一种区分香蕉枯萎病抗感品种的CAPS标记方法技术

本发明专利技术提供了一种区分香蕉枯萎病抗感品种的CAPS标记方法，通过对中热1号和巴西蕉进行测序和分析，得到可用于区分中热1号和巴西蕉InDel突变，该突变导致基因序列对BclI内切酶消化的差异，基于此，设计了区分香蕉枯萎病抗感品种的CAPS标记方法，能直接反映植株的抗性，不存在由于遗传交换而造成的错误鉴定，可有效鉴别主栽品种巴西蕉及其辐射诱变育种选育出的抗病品种中热1号，极大地提高了抗性基因的选择效率，而且利用该标记方法在香蕉苗期鉴定不仅可以节约田间育种成本，还可以大大提高抗枯萎病香蕉品种的选择进程，为香蕉抗性突变育种奠定基础。

A method of caps marking to distinguish resistant and susceptible varieties of Banana Fusarium Wilt

【技术实现步骤摘要】
一种区分香蕉枯萎病抗感品种的CAPS标记方法
本专利技术属于分子生物
，具体而言，涉及一种区分香蕉枯萎病抗感品种的CAPS标记方法。
技术介绍
酶切扩增多态性序列(Cleavedamplifiedpolymorphicsequence,CAPS)是PCR反应和限制性内切酶酶切相结合产生的一种分子标记方法。其基本原理是先用已知位点的DNA序列设计一套特异性PCR引物，扩增后用一种专一性的限制性内切酶酶切所得的扩增产物进行限制性片段长度多态性分析。CAPS标记具有共显性、特异性、操作简单和成本低的特点，目前主要用于植物基因定位、分型、图位克隆和品种品系鉴定等方面的研究。香蕉是一种重要的果粮兼备的热带经济作物。目前全世界有130多个国家种植香蕉。我国种植面积为41.28万公顷(不含台湾)，产量达1085万吨，产值为29.7亿美元，位居世界第二(FAOSTAT,2014)。香蕉产业已成为我国热带农业的支柱性产业，在南方热区经济和农村社会发展中发挥着十分重要的作用。目前，香蕉产业中面临的突出问题主要有：一是主栽品种单一，优良品种缺乏。无论我本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种区分香蕉枯萎病抗感品种的CAPS标记方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)提取待测香蕉基因组DNA；/n(2)以待测香蕉基因组DNA为模板，利用特异性引物对进行PCR扩增反应，所述特异性引物对为：/n正向引物G0629F2：5'-TAGCAAAATACATGAACTTTTGGA-3'，/n反向引物G0629R2：5'-TCCTCACGACAACAACGAGAAAAAG-3'；/n(3)将扩增产物用Bcll限制性内切酶进行酶切，获得酶切产物，并对酶切产物凝胶电泳，若获得两条片段，则为巴西蕉，若获得三条片段，则为中热1号香蕉。/n

【技术特征摘要】
1.一种区分香蕉枯萎病抗感品种的CAPS标记方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)提取待测香蕉基因组DNA；
(2)以待测香蕉基因组DNA为模板，利用特异性引物对进行PCR扩增反应，所述特异性引物对为：
正向引物G0629F2：5'-TAGCAAAATACATGAACTTTTGGA-3'，
反向引物G0629R2：5'-TCCTCACGACAACAACGAGAAAAAG-3'；
(3)将扩增产物用Bcll限制性内切酶进行酶切，获得酶切产物，并对酶切产物凝胶电泳，若获得两条片段，则为巴西蕉，若获得三条片段，则为中热1号香蕉。


2.根据权利要求1所述的CAPS标记方法，其特征在于，步骤(3)中，若获得大小分别为447bp和196bp的两条片段，则为巴西蕉，若获得大小分别为447bp、129bp和77bp的三条片段，则为中热...

【专利技术属性】
技术研发人员：王静毅，王卓，贾彩红，刘菊华，徐碧玉，金志强，张建斌，苗红霞，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院热带生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：海南;46