高，糖尿病由此发生。而胰岛素抗阻是指细胞不能有效利用胰岛素甚至对胰岛素的反应不再敏锐，这是造成糖尿病的最主要本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种定量检测脂联素ADPN的胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于，包括脂联素R1试剂和脂联素R2试剂；/n所述脂联素R1试剂包括的成分及相应含量为：缓冲液A20～200mM，保护剂A1～10mg/mL，反应增强剂1～5％，防腐剂0.03～0.2％，溶剂为纯化水；/n所述脂联素R2试剂包括的成分及相应含量为：缓冲液B 20～200mM，保护剂B1～10mg/mL，防腐剂0.03～0.2％，包被抗人脂联素抗体的致敏聚苯乙烯胶乳颗粒0.04～0.16％，溶剂为纯化水；其中，所述包被抗人脂联素抗体的致敏聚苯乙烯胶乳颗粒中的“抗人脂联素抗体”与“致敏聚苯乙烯胶乳颗粒”之间通过链亲和素-生物素系统连接。...

【技术特征摘要】
1.一种定量检测脂联素ADPN的胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于，包括脂联素R1试剂和脂联素R2试剂；
所述脂联素R1试剂包括的成分及相应含量为：缓冲液A20～200mM，保护剂A1～10mg/mL，反应增强剂1～5％，防腐剂0.03～0.2％，溶剂为纯化水；
所述脂联素R2试剂包括的成分及相应含量为：缓冲液B20～200mM，保护剂B1～10mg/mL，防腐剂0.03～0.2％，包被抗人脂联素抗体的致敏聚苯乙烯胶乳颗粒0.04～0.16％，溶剂为纯化水；其中，所述包被抗人脂联素抗体的致敏聚苯乙烯胶乳颗粒中的“抗人脂联素抗体”与“致敏聚苯乙烯胶乳颗粒”之间通过链亲和素-生物素系统连接。


2.根据权利要求1所述的定量检测脂联素ADPN的胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于，所述脂联素R1试剂中，缓冲液A具体为硼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液、磷酸盐缓冲液和甘氨酸缓冲液中的一种或多种，且pH为6～10；保护剂A具体为牛血清白蛋白、卵清蛋白和明胶中的一种或多种；反应增强剂具体为聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚乙二醇8000和聚乙二醇20000中的一种或多种；防腐剂具体为叠氮钠、硫柳汞和Proclin300中的一种或多种。


3.根据权利要求1所述的定量检测脂联素ADPN的胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于，所述脂联素R2试剂中，缓冲液B具体为硼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液、磷酸盐缓冲液和甘氨酸缓冲液中的一种或多种，且pH为7～9；保护剂B具体为牛血清白蛋白和卵清蛋白中的一种或两种；防腐剂具体为叠氮钠、硫柳汞和Proclin300中的一种或多种；包被抗人脂联素抗体的致敏聚苯乙烯胶乳颗粒中的抗人脂联素抗体具体为多克隆抗体和单克隆抗体中的一种。


4.根据权利要求1所述的定量检测脂联素ADPN的胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于，所述脂联素R2试剂中的包被抗人脂联素抗体的致敏聚苯乙烯胶乳颗粒是通过分别制备生物素化抗人脂联素抗体、链亲和素包被的聚苯乙烯胶乳颗粒，并将所述生物素化抗人脂联素抗体与所述链亲和素包被的聚苯乙烯胶乳颗粒混合孵育而制成；在所述生物素化抗人脂联素抗体制备中，所述抗人脂联素抗体与生物素的摩尔比为1：(1～100)。


5.根据权利要求1所述的定量检测脂联素ADPN的胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于，所述包被抗人脂联素抗体的致敏聚苯乙烯胶乳颗粒中的致敏聚苯乙烯胶乳颗粒具体为羧基化的聚苯乙烯胶乳颗粒或氨基化的聚苯乙烯胶乳颗粒；其中，所述羧基化的聚苯乙烯胶乳颗粒经碳化二亚胺活化后再进行链亲和素包被；所述氨基化的聚苯乙烯胶乳颗粒经戊二醛活化后再进行链亲和素包被；所述胶乳颗粒的粒径范围为40～500nm。


6.根据权利要求1～5任一所述的定量检测脂联素ADPN的胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于，还包括脂联素校准品；
所述脂联素校准品包括的成分及相应含量为：缓冲液C20～200mM，保护剂C0.5～...

【专利技术属性】
技术研发人员：芮双印，符修乐，邵家祥，
申请(专利权)人：安徽大千生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽;34