特定凝集素组合在构建基于唾液糖蛋白糖链鉴别肝纤维化的测试工具方面的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种特定凝集素组合在构建基于唾液糖蛋白糖链鉴别肝纤维化(HF)的测试工具方面的应用。所述特定凝集素组合选自凝集素RCA120、PHE‑E+L、EEL、AAL和DSA；肝纤维化样本与乙肝肝炎样本相比，其中RCA120、PHE‑E+L和EEL显著下调，AAL、DSA显著上调。另外，本发明专利技术还构建了精确的测试模型：

Application of specific lectin combinations in the construction of a test tool for the identification of liver fibrosis based on sialoglycoprotein sugar chain

【技术实现步骤摘要】
特定凝集素组合在构建基于唾液糖蛋白糖链鉴别肝纤维化的测试工具方面的应用
本专利技术涉及一种特定凝集素组合在构建有关肝纤维化测试工具方面的应用。
技术介绍
我国是慢性肝炎特别是乙型肝炎的高流行区，约有1.2亿人长期携带乙肝(HepatitisB，HB)病毒，慢性肝炎患者大约有3000万。约有30万慢性肝炎患者发展为肝硬化和肝癌患者。研究发现，80％-90％的肝癌患者经历“慢性肝炎－肝硬化－肝癌”的过程。肝纤维化(HepaticFibrosis，HF)是指慢性肝脏疾病发展的过程，肝细胞被反复破坏后再生，胶原、糖蛋白、蛋白多糖等细胞外基质在肝脏中弥漫性过度沉积与异常分布，是肝脏对慢性损伤的病理性修复反应，是各种慢性肝病向肝硬化发展的关键步骤和影响慢性肝病预后的重要环节。肝纤维化的进一步发展，可引起肝脏的结构紊乱，肝细胞结节样再生，形成假小叶结构，即肝硬化。肝纤维化在组织学上是可逆的如果在此期间给与积极治疗，仍可逆转。否则，肝纤维化进展至肝硬化阶段，逆转会非常困难，预后相对较差。寻求非损伤性检查，进行肝纤维化的诊断，有助于提前介入，减缓乃至逆转肝硬化的发展进程，这是预防肝癌的关键。唾液是人体的体液之一，由三个主要的腺体分泌。唾液中蛋白质的来源于唾液腺分泌以及血液通过被动扩散以及主动运输至唾液中。唾液是一种十分理想的检测材料，具有取材方便，对患者无侵入性，可多次取样等优点。近些年的研究表明，唾液蛋白能够反映生理机能，并在一些疾病(诸如干燥综合症，囊胞性纤维症以及肿瘤等)的无损检测方面具有广阔的应用前景。虽然唾液中的蛋白质与血清中的蛋白质种类有一定的重合，但是在血液循环中的生物标志物并非都适用于唾液的检测。并且同一蛋白在血清和唾液之间的丰度上也存在着明显的差异。因此，在实际应用上针对这两种生物检测材料在检测方法和检测靶标等方面不尽相同。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种无损伤取样的快速、准确鉴别肝纤维化(HF)的方案。本申请通过大量的实验和分析，最终确立了针对唾液样本的特定凝集素组合能够用来确定受试者是否为肝纤维化患者；并且，构建了肝纤维化的诊断模型，通过ROC曲线分析评估其诊断能力。总结应用方案如下：第一方面，特定凝集素组合构建基于唾液糖蛋白糖链鉴别肝纤维化(HF)的测试工具的应用，所述特定凝集素组合选自RCA120、PHE-E+L、EEL、AAL和DSA(可以是这五种凝集素之任一或任意组合)；肝纤维化样本与乙肝肝炎样本相比，其中RCA120、PHE-E+L和EEL显著下调，AAL、DSA显著上调。上述测试工具为凝集素芯片、试剂盒或凝集素检测智能终端。第二方面，一种用于基于唾液糖蛋白糖链鉴别肝纤维化(HF)的智能终端，包括处理器和程序存储器，所述程序存储器存储的程序被处理器加载时执行以下步骤：获取唾液样本的凝集素测试结果，所述凝集素测试结果体现凝集素RCA120、DSA和PHE-E+L对应的糖蛋白糖链的表达水平；根据所述凝集素测试结果，计算以下模型HF(ModelHF)的检测值；将计算得到的检测值输出显示，并提示鉴别结论；若检测值≥0.1701，则表明唾液样本所属主体为肝纤维化患者(HF)，反之检测值＜0.1701，则为乙肝肝炎患者(HB)。这里所说的“提示鉴别结论”，可以是直接输出是否属于肝纤维化患者(HF)的结论，也可以仅给出检测值、参考值和鉴别依据，或者二者兼有。上述智能终端的具体形式可以是专门的自助终端设备，也可以是普通用户常用的手机、平板电脑等。第三方面，一种计算机可读存储介质，存储有计算机程序，所述计算机程序被处理器加载时执行以上列出的各个步骤。第四方面，一种人机交互设备，包括显示屏，所述人机交互设备运行时显示屏依次显示以下界面：唾液样本的凝集素测试结果的输入界面；所述凝集素测试结果体现凝集素RCA120、DSA和PHE-E+L对应的糖蛋白糖链的表达水平；肝纤维化患者(HF)鉴别信息的输出界面；所述肝纤维化患者(HF)鉴别信息包括模型HF(ModelHF)的参考值0.1701以及检测值和/或鉴别结论；所述模型HF(ModelHF)为：若检测值≥0.1701，则表明唾液样本所属主体为肝纤维化患者(HF)，反之检测值＜0.1701，则为乙肝肝炎患者(HB)。该人机交互设备的具体形式可以是专门的自助终端设备，也可以是普通用户常用的手机、平板电脑等。其输入界面还可以包含预先的提示、确认信息(例如请用户确认身份信息、检测目的等)。所述唾液样本的凝集素测试结果的输入界面，可以是直接呈现这几种凝集素的输入项，也可以依次呈现涉及的每一种凝集素的输入项；具体人机交互方式还可以有多种改型，根据实际需要不难设置。对于该人机交互设备，显示屏的画面显示内容，可以由人机交互设备内部的处理器、存储器运行既定程序进行数据处理得到，也可以连接远程服务器(在服务器运行既定程序进行数据处理)通过数据传送得到。第五方面，一种基于唾液糖蛋白糖链鉴别肝纤维化(HF)的系统，包括：A、用于获取唾液样本特定糖蛋白糖链结构的表达水平的设备，所述特定糖蛋白糖链结构分别由凝集素RCA120、DSA和PHE-E+L特异性识别；B、上述的一种用于基于唾液糖蛋白糖链鉴别肝纤维化(HF)的智能终端。该系统中，用于获取唾液样本特定糖蛋白糖链结构的表达水平的设备和用于基于唾液糖蛋白糖链鉴别肝纤维化(HF)的智能终端可以是集成一体的医疗诊断综合设备，也可以是分立的设备，甚至没有任何信号连接(例如可以由医护人员、患者等自行取送唾液样本的凝集素测试结果)。上述用于获取唾液样本特定糖蛋白糖链结构的表达水平的设备包括凝集素芯片、孵育盒和生物芯片扫描系统，其中凝集素芯片上设置有所述的特定凝集素组合。采用本专利技术的方案，能够根据唾液样本，快速、准确地鉴别受试者是否为肝纤维化患者(或仍然处于单纯的慢性肝炎阶段)。附图说明图1为PCA分析表明的肝纤维化(HF)的示意图。PCA分析显示了乙型肝炎(HB)和肝硬化(HC)存在一部分的重叠区，而处在重叠区部分的乙型肝炎患者已经出现肺部肝纤维化特征，为肝纤维化患者(HB)。图2为小型凝集素芯片阵列图。图3为两组样本间差异凝集素箱型图；图中星号的数量表征P-Value的数量级，通常规定为：*P<0.05；**P<0.01；***P<0.001；****P<0.0001。图4为ROC曲线图及统计信息。具体实施方式前期基于凝集素芯片数据的PCA分析发现乙型肝炎患者唾液糖蛋白糖型与肝硬化患者虽然存在一定的差异，但仍有一部分重叠区，而处在重叠区部分的乙型肝炎患者已经出现肺部肝纤维化特征(图1)。基于此，我们设计并完成了如下实验。以下详细介绍本申请的相关验证实验及分析，专利技术人具体的研发过程不限于此。一、研究方法：1.1、唾液样本的收集及预处理本实验所本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.特定凝集素组合构建基于唾液糖蛋白糖链鉴别肝纤维化(HF)的测试工具的应用，其特征在于：所述特定凝集素组合选自RCA120、PHE-E+L、EEL、AAL和DSA；肝纤维化样本与乙肝肝炎样本相比，其中RCA120、PHE-E+L和EEL显著下调，AAL、DSA显著上调。/n

