本发明专利技术涉及植物基因工程领域，具体提供的一种保卫细胞特异性启动子，含有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，所述启动子具有极强的活性，且具有高特异性，仅在植物的保卫细胞中特异性表达，如幼苗植株的子叶和新叶中保卫细胞，成熟植物的轮座叶的保卫细胞、茎上叶片的保卫细胞、茎的保卫细胞上特异性表达，将有利于研究保卫细胞的结构和功能，进一步有利于分析植物气孔，为培育耐、抗逆性如干旱、低温、病害的作物中具有重要的意义，具有重大的应用价值和市场前景。
A guard cell specific promoter and its application
【技术实现步骤摘要】
一种保卫细胞特异性启动子及用途
本专利技术涉及植物基因工程领域，具体涉及一种保卫细胞特异性启动子及用途。
技术介绍
启动子(promoter)是一段位于结构基因5'端上游，能够被RNA聚合酶识别并结合，起始转录的DNA序列。启动子决定了基因表达的时间及空间特异性。按照功能和作用方式的不同，可以将启动子分为三类：组成型、诱导型和组织特异性启动子。组成型启动子驱动的目的基因能够在转基因植株的所有生育期和组织中稳定表达。诱导型启动子是指在某些特定的物理、化学或生物信号的刺激下，该类型启动子可以大幅度提高下游基因的转录水平。组织特异性启动子只能驱动目的基因在某些特定的器官或组织部位表达。根据不同的目的和需求选择合适功能的启动子。保卫细胞结构为新月形，由1对保卫细胞包围形成了高等植物的气孔。保卫细胞能够灵敏而准确地响应一系列外源和内源的刺激，如光、干旱以及植物激素等，并通过复杂的信号转导网络改变其膨压使气孔处于最适宜的开闭状态，进而调节植物与环境间的水分和气体交换。保卫细胞是单细胞水平上研究高等植物细胞信号转导途径及其网络的模式体系和良好实验系统，因此，对于保卫细胞的标记就变得至关重要，进而提供一种在保卫细胞中特异性表达的启动子，将有利于研究其结构及功能，同时也为其他相关研究奠定基础。
技术实现思路
因此，本专利技术要解决的技术问题在于提供一种保卫细胞特异性启动子及用途。为此，本专利技术提供了如下的技术方案：一种保卫细胞特异性启动子，含有如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列。一种表达盒，包含所述的启动子。在所述的表达盒中，还包括编码序列，所述启动子可操纵连接的所述编码序列。一种载体，包含所述的启动子或所述的表达盒。一种细胞，包含所述的启动子、所述的表达盒或所述的载体。在所述的细胞中，所述细胞为保卫细胞或农杆菌。一种生物材料，包含所述的启动子、所述的表达盒、所述的载体或所述的细胞。在所述的生物材料中，所述生物材料包括植物组织或器官；优选的，所述植物组织或器官包括叶片或茎；优选的，所述叶片包括子叶、轮座叶或新叶。所述的启动子包括下述S1-S6中任一项所述的用途：S1、在植物中启动目的基因表达中的用途；S2、在植物的组织或器官中启动目的基因表达中的用途；S3、在植物的保卫细胞中启动目的基因表达中的用途；S4、在培育转基因植物中的用途；S5、在研究保卫细胞结构和功能的用途；或S6、在筛选保卫细胞中特异性基因的用途。在所述的用途中，所述植物为拟南芥。本专利技术技术方案，具有如下优点：1.本专利技术提供的一种保卫细胞特异性启动子，所述启动子具有极强的活性，且具有高特异性，仅在植物的保卫细胞中特异性表达，如幼苗植株的子叶和新叶中保卫细胞，成熟植物的轮座叶的保卫细胞、茎上叶片的保卫细胞、茎的保卫细胞上特异性表达。2.本专利技术提供的保卫细胞特异性启动子将有利于研究保卫细胞的结构和功能，进一步有利于分析植物气孔，为培育耐、抗逆性如干旱、低温、病害的作物中具有重要的意义，具有重大的应用价值和市场前景。附图说明为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1是本专利技术实施例2中的pORER1质粒图谱；图2是本专利技术实验例1中幼苗GUS染色结果；图3是本专利技术实验例1中成熟植物GUS染色结果。具体实施方式提供下述实施例是为了更好地进一步理解本专利技术，并不局限于所述最佳实施方式，不对本专利技术的内容和保护范围构成限制，任何人在本专利技术的启示下或是将本专利技术与其他现有技术的特征进行组合而得出的任何与本专利技术相同或相近似的产品，均落在本专利技术的保护范围之内。