一种间充质干细胞的基因修饰方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种间充质干细胞的基因修饰方法及应用，制备得到的重组高密度脂蛋白载基因纳米粒表面修饰有载脂蛋白apoA Ⅰ，能与小鼠骨髓间充质干细胞表面表达的清道夫受体结合，依靠非溶酶体途径将治疗基因高效递送入细胞中，显著提高细胞的基因修饰效率，且对细胞无明显毒性。该间充质干细胞凭借自身天然的肿瘤归巢能力靶向于肿瘤细胞，在肿瘤的微环境中持续分泌抑癌因子，起到诱导肿瘤细胞凋亡的效果。

【技术实现步骤摘要】
一种间充质干细胞的基因修饰方法及应用
本专利技术涉及一种细胞的基因修饰方法及应用，尤其涉及间充质干细胞的基因修饰方法及应用。
技术介绍
在肿瘤的靶向治疗中，依赖于EPR效应的被动靶向制剂如无靶头修饰的脂质体、胶束、微粒、磁性纳米粒等存在正常组织细胞毒性、靶向型低、难以到达肿瘤深部、易被网状内皮系统清除等缺点，极大的限制了抗肿瘤药物发挥疗效。而细胞载体因其良好运载能力和血液中长循环等特性引起了研究者的极大关注。间充质干细胞(mesenchymalstemcells，MSCs)容易从机体中分离获得，可在体外培养扩增，能高效、安全地将抗肿瘤药物或治疗基因递送至释放炎症因子的肿瘤部位及其微转移灶。间充质干细胞作为肿瘤主动靶向型细胞载体，具有以下独特性质：1)肿瘤精确靶向性：间充质干细胞的炎症趋向性造就了其天然的肿瘤归巢能力，在体内外能够准确迁移至肿瘤部位，该机制牵涉到多种机制和细胞因子，因而与肿瘤被动靶向制剂相比，间充质干细胞具有更为优异的肿瘤靶向效率。2)低免疫原性：由于间充质干细胞的免疫豁免性，异体间充质干细胞在体内可以逃避机体免疫系统的清除，这一本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种间充质干细胞的基因修饰方法，其特征在于：采用重组高密度脂蛋白载基因纳米粒转染间充质干细胞，得到所述治疗基因修饰的间充质干细胞。/n

【技术特征摘要】
1.一种间充质干细胞的基因修饰方法，其特征在于：采用重组高密度脂蛋白载基因纳米粒转染间充质干细胞，得到所述治疗基因修饰的间充质干细胞。


2.根据权利要求1所述的间充质干细胞的基因修饰方法，其特征在于：所述重组高密度脂蛋白载基因纳米粒以重组高密度脂蛋白为转染工具。


3.根据权利要求1所述的间充质干细胞的基因修饰方法，其特征在于：所述重组高密度脂蛋白载基因纳米粒为外壳包裹内核的结构，由磷脂、胆固醇、胆固醇酯和载脂蛋白组成所述外壳，由聚乙烯亚胺-月桂酸聚合物偶联物/治疗基因复合物组成所述内核。


4.根据权利要求3所述的间充质干细胞的基因修饰方法，其特征在于：所述载脂蛋白为与间充质干细胞表面清道夫受体结合的鼠源载脂蛋白apoAⅠ或人源载脂蛋白apoAⅠ。


5.根据权利要求1所述的间充质干细胞的基因修饰方法，其特征在于：所述一种重组高密度脂蛋白载基因纳米粒的制备方法，包括如下步骤：
(1)将月桂酸与聚乙烯亚胺单体的按照摩尔比为1:(20～60)通过酰胺反应合成聚乙烯亚胺-月桂酸聚合物偶联物；
(2)将步骤(1)所述的聚乙烯亚胺-月桂酸聚合物偶联物与pDNA通过静电络合制备得到聚乙烯亚胺-月桂酸聚合物偶联物/pDNA复合物，其中静电络合的氮原子与磷原子的摩尔数比为(1～15):1；
(3)将磷脂、胆固醇、胆固醇酯溶于二氯甲烷/乙醇混合...

【专利技术属性】
技术研发人员：王伟，陈柯戎，谢梦颖，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32