齐墩果烷型三萜皂苷类化合物及其提取方法和用途技术

本发明专利技术属于医药技术领域，公开了一种从牛舌草中提取分离齐墩果烷型三萜皂苷类化合物或其盐及其提取方法和用途，该种化合物具有(I)的结构；其中，R

【技术实现步骤摘要】
齐墩果烷型三萜皂苷类化合物及其提取方法和用途
本专利技术涉及中药提取领域，涉及齐墩果烷型三萜皂苷类化合物及其提取方法和用途。
技术介绍
紫草科牛舌草属(Anchusa.L)植物为我国传统药用植物，牛舌草为本属植物意大利牛舌草AnchusaitalicRetiz.的干燥地上部分。牛舌草主要分布于地中海和热带地区，在我国新疆维吾尔地区分布较为广泛，收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》维药分册，维文名又称高孜万。具有生湿补脑、调节异常黑胆质、祛寒补心、爽心悦志、润燥消炎、止咳平喘等功能(付瑾,刘霞.维药牛舌草的研究与应用[J].安徽农业科学,2015,43(11):111-115.)，国内外学者通过体内、体外实验证实了牛舌草的抗肿瘤作用(UpurH,YusupA,BaudrimontI,etal.Inhibitionofcellgrowthandcellularprotein,DNAandRNAsynthesisinhumanhepatoma(HepG2)cellsbyethanolextractofabnormalSavdaMunziqoftraditionaluighurmedicine[J].Evidence-BasedComplementaryandAlternativeMedicine,2011,9:348-352.)，抗氧化作用(ConfortiF,MarrelliM,CarmelaC,etal.Bioactivephytonutrients(omegafattyacids,tocopherols,polyphenols),invitroinhibitionofnitricoxideproductionandfreeradicalscavengingactivityofnon-cultivatedmediterraneanvegetables[J].FoodChemistry,2011,129:1413-1419.)，抗炎作用(Kuruuzum-UzA,SuleymanH,CadirciE,etal.Investigationonanti-inflammatoryandantiulceractivitiesofAnchusaazureaextractsandtheirmajorconstituentrosmarinicacid[J].Z.Naturforsch.2012,67(7-8):360-366.)，抗菌作用(Boskovic1I,D,MaskovicP,etal.Phytochemicalcompositionandantimicrobial,antioxidantandcytotoxicactivitiesofAnchusaofficinalisL.extracts[J].Biologia,2018,73(11):1035-1041.)以及胃蛋白酶抑制作用(GhalebmA.PeprininhibitorfromrootsofAnchusaStrigosa[J].Phytochemistry.1998,48(2):217-221.)等作用。文献报道从牛舌草属植物中分离得到的三萜类化合物主要包括齐墩果烷型及乌苏烷型三萜(OmerK,CosimoP.TriterpeneandflavoneglycosidesfromAnchusaundulatasubsp.hybrid[J].NaturalProductResearch,2009,23(3):284-292.)。为了将牛舌草的药用价值发挥到最大，我们对牛舌草地上部分进行了系统的成分研究，发现了新的齐墩果烷型三萜皂苷，利用核磁、红外、质谱等手段对化合物的结构进行了确证，并检测其对心肌细胞缺氧/复氧再灌注损伤的保护作用。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供齐墩果烷型三萜皂苷类化合物。本专利技术的第二个目的是提供齐墩果烷型三萜皂苷类化合物的提取方法。本专利技术的第三个目的是提供齐墩果烷型三萜皂苷类化合物的用途。本专利技术的第四个目的是提供包含所述的齐墩果烷型三萜皂苷类化合物的牛舌草地上部分提取物。本专利技术的第五个目的是提供牛舌草地上部分提取物的用途。本专利技术的第六个目的是提供含齐墩果烷型三萜皂苷类化合物的药物组合物。本专利技术的第七个目的是提供上述药物组合物的用途。本专利技术的技术方案如下：齐墩果烷型三萜皂苷类化合物或其盐，具有式(I)的结构：其中：R1为H,O-β-D-Glc或OH；R2为OH,O-β-D-Glc,O-β-D-Glc-(1-2)-β-D-Glc或＝O；R3为H,OH或O-β-D-Glc-(1-2)-β-D-Glc；R4为H或β-D-Glc；R5为O-β-D-Glc,O-β-D-Glc-(1-2)-β-D-Glc或＝O；进一步地，本专利技术提供如下结构的齐墩果烷型三萜皂苷类化合物或其盐：本专利技术还提供了所述的齐墩果烷型三萜皂苷类化合物的提取方法，包括如下步骤：(1)以牛舌草地上部分为原料，加入原料8-12质量倍的体积分数为60％-80％乙醇水溶液，回流提取2-4次，每次提取2-4小时，合并得到提取液，减压回收溶剂，浓缩后得到总粗提物；(2)将粗提物分散到5-10质量倍的水中，用AB-8大孔吸附树脂进行吸附，分别用纯水、30％、50％、70％、95％乙醇水洗脱，将各馏分洗脱液减压浓缩分别得到水层、30％乙醇层、50％乙醇层、70％乙醇层和95％乙醇层；(3)50％乙醇层和70％乙醇层部分经硅胶柱色谱分离，分别以体积比为100:1-1:1的二氯甲烷-甲醇为洗脱剂梯度洗脱，50％乙醇层得到馏分D1、D2、D3、D4、D5和D6，70％乙醇层中得到馏分D1、D2、D3、D4、D5、D6、D7、D8和D9。(4)50％乙醇层馏分D6和70％乙醇层馏分D6分别经硅胶柱色谱分离，并以体积比为100:1-2:1的二氯甲烷-甲醇为洗脱剂梯度洗脱，得到50％乙醇层馏分D66、D69、D6-10和70％乙醇层馏分D65；(5)50％乙醇层馏分D66经SephadexLH-20凝胶柱色谱分离，以甲醇等度洗脱，得到馏分D6631、D6632和D663；(6)馏分D663经ODS柱色谱分离，以体积比为2:8-1:0的甲醇-水为洗脱剂梯度洗脱，得到馏分D6631、D6632、D6633、D6634、D6635和D6636；(7)馏分D6635经制备HPLC色谱，以体积比为50％-60％的甲醇-水为流动相，进行纯化，得到化合物6；(8)50％乙醇层馏分D69经ODS柱色谱分离，以体积比为2:8-1:0的甲醇-水为洗脱剂梯度洗脱，得到馏分D691、D692、D693和D694；(9)馏分D694经制备HPLC色谱，以体积比为50％-60％的甲醇-水为流动相，进行纯化，得到化合物3、4和化合物5；(10)50％乙醇层馏分D6-10经ODS柱色谱分离，以体积比为1:9～1:0的甲醇-水为洗脱本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.齐墩果烷型三萜皂苷类化合物或其盐，其特征是具有式(I)的结构：/n

