一种厄贝沙坦中厄贝沙坦同分异构体检验方法技术

本发明专利技术涉及有机化学及药物分析领域，具体涉及一种高效液相色谱分离测定厄贝沙坦中厄贝沙坦同分异构体的检验方法，该方法主要包括：(1)通过色谱柱、柱温、检测波长及流动相等确定色谱条件；(2)配制空白溶液、对照品及供试品等溶液；(3)测定方法即分别精密量取空白溶液、对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；(4)计算。本发明专利技术所述的检验方法色谱峰分离度高、具有较高的系统适用性，同时在专属性、精密度、定量限、检测限、准确度、线性和范围和耐用性等方面都符合标准。

A test method of irbesartan isomers in irbesartan

【技术实现步骤摘要】
一种厄贝沙坦中厄贝沙坦同分异构体检验方法
本专利技术涉及有机化学及药物分析领域，具体涉及一种厄贝沙坦同分异构体的检验方法。
技术介绍
厄贝沙坦(irbesarta)化学名为：3-((2'-(1H-四氮唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-2-丁基-1,3-二氮杂螺环[4,4]壬-1-烯-4-酮，是由赛诺菲(Sanofi)研发，最早于1997年在英国上市。厄贝沙坦是一种血管紧张素II受体(AT1亚型)拮抗剂，通过与AT1血管紧张素II受体选择性的结合，以阻断血管紧张素II所引起的血管收缩和醛固酮分泌作用。该药用于治疗成人原发性高血压，也可作为降压药物治疗方案的一部分，用于高血压和2型糖尿病成年患者的肾病治疗。目前在厄贝沙坦原料药质量控制方面，主要针对于原料药中厄贝沙坦、杂质Ι及其他杂质的检验，而在厄贝沙坦制备过程中存在潜在的工艺杂质即厄贝沙坦同分异构体，其化学名为：1-((2'-(1H-四氮唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-2-丁基-1,3-二氮杂螺环[4,4]壬-1-烯-4-酮。目前有关厄贝沙坦同分异构体的报道较少，仅在专利文献CN106083826A中公布了厄贝沙坦异构体及其中间体厄贝沙坦缩合物异构体的制备方法，尚未发现有关厄贝沙坦同分异构体的检验方法，本专利技术旨在弥补此项空白，提供一种快速、准确的厄贝沙坦同分异构体的检验方法，便于厄贝沙坦原料药的质量控制。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种快速、准确的厄贝沙坦同分异构体的检验方法，该方法是通过高效液相色谱法施行的，并参照中国药典相关内容在系统适应性、专属性、精密度、定量限和检测限、耐用性等方面了进行验证。所述的厄贝沙坦同分异构体的检验方法主要包括以下步骤：(1)色谱条件仪器包括：色谱柱：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流速为1.0±0.2ml/min；检测波长：220±5nm；进样量：10±2μl；柱温：25±2℃；运行时间：20±3min；流动相：以磷酸溶液：乙腈体积为65：35；所述磷酸溶液配制方法为取85％磷酸5.5ml，加水950ml，用三乙胺调节pH值至3.2；(2)配制溶液：稀释液为甲醇；空白溶液为稀释液；厄贝沙坦同分异构体储备液：厄贝沙坦同分异构体对照品浓度5μg/ml；对照品溶液：厄贝沙坦同分异构体对照品浓度0.5μg/ml；供试品溶液：厄贝沙坦供试品浓度0.5mg/ml；(3)测定方法及计算公式分别将空白溶液、对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，结果％＝(RU/Rs)×(Cs/CU)×100，其中：RU—供试品溶液图谱中厄贝沙坦同分异构体峰面积；Rs—5针对照品溶液图谱中厄贝沙坦同分异构体的平均峰面积；Cs—对照品溶液中厄贝沙坦同分异构体的浓度mg/ml；CU—供试品溶液的浓度mg/ml。进一步，厄贝沙坦同分异构体限度如下表：名称可接受标准％LOQ％LOD％厄贝沙坦同分异构体(RRT≈0.4)≤0.10.030.01进一步，所述的厄贝沙坦中厄贝沙坦同分异构体的检验方法中还包括在检测之前的方法验证，该方法验证的色谱条件与检验方法中所述一致，具体内容如下：(1)系统适应性色谱条件：如上述。溶液配制：稀释液、空白溶液和对照品溶液如上述测定方法：分别将空白溶液和对照品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。(2)专属性色谱条件：如上述。溶液配制：除上述稀释液、空白溶液、储备液、对照品溶液、供试品溶液外，还包括选择性溶液，配制方法为：取厄贝沙坦供试品约25mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加适量稀释液溶解，并精密移取厄贝沙坦同分异构体储备液5.0ml置该瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀。(浓度：厄贝沙坦0.5mg/ml；厄贝沙坦同分异构体0.5μg/ml)测定方法：分别将空白溶液、对照品溶液、供试品溶液及选择性溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。(3)选择性色谱条件：如上述。溶液配制：稀释液、空白溶液、储备液、对照品溶液、供试品溶液及选择性溶液如上述。测定方法：分别将对照品溶液、供试品溶液及选择性溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。(4)重复性色谱条件：如上述。溶液配制：稀释液、空白溶液、储备液、对照品溶液、供试品溶液如上述。测定方法：分别将对照品溶液及供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。(5)定量限和检测限色谱条件：如上述。溶液配制：稀释液、空白溶液、储备液如上述，还包括以下溶液，供试品溶液a：精密移取上述厄贝沙坦同分异构体储备溶液6.0ml，置20ml容量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀。LOQ溶液：根据供试品溶液a所得图谱的S/N值，调整稀释比例至厄贝沙坦同分异构体S/N≈10；同法配制6份该溶液。LOD溶液：精密移取LOQ溶液3.0ml置10ml容量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀。测定方法：分别将供试品溶液a，LOQ溶液，LOD溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。(6)溶液稳定性色谱条件：如上述。溶液配制：稀释液、空白溶液、对照品溶液、供试品溶液如上述。测定方法：将对照品溶液和供试品溶液各取3份并分别在室温下放置0天、1天、2天后，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。进一步，方法验证中所得数据可接受标准为及测定结果为：有益效果由以上技术方案可知，本专利技术所述的检测方法弥补了厄贝沙坦中厄贝沙坦同分异构体检验方法的空白，并提供了一种快速、准确的厄贝沙坦同分异构体的检验方法，便于厄贝沙坦原料药的质量控制。此外，所述的检验方法色谱峰分离度高、具有较高的系统适用性，同时在专属性、精密度、定量限、检测限、准确度、线性和范围和耐用性都符合标准。附图说明图1：空白溶液谱图；图2：系统适用性溶液谱图；图3：对照品溶液谱图；图4：供试品溶液谱图；图5：选择性溶液谱图；图6：精密度检测谱图；图7：定量限检测谱图；图8：检测限验证谱图；图9：溶液稳定性验证-对照品溶液放置0天谱图；图10：溶液稳定性验证-对照品溶液放置2天谱图；图11：溶液稳定性验证-供试品溶液放置0天谱图；图12：溶液稳定性验证-供试品溶液放置2天谱图；具体实施方式下述实例将详细阐述本专利技术以助理解，但不能局限本专利技术的内容。实施例1厄贝沙坦中厄贝沙坦同分异构体的检验：(1)色谱条件仪器：高效液相色谱仪配置紫外检测器、电子分析天平，pH计色谱柱：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；(如：ThermoAcclaimTM120C18，5μm，4.6×150mm本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种厄贝沙坦中厄贝沙坦同分异构体的检验方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：/n(1)色谱条件/n仪器包括：色谱柱：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流速为1.0±0.2ml/min；检测波长：220±5nm；进样量：10±2μl；柱温：25±2℃；运行时间：20±3min；流动相：以磷酸溶液：乙腈体积为65：35；/n所述磷酸溶液配制方法为取85%磷酸5.5ml，加水950ml，用三乙胺调节pH值至3.2；/n(2)配制溶液：稀释液为甲醇；空白溶液为稀释液；厄贝沙坦同分异构体储备液：厄贝沙坦同分异构体对照品浓度5μg/ml；对照品溶液：厄贝沙坦同分异构体对照品浓度0.5μg/ml；供试品溶液：厄贝沙坦供试品浓度0.5mg/ml；/n(3)测定方法及计算公式/n分别将空白溶液、对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，结果%=(R

