抗HSV gB单克隆抗体或其抗原结合片段制造技术

抗HSV单克隆抗体或其抗原结合片段为与单纯疱疹病毒(HSV)的包膜糖蛋白B(gB)特异地结合的抗HSV gB单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含由序列号3记载的氨基酸序列构成的重链CDR1、由序列号4记载的氨基酸序列构成的重链CDR2及由序列号5记载的氨基酸序列构成的重链CDR3；所述轻链可变区包含由序列号6记载的氨基酸序列构成的轻链CDR1、由序列号7记载的氨基酸序列构成的轻链CDR2及由序列号8记载的氨基酸序列构成的轻链CDR3。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗HSVgB单克隆抗体或其抗原结合片段
本专利技术涉及抗HSVgB单克隆抗体或其抗原结合片段。
技术介绍
单纯疱疹病毒(Herpessimplexvirus；HSV)为嗜神经性的病原体，在首次感染粘膜上皮后转移到感觉神经，在三叉神经节或骶神经节中终生潜伏感染。潜伏状态的HSV时而会激活而引起各种病情(非专利文献1)。已知HSV存在2种血清型(HSV-1、HSV-2)，HSV-1主要为口唇·角膜疱疹的病因，HSV-2主要为生殖器疱疹的病因。但是，近年由于性行为的多样化等，也存在HSV-1屡屡成为生殖器疱疹的病因、HSV-2屡屡成为口唇疱疹的病因的情况。日本的抗体阳性者(已感染者)比率在HSV-1的情况下为60～80％、HSV-2则为10％，即使仅限于HSV-2，推测疫苗的潜在需求也为1000万人(非专利文献2)。另外，美国的抗体阳性者(已感染者)比率在HSV-1的情况下为57％、HSV-2则为20％(其中约10％为明显的生殖器疱疹)(非专利文献3)。已知在HSV对细胞建立感染中，在吸附和侵入这2个阶段中有5个包膜糖蛋白(glycoprotein)参与。这5个包膜糖蛋白分别被称为包膜糖蛋白B(gB)、包膜糖蛋白C(gC)、包膜糖蛋白D(gD)、包膜糖蛋白H(gH)、包膜糖蛋白L(gL)(非专利文献4)。首先，gB及gC结合到细胞表面的硫酸乙酰肝素上这一点成为吸附过程的契机(非专利文献5、6)。该过程在HSV侵入细胞时并非必不可少，但是一般认为关系到更有效的侵入。接着，gB及gD与各自的宿主细胞受体结合，病毒包膜与宿主细胞膜融合，从而开始侵入过程。作为宿主细胞受体，已知有gB受体和gD受体。作为gB受体，已鉴定出NM-IIA(非专利文献7、8)及MAG(非专利文献9)。作为gD受体，已鉴定出结合素1(非专利文献10)、HVEM(非专利文献11)及3-O-硫酸化硫酸乙酰肝素(非专利文献12)。另外，已知gH/gL的杂二聚体与gB及gD相互作用而在膜融合中发挥重要的作用(非专利文献13)。2006年破解了HSV-1gB的结构，结果获知，gB形成具有5个结构域的三聚体(非专利文献14)。另外，gB的结构采取与作为膜融合蛋白而已知的VSV(Vesicularstomatitisvirus，疱疹性口炎病毒)的gG相似的结构，这一点支持gB为HSV的膜融合蛋白。另外，gB在其它疱疹病毒中也高度保守，可认为其功能在疱疹病毒中是相同的。截至目前为止，为了确定HSVgB的功能性区域，有多个研究小组一直在使用gB的突变体、单克隆抗体进行该分析(非专利文献15～18)。其结果是，发现了几个功能性区域。目前，在HSV的治疗中使用阿昔洛韦等抗病毒药，但不能彻底清除病毒，若停止服用则病毒会再次激活。这起因于HSV采取了在神经节中潜伏感染这一特殊的感染方式。因此，期望开发出防御HSV感染本身的预防用疫苗、或减轻·缓和感染症状·激活症状的治疗用疫苗，但是，目前不存在有效的疫苗，对其需求较高。另外，担心通过高频度或长期使用阿昔洛韦、膦甲酸钠等抗病毒药而导致抗药病毒株增加(非专利文献19)。另外，这些抗病毒药有肝功能异常、精子产生能力下降、消化管障碍、肾功能异常等各种副作用，偶尔还可能发生不可避免的减少药量、停药的情况。已知HSV为无法通过现有疫苗、病原体感染史获得充分的保护性免疫的病原体之一。一般认为，这是由于HSV具有各种免疫逃逸机制，巧妙地逃避了宿主的免疫反应。现有技术文献非专利文献非专利文献1:Roizman,B.等、Herpessimplexviruses,p.2501-2602.InD.M.KnipeandP.M.Howley(ed.),“FieldsVirology”,5thed.LippincottWilliams&Wilkins,Philadelphia,P.A.2007非专利文献2:HashidoM1等、Anepidemiologicstudyofherpessimplexvirustype1and2infectioninJapanbasedontype-specificserologicalassays,EpidemiolInfect.1998Mar；120(2):179-86非专利文献3:DecisionResources；EmergingVaccines2008非专利文献4:ウイルス2010第60卷第2号，pp.187-196非专利文献5:Herold,B.C.