吲达帕胺原料药中DCC含量的测定方法技术

本发明专利技术涉及一种吲达帕胺原料药中DCC含量的测定方法，包括以下步骤：(1)配制吲达帕胺原料药供试品溶液；(2)配制DCC的对照品溶液；(3)进样，按以下条件对步骤(1)供试品溶液和步骤(2)中的对照品溶液分别进行检测：色谱条件:流动相：乙腈‑水；梯度洗脱：0‑20min乙腈比例由44‑46％逐级升高至94‑96％；柱温为33‑37℃，流速为1.4‑1.6ml/min；检测波长为190‑210nm；(4)将供试品中DCC对应的峰面积与对照品溶液计算得到DCC的含量。本发明专利技术检测吲达帕胺原料药中DCC含量，线性范围在1.506‑15.060μg/ml之间，检出限为0.375μg/ml,回收率大于95％。本发明专利技术所提供的吲达帕胺原料药中DCC含量的检测方法，使用的试剂毒性小，杂质干扰少，检测方法可靠稳定，对吲达帕胺原料药的质量控制具有重要意义。

Determination of DCC in indapamide API

【技术实现步骤摘要】
吲达帕胺原料药中DCC含量的测定方法
本专利技术涉及一种吲达帕胺原料药中DCC含量的测定方法。
技术介绍
吲达帕胺为磺胺类利尿药，具有利尿和钙拮抗作用，是一种强效、长效的降压药，临床上还用于充血性心力衰竭时水钠潴留的治疗。DCC(二环己基碳二亚胺)为吲达帕胺合成工艺中的残留物，DCC的存在会影响目标产品的质量，因此需要对该杂质进行控制，确保其不超过一定的限度范围。目前国标HG/T5320-2018仅公开了采用气相色谱方法进行DCC质量分数的测定方法，现有技术中并没有任何关于DCC含量的检测方法，更没有关于吲达帕胺原料药中DCC含量的测定方法，而吲达帕胺原料药中DCC的含量一般较低，采用国标中气相色谱法进行检测时可能会存在较大的误差。液相色谱分析方法是目前检测分析常用的设备，具有快速、灵敏、选择性好等诸多优点，是实验室常用的检测设备，目前，并没有任何文献等公开过利用高效液相色谱法对吲达帕胺原料药中DCC进行检测的方法。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术中存在的技术问题，提供了一种吲达帕胺原料药中DCC含量的测定方法。本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：一种吲达帕胺原料药中DCC含量的测定方法，利用高效液相色谱法对吲达帕胺原料药中DCC的含量进行检测，包括以下步骤：(1)配制吲达帕胺原料药供试品溶液；(2)配制DCC的对照品溶液；(3)进样，按以下条件对步骤(1)中的供试品溶液和步骤(2)中的对照品溶液分别进行检测：色谱条件：流动相：乙腈-水；梯度洗脱：0-20min乙腈比例由44-46％逐级升高至94-96％；柱温为33-37℃，流速为1.4-1.6ml/min；检测波长为190-210nm；(4)将供试品中DCC对应的峰面积与对照品溶液相比计算得到DCC的含量。其中，色谱柱为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱。优选地，色谱柱为：AgelaVenusilC18Plus，4.6*200mm,5μm。优选地，色谱柱：AgelaVenusilXBPC18，4.6*200mm，5μm。其中，步骤(3)中色谱条件：进样量为8-12μl，优选为10μl。优选地，步骤(3)中色色谱条件为：梯度洗脱：0-20min乙腈比例由45％逐级升高至95％；柱温为35℃，流速为1.5ml/min；检测波长为205nm。其中，步骤(1)中吲达帕胺原料药的浓度为3-7mg/ml。其中，步骤(2)中DCC的浓度为5-10μg/ml。本专利技术中，所涉及到的计算公式如下：加标样品DCC本底含量(mg)＝加标样品供试品称样量×本底中DCC含量其中：A供试品＝供试品中DCC峰面积；C对照＝对照溶液中DCC的浓度，单位：mg/ml；A对照＝对照溶液中DCC的峰面积；W供试品＝供试品称样量，单位：mg；A加标样＝加标样品中DCC峰面积；V＝加标样品稀释体积，单位：ml。1、本专利技术对色谱条件中的波长进行优化：优化时：流动相：0-20min内乙腈比例由45％逐渐升至95％；流速：1.5ml/min；柱温：35℃；色谱柱：AgelaVenusilC18Plus，4.6*200mm,5μm。取DCC对照品溶液在160-400nm波长范围内扫描，根据扫描所得色谱图可知，DCC的响应值在190-210nm范围内响应值较高，考虑到溶剂的末端吸收干扰，因此以波长在205nm时为最佳。2、本专利技术对色谱条件中的流速进行优化：优化时：0-20min内乙腈比例由45％逐渐升至95％；检测波长：205nm；柱温：35℃；色谱柱：AgelaVenusilC18Plus4.6*200mm,5μm。取DCC对照品溶液在1.2ml/min、1.5ml/min、2.0ml/min的流速下分别进样检测，流速为1.2ml/min时，DCC峰在10min内未洗脱出来，流速为2.0ml/min时，DCC峰与其他杂质峰分离度较低，其中优以1.5ml/min为最佳。3、本专利技术对色谱条件中的梯度洗脱条件进行优化：优化时：检测波长：205nm；流速：1.5ml/min；柱温：35℃；色谱柱：AgelaVenusilC18Plus4.6*200mm,5μm。分别改变乙腈的起始比例为30％、35％、40％、45％、55％、60％、65％，其中以乙腈起始比例为45％时，分离情况和保留时间为最佳。本专利技术检测吲达帕胺原料药中DCC含量，线性范围在1.506-15.060μg/ml之间，检出限为0.375μg/ml,回收率大于95％。本专利技术所提供的吲达帕胺原料药中DCC含量的检测方法，使用的试剂毒性小，杂质干扰少，检测方法可靠稳定，对吲达帕胺原料药的质量控制具有重要意义。附图说明图1为实施例2中编号为1的供试品溶液的色谱图；图2为实施例2中编号为2的供试品溶液的色谱图；图3为实施例2中编号为3的供试品溶液的色谱图；图4为实施例2中编号为4的供试品溶液的色谱图；图5为实施例2中DCC对照品溶液的色谱图。具体实施方式以下结合附图对本专利技术的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本专利技术，并非用于限定本专利技术的范围。吲达帕胺原料药中DCC含量的测定方法，利用高效液相色谱法对吲达帕胺原料药中DCC的含量进行检测，具体步骤如下：1.仪器药品与试剂仪器：高效液相色谱(DIONEXUltimate3000)试剂：乙腈(默克，JA076530)、DCC(TCI，AG7CH-QN)、吲达帕胺原料药2.实验方法2.1供试品溶液的配制：精密称取吲达帕胺原料药125mg至25ml量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度。2.2对照品溶液的配制：精密称取DCC对照品75mg至100ml量瓶中，用乙醇溶解并稀释至刻度，再移取1ml至100ml量瓶中，用乙腈稀释至刻度。2.3色谱条件：色谱柱：AgelaVenusilC18Plus，4.6*200mm,5μm；流动相:乙腈-水梯度洗脱，0-20min乙腈比例由45％逐级升高至95％；柱温为35℃；流速为1.5ml/min；检测波长为205nm；进样量为10μl。实施例1分析方法验证结果如下：1、系统适用性：取DCC对照品溶液连续重复进样6次，记录色谱图峰面积，结果如下：表1系统适应性的验证结果2、专属性线性对照储备溶液的配制：精密称取DCC75mg，置于200ml量瓶中，用乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，称取2ml该溶液至100ml量瓶中，用乙腈稀释至刻度，作为100％水平对照品溶液。加标样品溶液的配制：精密称取吲达帕胺原料药125mg至25ml量瓶中，用上述100％水平对照品溶液溶解并稀释至刻度。分别取空白溶剂(乙腈)、DCC对照品本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.吲达帕胺原料药中DCC含量的测定方法，其特征在于，利用高效液相色谱法对吲达帕胺原料药中DCC的含量进行检测，包括以下步骤：/n(1)配制吲达帕胺原料药供试品溶液；/n(2)配制DCC的对照品溶液；/n(3)进样，按以下条件对步骤(1)供试品溶液和步骤(2)中的对照品溶液分别进行检测：/n色谱条件:流动相：乙腈-水；梯度洗脱：0-20min乙腈比例由44-46％逐级升高至94-96％；柱温为33-37℃，流速为1.4-1.6ml/min；检测波长为190-210nm；/n(4)将供试品中DCC对应的峰面积与对照品溶液计算得到DCC的含量。/n

