鸡骨草提取物在制备抗癌药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于医药领域，具体为鸡骨草提取物在制备抗癌药物中的应用。所述鸡骨草提取物为鸡骨草石油醚提取物、鸡骨草乙酸乙酯提取物、鸡骨草正丁醇提取物和/或鸡骨草水提取物。本发明专利技术提供的鸡骨草提取物可促进bax蛋白和抑制bcl‑2表达来使肿瘤细胞发生凋亡，对制备抗癌药物，尤其是胃癌、肝癌、乳腺癌药物具有重要意义。

Application of Abrus cantoniensis extract in the preparation of anticancer drugs

【技术实现步骤摘要】
鸡骨草提取物在制备抗癌药物中的应用
本专利技术涉及医药领域，具体涉及鸡骨草提取物在制备抗癌药物中的应用。
技术介绍
癌症是人类健康的第二大杀手，目前临床上使用化疗药物的过程中经常出现抗药性，癌细胞往往杀不死，肿瘤经常复发转移而导致死亡。其中很重要的原因之一是这部分癌细胞中的凋亡抑制基因(Bcl2基因)高表达，使肿瘤细胞抗凋亡而不死亡，从而常出现肿瘤复发转移。因此抑制肿瘤Bcl2基因表达的作用是提高药物疗效、彻底杀死癌细胞和防止肿瘤复发转移的重要途径之一。中草药的天然产物中存在着广泛的生物活性物质,如何从中草药中寻找毒副作用小,作用独特的抗肿瘤药物及抗肿瘤辅助药物,发挥我国传统中药的优势将为肿瘤的治疗另辟蹊径。鸡骨草(Abruscantoniensis)又名黄头草、黄仔强、大黄草、猪腰草，为豆科Leguminosae，该植物主要在分布于广东、广西等地。鸡骨草全草除其种子外均可入药，具有利湿退黄，清热解毒，疏肝止痛等功效，鸡骨草是一种药食两用植物，在春夏潮湿季节用来煲汤作食疗及制作凉茶等。鸡骨草药理作用是多方面的，它涉及到降脂保肝、抗菌、抗炎镇痛、增强免疫、抗氧化、促进伤口愈合、治疗母儿ABO血型不合等多种生物活性。在前期试验研究中，专利技术人发现鸡骨草具有一定的抗肿瘤作用，提示鸡骨草作为传统的民间中草药在肿瘤治疗方面具有广阔的前景。目前，尚未有鸡骨草提取物通过促进bax蛋白和抑制bcl-2表达使肿瘤细胞发生凋亡的报道。
技术实现思路
本专利技术的专利技术目的在于：针对现有技术的不足，提供鸡骨草提取物在制备抗癌药物中的应用。为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：鸡骨草提取物在制备抗癌药物中的应用，所述鸡骨草提取物为鸡骨草石油醚提取物、鸡骨草乙酸乙酯提取物、鸡骨草正丁醇提取物和/或鸡骨草水提取物。上述鸡骨草提取物的制备方法为：(1)取鸡骨草全草干燥粉末用95％乙醇进行加热回流提取，滤过，滤液浓缩至膏状得鸡骨草的乙醇粗提取物；(2)将步骤(1)的乙醇粗提取物溶于水中形成混悬液，分别用石油醚、乙酸乙酯与正丁醇依次萃取，回收萃取溶剂继而得到石油醚部位浸膏、乙酸乙酯部位浸膏、正丁醇部位浸膏和水层部位浸膏，对应标记为鸡骨草石油醚提取物、鸡骨草乙酸乙酯提取物、鸡骨草正丁醇提取物、鸡骨草水提取物。本专利技术所述抗癌药物为抗胃癌药物、抗肝癌药物和/或抗乳腺癌药物。专利技术人研究发现，所述鸡骨草提取物是通过促进bax蛋白和抑制bcl-2表达使肿瘤细胞发生凋亡的。本专利技术所述抗癌药物包括有效量的鸡骨草提取物及药学上可接受的载体或辅料。本领域技术人员可通过常规药剂学手段选择加入载体或辅料将鸡骨草提取物制备成各种制剂，如加入淀粉或糊精制备成颗粒剂、胶囊剂、片剂；加入糖浆制备成糖浆剂，或直接冻干制成冻干制剂。优选地，所述抗癌药物为冻干制剂。本专利技术中，所述95％乙醇指的是体积分数为95％的乙醇。综上所述，由于采用了上述技术方案，本专利技术的有益效果是：(1)本专利技术通过对裸鼠皮下移植瘤的抑瘤率、免疫指数影响探讨其抗肿瘤作用。体内药效实验显示，鸡骨草乙酸乙酯、正丁醇、水提取物均有抑瘤作用，其中乙酸乙酯提取物抑瘤作用最强，正丁醇提取物次之，水提取物最差，乙酸乙酯提取物高剂量组的抑瘤率均可达40％以上，且随着剂量的增加，抑瘤率明显增加，呈现量效关系，且可以降低肝脏指数，但对脾脏及胸腺指数无明显影响。正丁醇和水提取物对肝脏、脾脏和胸腺指数无影响。鸡骨草提取物在体外具有抑制肿瘤细胞增殖作用,其主要有效成分集中在乙酸乙酯、正丁醇和水部位，以乙酸乙酯提取部位最强。