【技术特征摘要】
1.特定凝集素组合构建基于唾液糖蛋白糖链鉴别肝纤维化(HF)的测试工具的应用，其特征在于：所述特定凝集素组合选自RCA120、PHE-E+L、EEL、AAL和DSA；肝纤维化样本与乙肝肝炎样本相比，其中RCA120、PHE-E+L和EEL显著下调，AAL、DSA显著上调。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述测试工具为凝集素芯片、试剂盒或凝集素检测智能终端。


3.一种用于基于唾液糖蛋白糖链鉴别肝纤维化(HF)的智能终端，包括处理器和程序存储器，其特征在于：所述程序存储器存储的程序被处理器加载时执行以下步骤：
获取唾液样本的凝集素测试结果，所述凝集素测试结果体现凝集素RCA120、DSA和PHE-E+L对应的糖蛋白糖链的表达水平；
根据所述凝集素测试结果，计算以下模型HF(ModelHF)的检测值；



将计算得到的检测值输出显示，并提示鉴别结论；若检测值≥0.1701，则表明唾液样本所属主体为肝纤维化患者(HF)，反之检测值＜0.1701，则为乙肝肝炎患者(HB)。


4.一种计算机可读存储介质，存储有计算机程序，其特征在于：所述计算机程序被处理器加载时执行权利要求3中列出的各个步骤。


5....

【专利技术属性】
技术研发人员：李铮，舒健，
申请(专利权)人：深圳格道糖生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44