【技术特征摘要】
1.吲达帕胺原料药中DCC含量的测定方法，其特征在于，利用高效液相色谱法对吲达帕胺原料药中DCC的含量进行检测，包括以下步骤：
(1)配制吲达帕胺原料药供试品溶液；
(2)配制DCC的对照品溶液；
(3)进样，按以下条件对步骤(1)供试品溶液和步骤(2)中的对照品溶液分别进行检测：
色谱条件:流动相：乙腈-水；梯度洗脱：0-20min乙腈比例由44-46％逐级升高至94-96％；柱温为33-37℃，流速为1.4-1.6ml/min；检测波长为190-210nm；
(4)将供试品中DCC对应的峰面积与对照品溶液计算得到DCC的含量。


2.根据权利要求1所述的吲达帕胺原料药中DCC含量的测定方法，其特征在于，步骤(3)中色谱条件为：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱。


3.根据权利要求1所述的吲达帕胺原料药中DCC含量的测定方法，其特征在于，色谱柱：AgelaVenusilC18Plus，4.6*200mm,5μm。


4.根据权利要求1所述的吲...

【专利技术属性】
技术研发人员：聂婷婷，刘佩佩，龚明峰，蔡一聪，陈小波，余继梅，
申请(专利权)人：远大医药中国有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42