(2)体内抗肿瘤活性研究表明鸡骨草乙酸乙酯提取物对BEL-7404裸鼠皮下移植瘤的抑瘤效果最强，可促进bax蛋白和抑制bcl-2表达来使肿瘤细胞发生凋亡。体外抗肿瘤活性研究表明，鸡骨草乙酸乙酯提取物可阻滞BEL-7404细胞周期于G0/G1期和诱导肿瘤细胞凋亡。(3)本专利技术揭示了鸡骨草体内和体外抗肿瘤作用的物质基础，对于进一步分离抗肿瘤单体化合物，药材开发成抗肿瘤创新药物奠定基础。【附图说明】图1为鸡骨草提取物对裸鼠移植瘤的影响图；图2为鸡骨草提取物对BEL-7404裸鼠皮下移植瘤组织形态的影响图(400X)；图3为鸡骨草提取物对SGC-7901裸鼠皮下移植瘤组织形态的影响图(400X)；图4为鸡骨草提取物对MCF-7裸鼠皮下移植瘤组织形态的影响图(400X)；图5为BEL-7404肿瘤组织中bax的表达情况图(400X)；图6为BEL-7404肿瘤组织中bcl-2的表达情况图(400X)；其中，A为模型组，B为5-FU，C为乙酸乙酯提取物组，D为正丁醇提取物组，E为水提取物组。图7为鸡骨草提取物对3种肿瘤细胞株形态的影响图。其中，A－人胃癌细胞SGC-7901；B－人肝癌细胞BEL-7404；C－人乳腺癌细胞MCF-7；a－对照组；b－石油醚提取物(0.6mg·mL-1)；c－乙酸乙酯提取物(0.6mg·mL-1)；d－正丁醇提取物(0.6mg·mL-1)；e－水提取物(0.6mg·mL-1)。图8为Hoechst33258荧光染色法观察鸡骨草乙酸乙酯提取物对BEL-7404细胞凋亡形态学的影响图(×200)；其中B—人肝癌细胞BEL-7404；0—0mg·ml-1；1—0.2mg·ml-1；2—0.4mg·ml-1；3—0.6mg·mL-1。图9为鸡骨草乙酸乙酯提取物对BEL-7404肝癌细胞周期分布的影响图。图10为鸡骨草乙酸乙酯提取物对BEL-7404细胞凋亡率的影响图。【具体实施方式】实施例1鸡骨草提取物的制备及体内抗肿瘤活性的研究。1材料和方法1.1材料1.1.1药材鸡骨草购自广西百色市(经右江民族医学院民族医学教研室覃道光副教授鉴定为豆科相思子属植物广东相思子的全草)。1.1.2细胞及实验动物细胞株人胃癌细胞株SGC－7901、人肝癌细胞株BEL-7404和人乳腺癌细胞株MCF-7细胞株购于中国科学院昆明细胞库。细胞培养于含10％胎牛血清的DMEM培养基中，在温度为37℃、饱和湿度、5％CO2的培养箱中培养。4-5周龄SPF级BALB/c裸鼠购买于湖南长沙天勤公司。合格证编号：NO.20181012，饲养于右江民族医学院实验动物中心。1.1.3主要试剂与仪器DMEM高糖培养基：赛默飞世尔科技公司；优级胎牛血清：AusGeneX；无菌PBS、CCK-8试剂：博士德；二甲基亚枫(DMSO)：Sigma公司；0.25％EDTA-胰酶：北京索来宝公司；兔抗人Bcl-2、Bax多克隆抗体(ABclonal)；乙醇、乙酸乙酯、正丁醇等其它试剂均为分析纯。RE-3000A旋转蒸发仪：上海亚荣生化仪器厂；循环水式多用真空泵：SHB-B88型，郑州长城科工贸有限公司；真空干燥箱：DZF-6020型，广州市星烁仪器有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.鸡骨草提取物在制备抗癌药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.鸡骨草提取物在制备抗癌药物中的应用。


2.根据权利要求1所述的鸡骨草提取物在制备抗癌药物中的应用，其特征在于，所述鸡骨草提取物为鸡骨草石油醚提取物、鸡骨草乙酸乙酯提取物、鸡骨草正丁醇提取物和/或鸡骨草水提取物。


3.根据权利要求2所述的鸡骨草提取物在制备抗癌药物中的应用，其特征在于所述鸡骨草提取物的制备方法为：
(1)取鸡骨草全草干燥粉末用95％乙醇进行加热回流提取，滤过，滤液浓缩至膏状得鸡骨草的乙醇粗提取物；
(2)将步骤(1)的乙醇粗提取物溶于水中形成混悬液，分别用石油醚、乙酸乙酯与正丁醇依次萃取，回收萃取溶剂继而得到石油醚部位浸膏、乙酸乙酯部位浸膏、正丁醇部位浸膏和水层部位浸膏，对应标记为鸡骨草石油...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄锁义，李庭树，莫仁高，陈小妮，雷智冬，陈石梅，王金妮，
申请(专利权)人：右江民族医学院，
类型：发明
国别省市：广西;45