【技术特征摘要】
1.一种厄贝沙坦中厄贝沙坦同分异构体的检验方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)色谱条件
仪器包括：色谱柱：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流速为1.0±0.2ml/min；检测波长：220±5nm；进样量：10±2μl；柱温：25±2℃；运行时间：20±3min；流动相：以磷酸溶液：乙腈体积为65：35；
所述磷酸溶液配制方法为取85%磷酸5.5ml，加水950ml，用三乙胺调节pH值至3.2；
(2)配制溶液：稀释液为甲醇；空白溶液为稀释液；厄贝沙坦同分异构体储备液：厄贝沙坦同分异构体对照品浓度5μg/ml；对照品溶液：厄贝沙坦同分异构体对照品浓度0.5μg/ml；供试品溶液：厄贝沙坦供试品浓度0.5mg/ml；
(3)测定方法及计算公式
分别将空白溶液、对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，结果%=(RU/Rs)×(Cs/CU)×100，其中：RU—供试品溶液图谱中厄贝沙坦同分异构体峰面积；Rs—5针对照品溶液图谱中厄贝沙坦同分异构体的平均峰面积；Cs—对照品溶液中厄贝沙坦同分异构体的浓度mg/ml；CU—供试品溶液的浓度mg/ml。


2.根据权利要求1所述的一种厄贝沙坦中厄贝沙坦同分异构体的检验方法，其特征在于，厄贝沙坦同分异构体限度为：










名称
可接受标准%
LOQ%
LOD%


厄贝沙坦同分异构体（RRT≈0.4）
≤0.1
0.03
0.01






。


3.根据权利要求1所述的一种厄贝沙坦中厄贝沙坦同分异构体的检验方法，其特征在于，该检验方法还包括在检测之前的方法验证，该方法验证的色谱条件与检验方法的色谱条件一致，具体内容如下：
（1）系统适应性
色谱条件：如上述；
溶液配制：稀释液、空白溶液和对照品溶液如权利要求1所述；
测定方法：分别将空白溶液和对照品溶液注入液...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴挺强，谢金昌，王盼盼，蔡强，周爱新，罗伟苑，刘杰，
申请(专利权)人：珠海润都制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44