【技术特征摘要】
1.齐墩果烷型三萜皂苷类化合物或其盐，其特征是具有式(I)的结构：



其中：
R1为H,O-β-D-Glc或OH；
R2为OH,O-β-D-Glc,O-β-D-Glc-(1-2)-β-D-Glc或＝O；
R3为H,OH或O-β-D-Glc-(1-2)-β-D-Glc；
R4为H,或β-D-Glc；
R5为O-β-D-Glc,O-β-D-Glc-(1-2)-β-D-Glc或＝O。


2.权利要求1所述的化合物或其盐，选自：








3.权利要求1或2所述的齐墩果烷型三萜皂苷类化合物或其盐的提取方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)以牛舌草地上部分为原料，加入乙醇水溶液，回流提取，合并得到提取液，减压回收溶剂，浓缩后得到总粗提物；
(2)将总粗提物分散到5-10质量倍的水中，用AB-8大孔吸附树脂进行吸附；
(3)50％乙醇层和70％乙醇层部分经硅胶柱色谱分离，分别以体积比为100:1-1:1的二氯甲烷-甲醇为洗脱剂梯度洗脱，50％乙醇层得到馏分D1、D2、D3、D4、D5和D6，70％乙醇层中得到馏分D1、D2、D3、D4、D5、D6、D7、D8和D9；
(4)50％乙醇层馏分D6和70％乙醇层馏分D6分别经硅胶柱色谱分离，并以体积比为100:1-2:1的二氯甲烷-甲醇为洗脱剂梯度洗脱，得到50％乙醇层馏分D66、D69、D6-10和70％乙醇层馏分D65；
(5)50％乙醇层馏分D66经SephadexLH-20凝胶柱色谱分离，以甲醇等度洗脱，得到馏分D6631、D6632和D663；
(6)馏分D663经ODS柱色谱分离，以体积比为2:8-1:0的甲醇-水为洗脱剂梯度洗脱，得到馏分D6631、D6632、D6633、D6634、D6635和D6636；
(7)馏分D6635经制备HPLC色谱，以甲醇-水为流动相，进行纯化，得到化合物6；
(8)50％乙醇层馏分D69经ODS柱色谱分离，以体积比为2:8-1:0的甲醇-水为洗脱剂梯度洗脱，得到馏分D691、D692、D693和D694；
(9)馏分D694经制备HPLC色谱，以...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈丽霞，李华，孙德娟，鲍风艳，项珂，
申请(专利权)人：沈阳药科大学，
类型：发明
国别省市：辽宁;21