【技术实现步骤摘要】
一种检测药物性耳聋基因的探针组合物及其应用
本专利技术属于生物
，属于基因检测
，涉及一种检测药物性耳聋基因的探针组合物及其应用，尤其涉及一种检测药物性耳聋基因C1494T和A1555G突变的探针组合物、试剂盒、检测方法及其应用。
技术介绍
目前，传染病是世界上最主要的致死原因之一，全世界每年有超过1700万人死于细菌感染。氨基糖苷类抗生素，因其具有良好的抗菌活性和广谱抗菌性，被广泛应用于治疗由革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌引起的感染。但近年来发现，不合理使用氨基糖苷类抗生素可造成耳毒性和肾毒性。线粒体DNA12SrRNA基因C1494T和A1555G突变的携带者，在使用氨基糖苷类抗生素如链霉素、庆大霉素、卡那霉素和西索米星等临床常用药后，可能会造成不同程度的听力损伤，甚至完全致聋。据报道，每一位氨基糖苷类药物性耳聋敏感者具有10～14位携带此突变的亲属。由于线粒体遗传属于母系遗传，因此携带此突变的女性患者的后代几乎都为突变基因的携带者。语前聋不仅使得患儿无法进行正常交流，而且阻碍了患儿的正常智力发育，给家庭...
【技术保护点】
1.一种检测药物性耳聋基因的探针组合物，其特征在于，所述探针组合物包括检测C1494T位点的第一双链检测探针，和检测A1555G位点的第二双链检测探针；/n所述第一双链检测探针包括与C1494T位点杂交的第一杂交寡核苷酸，和与所述第一杂交寡核苷酸部分互补的第一互补寡核苷酸；/n所述第二双链检测探针包括与A1555G位点杂交的第二杂交寡核苷酸，和与所述第二杂交寡核苷酸部分互补的第二互补寡核苷酸；/n所述第一杂交寡核苷酸标记有荧光基团和淬灭基团；/n所述第二杂交寡核苷酸标记有荧光基团和淬灭基团；/n所述第一互补寡核苷酸或第二互补寡核苷酸的3’端标记有淬灭基团。/n
【技术特征摘要】
1.一种检测药物性耳聋基因的探针组合物，其特征在于，所述探针组合物包括检测C1494T位点的第一双链检测探针，和检测A1555G位点的第二双链检测探针；
所述第一双链检测探针包括与C1494T位点杂交的第一杂交寡核苷酸，和与所述第一杂交寡核苷酸部分互补的第一互补寡核苷酸；
所述第二双链检测探针包括与A1555G位点杂交的第二杂交寡核苷酸，和与所述第二杂交寡核苷酸部分互补的第二互补寡核苷酸；
所述第一杂交寡核苷酸标记有荧光基团和淬灭基团；
所述第二杂交寡核苷酸标记有荧光基团和淬灭基团；
所述第一互补寡核苷酸或第二互补寡核苷酸的3’端标记有淬灭基团。
2.根据权利要求1所述的探针组合物，其特征在于，所述第一杂交寡核苷酸包括如SEQIDNO:1所示的核酸序列；
优选地，所述第一互补寡核苷酸包括如SEQIDNO:2所示的核酸序列；
优选地，所述第二杂交寡核苷酸包括如SEQIDNO:3所示的核酸序列；
优选地，所述第二互补寡核苷酸包括如SEQIDNO:4所示的核酸序列。
3.一种检测药物性耳聋基因的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求1或2所述的探针组合物；
优选地，所述试剂盒还包括PCR扩增引物；
优选地，所述PCR扩增引物包括如SEQIDNO:5～6所示的核酸序列。
4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括酶混合液、dNTP混合液和PCR缓冲液；
优选地，所述酶混合液包括DNA聚合酶和/或UNG酶；
优选地，所述dNTP混合液包括dATP、dCTP、dGTP和dUTP；
优选地，所述PCR缓冲液中含有Mg2+。
5.根据权利要求3或4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括阴性质控品和/或阳性质控品；
优选地，所述阴性质控品包括C1494T和A1555G突变阴性的样本；
优选地，所述阳性质控品包括C1494T突变阳性的样本和/或A1555G突变阳性的样本。
6.一种检测药物性耳聋基因的体系，其特征在于，所述体系包括如权利要求1或2所述的探针组合物；
优选地，所述探针组合物中的第一杂交寡核苷酸和第二杂交寡核苷酸的浓度为200～400nM；
优选地，所述探针组合物中的第一互补寡核苷酸和第二互补...
【专利技术属性】
技术研发人员：梁少明，陈志超，李卫红，邹锦慧，
申请(专利权)人：肇庆医学高等专科学校，
类型：发明
国别省市：广东;44
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