【技术实现步骤摘要】
用于O型口蹄疫病毒抗体定量检测的上转换发光免疫层析试纸条及其制备方法
本专利技术涉及一种基于上转换发光纳米材料制成的上转换发光免疫层析试纸条及其制备方法，还涉及该上转换发光免疫层析试纸条在O型口蹄疫病毒抗体定量检测中的应用。本专利技术属于材料化学及免疫学检测领域。
技术介绍
口蹄疫病毒的抗原主要有完整病毒和其结构蛋白。由于完整病毒存在灭活不彻底的现象，在使用过程中存在感染的风险；而部分的结构蛋白(如VP1)虽然具有免疫原性，但是与完整病毒在结构上有一定的差异，免疫反应的效果难以保证。病毒样颗粒(VLPs)是不含RNA的空衣壳，与完整病毒具有相同的结构，具有很好的型特异性和免疫原性，但没有感染性，因此是一种最佳的抗原。目前已经有多种病毒样颗粒的疫苗，如：乙肝病毒VLPs疫苗，人乳头瘤病毒VLPs疫苗和戊肝病毒VLPs疫苗投入使用。因此，发展口蹄疫病毒样颗粒疫苗及其诊断试剂具有很好的应用前景。胶体金免疫层析技术是通过胶体金标记的蛋白沉积在检测线上，通过肉眼观察沉积线的深浅进行定性或半定量分析。由于肉眼观察的局限性...
【技术保护点】
1.一种上转换发光免疫层析试纸条，其特征在于，所述的上转换发光免疫层析试纸条包括依次相连的样品垫、结合垫、分析膜和吸水垫以及位于下方作为组装平台的PVC底板；/n其中，所述的样品垫用于添加样品；所述的结合垫上包被有偶联了蛋白G的上转换发光纳米材料；所述的分析膜上分别包被有O型口蹄疫病毒病毒样颗粒和兔IgG喷涂的检测线和对照线。/n
【技术特征摘要】
1.一种上转换发光免疫层析试纸条，其特征在于，所述的上转换发光免疫层析试纸条包括依次相连的样品垫、结合垫、分析膜和吸水垫以及位于下方作为组装平台的PVC底板；
其中，所述的样品垫用于添加样品；所述的结合垫上包被有偶联了蛋白G的上转换发光纳米材料；所述的分析膜上分别包被有O型口蹄疫病毒病毒样颗粒和兔IgG喷涂的检测线和对照线。
2.如权利要求1所述的上转换发光免疫层析试纸条，其特征在于，所述的上转换发光纳米材料为柠檬酸修饰的NaYF4:18％Yb,2％Er纳米晶。
3.如权利要求2所述的上转换发光免疫层析试纸条，其特征在于，所述的柠檬酸修饰的上转换发光纳米材料通过以下步骤制备得到：
1)上转换发光纳米材料的合成
a称取YCl3·6H2O0.2366g,YbCl3·6H2O0.0775g以及ErCl3·6H2O0.0076g加至100mL圆底烧瓶中，与6mL油酸(OA)、15mL十八烯(ODE)混合；在氮气保护下加热至160℃形成均一的溶液后冷却至室温；缓慢滴加10mL含0.1gNaOH和0.148gNH4F的甲醇溶液；反应液缓慢加热至50℃保持40min，再加热至100℃保持40min，除去甲醇和水；接着，在氮气保护下，加热至320℃保持1.5h，溶液自然冷却后，加乙醇沉淀，并用乙醇洗三次，将沉淀分散于6mL环己烷中，得到含有纳米晶的环己烷分散液，待用；
b在100mL圆底烧瓶中，加NaCOOCF30.135g和Yb(COOCF3)30.512g，15mL油酸(OA)以及15mL十八烯(ODE)，滴加步骤a获得的含有纳米晶的环己烷分散液，反应液在抽真空下加热至120℃保持40min；接着，在氮气保护下，再加热至320℃保持1.5h，溶液自然冷却后，加乙醇沉淀，并用乙醇洗三次，所的沉淀即为上转换发光纳米材料，将沉淀分散于6mL环己烷中，得到上转换发光纳米材料的环己烷分散液，待用；
2)上转换发光纳米材料的表面修饰
在圆底烧瓶中加0.2gNOBF4，5mLDMF，加入步骤1)合成的20mg上转换发光材料的环己烷分散液，室温搅拌2h；用异丙醇和环己烷沉淀，洗三次，沉淀重新分散于DMF中，滴加1.5mL50mg/mL的柠檬酸溶液，室温搅拌过夜后，离心分离，即得到柠檬酸修饰的上转换发光纳米材料。
4.如权利要求1所述的上...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭慧琛，孙世琪，侯风萍，张韵，白满元，柳海云，高震东，殷宏，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州兽医研究所，
类型：发明
国别省市：甘肃;62
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