实施例中未注明具体实验步骤或条件者，按照本领域内的文献所描述的常规实验步骤的操作或条件即可进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规试剂产品。下述实施例中所用的野生型拟南芥Col-0购买自美国拟南芥信息资源网https://www.arabidopsis.org/，后经内蒙古大学祁智实验室自行繁种；大肠杆菌感受态DH5α：菌种购自北京全式金生物技术有限公司，后经内蒙古大学祁智实验室自行制备；农杆菌感受态GV3101：菌种购自生物风http://www.biofeng.com，后经内蒙古大学祁智实验室自行制备；表达载体pORER1质粒由DwayneD.Hegedus实验室构建并馈赠，后经内蒙古大学祁智实验室自行保存，其质粒图谱如图1所示；(原始文献：CatherineCoutu,JamesBrandle,DanBrown,KirkBrown,BrianMiki,JohnSimmonds,DwayneD.Hegedus,pORE:amodularbinaryvectorseriessuitedforbothmonocotanddicotplanttransformation(2007),TransgenicRes,16:771–781,DOI10.1007/s11248-007-9066-2)。所用的分子克隆相关试剂pEASY-BluntSimpleCloningKit、质粒提取试剂盒、胶回收试剂盒、T4DNA连接酶均购于北京全式金生物技术有限公司；试剂甘油、MES、蔗糖、卡那霉素、利福平、LB培养基成分、MQA培养基成分均购买于sigmaaldrich公司。表1MQACK培养基配方液体LB培养基配方：胰蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，NaCl10g/L，调节pH7.0，(固体培养基补加至终浓度为15g/L的琼脂)，121℃灭菌20min。GUS染色液包括如下组分：0.1mol/L磷酸缓冲液(含0.2mol/LKH2PO4，和0.2mol/LK2HPO4，PH7.0)；100mMX-Gluc(10mgX-Gluc固体溶于0.2mlN,N-二甲基甲酰胺)；5mmol/L铁氰化钾(0.1647g铁氰化钾溶于100ml水中)；和5mmol/L亚铁氰化钾(0.2112g亚铁氰化钾溶于100ml水中)。配制GUS染色液的方法：首先吸取10μL100mMX-Gluc，再将790μL0.1mol/L磷酸缓冲液、100μL5mmol/L铁氰化钾、100μL5mmol/L亚铁氰化钾、1μLTriton-X100依次加入，混匀备用。实施例1保卫细胞特异性启动子的获得1、野生型拟南芥DNA基因组提取(1)将培养皿中生长12d的拟南芥幼苗(野生型拟南芥Col-0)放入2ml离心管中并加入一颗瓷珠；(2)液氮速冻，于高本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种保卫细胞特异性启动子，其特征在于，含有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。/n
【技术特征摘要】
1.一种保卫细胞特异性启动子，其特征在于，含有如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列。
2.一种表达盒，其特征在于，包含权利要求1所述的启动子。
3.根据权利要求2所述的表达盒，其特征在于，还包括编码序列，所述启动子可操纵连接的所述编码序列。
4.一种载体，其特征在于，包含权利要求1所述的启动子或权利要求2或3所述的表达盒。
5.一种细胞，其特征在于，包含权利要求1所述的启动子、权利要求2或3所述的表达盒或权利要求4所述的载体。
6.根据权利要求4所述的细胞，其特征在于，所述细胞为保卫细胞或农杆菌。
7.一种生物材料，其特征在于，包含权利要求1所述的启动子、权利要求2或3所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵泉胜，祁智，铁英，
申请(专利权)人：蒙树生态建设集团有限公司，
类型：发明
国别省市：内蒙;15
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