使用微生物的聚(3-羟基丙酸酯-B-乳酸酯)嵌段共聚物制造技术

本发明专利技术涉及一种新型3‑羟基丙酸酯‑乳酸酯嵌段共聚物[P(3HP‑b‑LA)]，以及它的制备方法，更具体地，提供了一种3‑羟基丙酸酯‑乳酸酯嵌段共聚物的制备方法，以及由此制备的3‑羟基丙酸酯‑乳酸酯嵌段共聚物，所述制备方法包括：第一培养步骤，在该第一培养步骤中，利用经改良以便不能生物合成乳酸的重组大肠杆菌，通过以甘油作为碳源并且通过3‑羟基丙酸酯生成基因和增强PHA合酶，在培养的早期阶段生物合成P(3HP)；第二培养步骤，在该第二培养步骤中，通过利用当甘油和葡萄糖被一起供应作为碳源时用于选择性地仅将葡萄糖引入到大肠杆菌中的碳分解代谢抑制系统，来抑制P(3HP)生成，并且，在该第二培养步骤中，通过IPTG诱导系统实现乳酸酯合酶和乳酰辅酶A转化酶的表达，来将聚乳酸酯生物合成到中断的P(3HP)末端。

Poly (3-hydroxypropionate-b-lactate) block copolymers using microorganisms

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用微生物的聚(3-羟基丙酸酯-B-乳酸酯)嵌段共聚物
相关申请的交叉引用本申请要求于2018年03月15日在韩国知识产权局提交的韩国专利申请No.10-2018-0030522的优先权或权益，该专利申请的全部公开内容通过引用并入本说明书中。本专利技术涉及一种聚(3-羟基丙酸酯-b-乳酸酯)嵌段共聚物的制备方法，更具体地，涉及一种使用重组微生物制备聚(3-羟基丙酸酯-b-乳酸酯)嵌段共聚物的方法。
技术介绍
聚乳酸酯(PLA)是一种代表性的以乳酸酯作为单体的可生物降解的聚合物，是一种对通用聚合物或医学聚合物具有高适用性的聚合物。目前，由微生物发酵产生的乳酸酯的聚合来生产PLA，但是乳酸酯的直接聚合仅产生具有低分子量(1000道尔顿至5000道尔顿)的PLA。为了合成具有至少100,000道尔顿的PLA，有一种使用链偶联剂由乳酸酯的直接聚合得到的具有低分子量的PLA来聚合得到具有较高分子量的PLA的方法。然而，由于该方法使用链偶联剂，因此，制备具有高分子量的PLA的方法会由于加入有机溶剂或链偶联剂而变得复杂，并且会难以除去该有机溶本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种3-羟基丙酸酯-乳酸酯嵌段共聚物[P(3HP-b-LA)]的制备方法，该制备方法包括以下步骤：/n(a)通过用包含3-羟基丙酰辅酶A生物合成基因和聚羟基脂肪酸酯(PHA)合成酶基因的载体与包含乳酸酯生物合成基因和将乳酸酯转化为乳酰辅酶A(lactyl-CoA)的酶的基因的载体转化经改良以便不能生物合成乳酸的重组微生物来制备重组微生物的步骤；/n(b)通过使用甘油作为碳源培养在步骤(a)中制备的重组微生物来合成P(3HP)的步骤；和/n(c)通过加入IPTG和葡萄糖来抑制P(3HP)生成，并且通过实现乳酸酯合酶和将乳酸酯转化为乳酰辅酶A(lactyl-CoA)的酶的表达来在步骤(a)中合...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180315 KR 10-2018-00305221.一种3-羟基丙酸酯-乳酸酯嵌段共聚物[P(3HP-b-LA)]的制备方法，该制备方法包括以下步骤：
(a)通过用包含3-羟基丙酰辅酶A生物合成基因和聚羟基脂肪酸酯(PHA)合成酶基因的载体与包含乳酸酯生物合成基因和将乳酸酯转化为乳酰辅酶A(lactyl-CoA)的酶的基因的载体转化经改良以便不能生物合成乳酸的重组微生物来制备重组微生物的步骤；
(b)通过使用甘油作为碳源培养在步骤(a)中制备的重组微生物来合成P(3HP)的步骤；和
(c)通过加入IPTG和葡萄糖来抑制P(3HP)生成，并且通过实现乳酸酯合酶和将乳酸酯转化为乳酰辅酶A(lactyl-CoA)的酶的表达来在步骤(a)中合成的P(3HP)的末端生物合成PLA的步骤。


2.根据权利要求1所述的制备方法，其中，
在所述不能生物合成乳酸的重组微生物中，乳酸脱氢酶A编码基因(ldhA)被灭活。


3.根据权利要求1所述的制备方法，其中，
所述3-羟基丙酰辅酶A生物合成基因是编码甘油脱水酶、甘油脱水酶活化酶和辅酶A依赖性丙醛脱氢酶和醛脱氢酶的基因。


4.根据权利要求1所述的制备方法，其中，
所述聚羟基脂肪酸酯(PHA)合成酶基因是编码来自钩虫贪铜菌(Cupriavidusnecator)的PHA合成酶变体的基因reC_GK。


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【专利技术属性】
技术研发人员：姜惠玉，姜东均，金喆雄，许仁荣，崔祯允，
申请(专利权)人：株式会社LG化学，
类型：发明
国别省市：韩国;KR