一组梨果皮qRT-PCR内参基因及其引物和应用制造技术

本发明专利技术提供一组可用于广泛梨品种果皮发育过程、套袋和采后低温贮藏中基因表达分析的新内参，其中ACT6/7/8/9和NAP1可作为最优内参基因组合用于梨果皮基因表达分析。本发明专利技术基于基因组和转录组筛选出的5个新内参在梨果皮发育过程、套袋和采后低温贮藏处理中的表达稳定度优于传统内参基因(Actin、EF1α、TUB、UBI、GAPDH和26‑18S rRNA)；从5个新内参中开发了一对ACT6/7/8/9和NAP1的内参组合，其用于广泛梨品种果皮发育过程、低温贮藏和套袋处理中的基因表达均化效果最佳；5个新内参及所开发的ACT6/7/8/9和NAP1内参基因组合可应用于广泛梨品种的果皮发育过程、套袋和采后低温贮藏处理的基因表达研究。

A set of QRT PCR internal reference genes of pear peel and their primers and Application

【技术实现步骤摘要】
一组梨果皮qRT-PCR内参基因及其引物和应用
本专利技术涉及植物基因工程领域，具体涉及5个可用于广泛梨品种果皮发育过程、套袋和采后低温贮藏中基因表达分析的新内参基因，其中推荐ACT6/7/8/9和NAP1作为最优内参基因组合用于广泛梨品种果皮基因表达分析。
技术介绍
梨(PyrusL.)世界上最具经济价值的水果之一，大体可分为西方梨和东方梨两大类。由于砀山酥梨(P.bretschneideri)已完成基因组测序(～512Mb)，因此成为研究梨属植物的模式植物。梨果实发育过程分为坐果期，分裂期，膨大期，成熟期和衰老期。从植物学角度看，梨果实由种子、花托(果肉)、内果皮、中果皮及外果皮组成，是由花托发育而来的假果。梨果皮是果实品质和商品性的重要组成部分，是最能引起注意的果实性状。因此，果皮发育的调控机制也是广大植物学家和育种工作者共同关心的问题，而这需要从广泛而全面的分子层面进行研究。基因表达定量分析是解决复杂的基因网络调控的关键。由于实时荧光定量PCR(Quantitativereverse-transcriptionPCR,qRT-PCR)的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一组梨果皮qRT-PCR内参基因，其特征在于，所述内参基因为NAP1基因、BPS1基因、Alba-like1基因、UBC32基因和ACT6/7/8/9基因；NAP1基因的基因序列如SEQ ID NO：1所示，BPS1基因的基因序列如SEQ ID NO：2所示，Alba-like1基因的基因序列如SEQ ID NO：3所示，UBC32基因的基因序列如SEQ ID NO：4所示，ACT6/7/8/9基因的基因序列如SEQ ID NO：5。/n

【技术特征摘要】
1.一组梨果皮qRT-PCR内参基因，其特征在于，所述内参基因为NAP1基因、BPS1基因、Alba-like1基因、UBC32基因和ACT6/7/8/9基因；NAP1基因的基因序列如SEQIDNO：1所示，BPS1基因的基因序列如SEQIDNO：2所示，Alba-like1基因的基因序列如SEQIDNO：3所示，UBC32基因的基因序列如SEQIDNO：4所示，ACT6/7/8/9基因的基因序列如SEQIDNO：5。


2.根据权利要求1所述的内参基因，其特征在于，所述内参基因为NAP1基因和ACT6/7/8/9基因；NAP1基因的基因序列如SEQIDNO：1所示，ACT6/7/8/9基因的基因序列如SEQIDNO：5所示。


3.如权利要求1所述的内参基因在梨果皮的发育过程、套袋和采后低温贮藏过程中的基因qRT-PCR中的应用。


4.一组如权利要求1所述的内参基因的qRT-PCR引物，其特征在于：NAP1基因的引物序列如SEQIDNO：6和SEQIDNO：7所示；BPS1基因的引物序列如SEQIDNO：8和SEQIDNO：9所示；Alba-like1基因的引物序列如SEQIDNO：10和SEQIDNO：11所示；UBC32基因的引物序列如SEQIDNO：12和SEQIDNO：13所示，ACT6/7/8/9基因的引物序列如SEQIDNO：14和SEQIDNO：15。


5.一种如权利要求1所述的内参基因的筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)利用梨果皮发育过程、套袋和采后低温贮藏相关基因组和转录组数据分析获得候选内参基因；(2)利用转录组数据分析候选内参基因在梨果皮发育、套袋和采后低温贮藏处理中表达稳定性；(3)利用qR...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈建清，陈昌妹，谢桂烽，夏忠恒，袁梦，程翔宇，陈清西，
申请(专利权)人：福建农林大学，
类型：发明
国别省市：福建;35