等、GlycoproteinC-independentbindingofherpessimplexvirustocellsrequirescellsurfaceheparansulphateandglycoproteinB.JGenVirol199475(Pt6):1211-22非专利文献6:Herold,B.C.等、GlycoproteinCofherpessimplexvirustype1playsaprincipalroleintheadsorptionofvirustocellsandininfectivity.JVirol199165:1090-8非专利文献7:Arii,J.等、Non-musclemyosinIIAisafunctionalentryreceptorforherpessimplexvirus-1.Nature2010467:859-62非专利文献8:Satoh,T.等、PILRalphaisaherpessimplexvirus-1entrycoreceptorthatassociateswithglycoproteinB.Cell2008132:935-44非专利文献9:Suenaga,T.等、Myelin-associatedglycoproteinmediatesmembranefusionandentryofneurotropicherpesviruses.ProcNatlAcadSciUSA2010107:866-71非专利文献10:Geraghty,R.J.等、Entryofalphaherpesvirusesmediatedbypoliovirusreceptor-relatedprotein1andpoliovirusreceptor.Science1998280:1618-20非专利文献11:Montgomery,R.I.等、Herpessimplexvirus-1entryintocellsmediatedbyanovelmemberoftheTNF/NGFreceptorfamily.Cell(1996)87:427-36非专利文献12:Shukla,D.,等、Anovelrolefor3-O-sulfatedheparansulfateinherpessimplexvirus1entry.Cell199999:13-22非专利文献13:Eisenber本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗HSV gB单克隆抗体或其抗原结合片段，其为与单纯疱疹病毒(HSV)的包膜糖蛋白B(gB)特异地结合的抗HSV gB单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含重链可变区和轻链可变区，/n所述重链可变区包含由序列号3记载的氨基酸序列构成的重链CDR1、由序列号4记载的氨基酸序列构成的重链CDR2及由序列号5记载的氨基酸序列构成的重链CDR3；/n所述轻链可变区包含由序列号6记载的氨基酸序列构成的轻链CDR1、由序列号7记载的氨基酸序列构成的轻链CDR2及由序列号8记载的氨基酸序列构成的轻链CDR3。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170830 JP 2017-1659681.一种抗HSVgB单克隆抗体或其抗原结合片段，其为与单纯疱疹病毒(HSV)的包膜糖蛋白B(gB)特异地结合的抗HSVgB单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含重链可变区和轻链可变区，
所述重链可变区包含由序列号3记载的氨基酸序列构成的重链CDR1、由序列号4记载的氨基酸序列构成的重链CDR2及由序列号5记载的氨基酸序列构成的重链CDR3；
所述轻链可变区包含由序列号6记载的氨基酸序列构成的轻链CDR1、由序列号7记载的氨基酸序列构成的轻链CDR2及由序列号8记载的氨基酸序列构成的轻链CDR3。


2.根据权利要求1所述的抗HSVgB单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含：
包括序列号1记载的氨基酸序列的重链可变区、和
包括序列号2记载的氨基酸序列的轻链可变区。


3.根据权利要求1或2所述的抗HSVgB单克隆抗体或其抗原结合片段，其中，所述HSV为HSV-1或HSV-2。


4.一种多核苷酸，其编码权利要求1～3中任一项所述的抗HSVgB单克隆抗体或其抗原结合片段。


5.一种表达载体，其包含权利要求4所述的多核苷酸、和与该多核苷酸可操作地连接的1或多个调控序列。


6.一种转化体，其导入有权利要求5所述的表达载体。


7.一种使用权利要求4所述的多核苷酸、权利要求5所述的表达载体或权利要求6所述的转化体制造权利要求1～3中任一项所述的抗HSVgB单克隆抗体或其抗原结合片段的方法。


8.一种用于预防或治疗HSV感染症的药物组合物，其包含权利要求1～3中任一项所述的抗HSVgB单克隆抗体或其抗原结合...

【专利技术属性】
技术研发人员：森泰亮，西村知裕，清水裕之，河边昭博，
申请(专利权)人：KM生物医薬股份公司，
类型：发明
国别省市：日本;JP