【技术实现步骤摘要】
一种猪瘟弱毒病毒的培养方法
本专利技术涉及细胞培养
和兽医领域，具体涉及一种兽用活疫苗的生产方法，更具体涉及猪瘟弱毒病毒的培养方法。
技术介绍
牛睾丸原代细胞是一种用来培养猪瘟病毒的原代细胞。该方法用于繁殖猪瘟病毒，具有免疫原性好、病毒收获滴度高等特点，且正常培养可连续收获5代次以上，是目前猪瘟疫苗生产企业最常用的生产方法。现有牛睾丸细胞培养方法中，大部分公司为无添加细胞生长调节剂或者只添加二甲基亚砜的方法进行培养，这些细胞培养方法会出现细胞生长周期短、细胞死亡过快，造成收获的各代次差异过大，从而影响疫苗质量。牛睾丸原代细胞常规培养方法虽然具有诸多优点，但在现有技术下，全国每年因生产猪瘟疫苗所消耗的牛睾丸达70万对，过程费时费力，对牛群伤害巨大，因此研究出可以延长原代细胞生长周期，减少收获病毒各代次间的差异，增加每批次收获量极为重要。二甲基亚砜(DMSO)是一种含硫有机化合物，常用于细胞冻存、医药生产、有机合成等多种领域。DMSO对细胞膜中的脂质和脂蛋白有稳定作用，可减少冻存及解冻对细胞的伤害。而3-异丁基-1...
【技术保护点】
1.一种维持原代或传代细胞系单层的培养方法，其特征在于，培养所用的细胞培养维持液中添加DMSO与IBMX。/n
【技术特征摘要】
1.一种维持原代或传代细胞系单层的培养方法，其特征在于，培养所用的细胞培养维持液中添加DMSO与IBMX。
2.如权利要求1所述的维持传代细胞系单层的培养方法，其特征在于，添加DMSO与IBMX的量分别为：0.1％(V/V)-2.0％(V/V)、10ug/L-1000mg/L，优选添加量为：0.5％(V/V)-1.5％(V/V)、100ug/L-100mg/L，更优选的添加量为：1.5％(V/V)DMSO+10ug/LIBMX、1.0％(V/V)DMSO+100ug/LIBMX、0.5％(V/V)DMSO+1000ug/LIBMX。
3.如权利要求1或2所述的维持传代细胞系单层的培养方法，其特征在于，所述原代细胞为犊牛睾丸细胞、犊牛肾细胞，所述传代细胞系选自：BT细胞系、猪睾丸传代细胞系、Vero细胞、猪肾传代细胞系。
4.如权利要求1或2所述的维持传代细胞系单层的培养方法，其特征在于，培养所用的细胞培养维持液选自：水解乳蛋白-汉克氏液、a-MEM、DMEM、1640、M199。
5.按照权利要求1或2所述的维持传代细胞系单层的培养方法，其特征在于：所述细胞系的培养方式为单层贴壁培养、微载体悬浮培养或...
【专利技术属性】
技术研发人员：罗琦，朱佳，张万林，顾超男，金京勋，夏丽君，莫一群，支银，王祥，童佳琪，
申请(专利权)人：中崇信诺生物制药泰州有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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