抗N-乙酰氨基葡萄糖转移酶修饰的蛋白质单克隆抗体及杂交瘤细胞株和其制备方法与应用技术

技术编号:24397138 阅读:27 留言:0更新日期:2020-06-06 04:03
本发明专利技术公开了抗N‑乙酰氨基葡萄糖转移酶修饰的蛋白质单克隆抗体及杂交瘤细胞株和其制备方法与应用,所述杂交瘤细胞株能够分泌抗N‑乙酰氨基葡萄糖转移酶修饰的蛋白质单克隆抗体,其保藏编号为CCTCC NO:C2019117。其具有有效的抑制多种肿瘤细胞生长的活性,且直接杀死或杀伤肿瘤细胞,能够应用于肿瘤的诊断和治疗。

Monoclonal antibodies against N-acetylglucosamine transferase modified proteins and hybridoma cell lines and their preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
抗N-乙酰氨基葡萄糖转移酶修饰的蛋白质单克隆抗体及杂交瘤细胞株和其制备方法与应用
本专利技术属于生物医药工程
,具体涉及抗N-乙酰氨基葡萄糖转移酶修饰的蛋白质单克隆抗体及杂交瘤细胞株和其制备方法与应用。
技术介绍
糖蛋白的寡糖链参与了分子识别以及细胞与细胞间、细胞与间质间的识别、黏附和受体作用等多种生物功能。细胞癌变时癌细胞膜上糖蛋白的寡糖链发生改变,即糖基异常化(aberrantglycosylation),各种异常的糖蛋白糖基可影响细胞的正常功能,如细胞的识别和黏附功能障碍,是导致细胞恶性转化的分子基础。N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(O-GlcNAc,OGT)是一组参与天冬酰胺连接型(N-)聚糖合成加工的酶类,能将共同供体底物UDP-N-乙酰氨基葡萄糖(UDP-GlcNAc)中的GlcNAc(Gn)糖基转移至N-聚糖五糖核心的两个甘露糖上。O-GlcNAc糖基化是一种广泛存在于蛋自质丝苏氨酸残基上的动态、可逆的蛋白质翻译后修饰,广泛分布在细胞浆和细胞核中,参与调节多种细胞途径。在体内,O-GlcNAc动态修饰由N-乙酞氨基本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种杂交瘤细胞株,其特征在于:所述杂交瘤细胞株能够分泌抗N-乙酰氨基葡萄糖转移酶修饰的蛋白质单克隆抗体,其保藏编号为CCTCC NO:C2019117。/n

【技术特征摘要】
1.一种杂交瘤细胞株,其特征在于:所述杂交瘤细胞株能够分泌抗N-乙酰氨基葡萄糖转移酶修饰的蛋白质单克隆抗体,其保藏编号为CCTCCNO:C2019117。


2.如权利要求1所述的杂交瘤细胞株,其特征在于:所述杂交瘤细胞株是通过SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3所述的三段序列通过蛋白重组表达出的三段N-乙酰氨基葡萄糖转移酶蛋白免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合获得。


3.一种抗N-乙酰氨基葡萄糖转移酶修饰的蛋白质单克隆抗体,其特征在于:所述单克隆抗体由权利要求1所述的杂交瘤细胞株分泌所得。


4.如权利要求3所述的抗N-乙酰氨基葡萄糖转移酶修饰的蛋白质单克隆抗体,其特征在于:所述抗N-乙酰氨基葡萄糖转移酶修饰的蛋白质单克隆抗体能够识别并杀死肿瘤细胞,具有抑制肿瘤细胞的作用。


5.制备权利要求3所述的抗N-乙酰氨基葡萄糖转移酶修饰的蛋白质单克隆抗体的方法,其特征在于:包括,
三段重组蛋白片段的重组表达:分别对SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3所述的三段序列进行基因片段扩增,然后对目的基因片段和蛋白表达载体pET28a进行酶切连接,连接产物转入大肠杆菌DH5α,挑取单克隆进行测序,将测序正确的阳性克隆提取质粒转入大肠杆菌BL21中,IPTG诱导蛋白表达并纯化,重组表达出三段N-乙酰氨基葡萄糖转移...

【专利技术属性】
技术研发人员:徐恒
申请(专利权)人:南京泰斯德生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:江苏;32

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1