一种糖苷化合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及化学与医药技术领域，公开一种具有高活性免疫抗癌作用的糖苷类似物，通过在侧链上引入多个羟基，加强糖苷化合物与受体蛋白间的氢键相互作用，提高糖苷化合物与CD1d的亲和力，提高其免疫抗癌活性。本发明专利技术还公开了其制备方法及其在免疫抗癌中的应用。动物实验表明，本发明专利技术的糖苷化合物能够增加血液中的淋巴细胞和单核细胞含量，抑制肿瘤的大小和/或迁移。

A glycoside compound and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种糖苷化合物及其制备方法和应用
本专利技术涉及化学与医药
，尤其涉及一种具有抗癌作用的糖苷类似物、其制备方法及其在免疫抗癌中的应用。
技术介绍
以KRN7000为代表的α-半乳糖神经酰胺已经表现出较好的抗肿瘤活性，其作用机理主要是通过形成呈递细胞CD1d蛋白/KRN7000/NKT细胞表面TCP蛋白的三元复合物来激活NKT细胞，达到分泌Th1或Th2类细胞因子以实现免疫驱动下的抗肿瘤活性。目前研发出的许多KRN7000衍生物能在生物体内同时激活Th1和Th2类细胞因子，但它们之间的拮抗作用又限制了KRN7000的临床应用。因此，设计合成新型糖苷类化合物以达到选择性激活T细胞、提高其临床应用的潜力，是相关科研工作者追求的重要目标。
技术实现思路
我们基于呈递细胞CD1d蛋白/KRN7000/NKT细胞表面TCP蛋白三元复合物蛋白结晶结构的分析，发现在糖苷化合物与蛋白相互作用的区域内，除了疏水基团外，还有大量的亲水基团，为此，针对已发表化合物活性较差的不足，我们通过在脂肪链上引入羟基以增强它和CD1d蛋白的结合能力，期望这样的改变能改善新化合物的免疫作用机制。本专利技术的技术方案如下：本专利技术提供了一种糖苷化合物，具有化合物1所述结构：本专利技术还包括上述糖苷化合物用于制备疫苗的药物用途。优选的，所述疫苗在接种后，增加血液中的淋巴细胞和单核细胞含量。本专利技术还包括上述糖苷化合物用于制备抑制肿瘤的药物用途。优选的，所述抑制肿瘤包括抑制肿瘤的大小和/或迁移。本专利技术还提供了一种药物组合物，包括上述糖苷化合物和药学上可接受的赋形剂。本专利技术还包括上述药物组合物在制备在哺乳动物中刺激免疫系统的药物的用途，其中调整所述糖苷化合物，以向哺乳动物给药有效量的药物组合物。优选的，所述哺乳动物患有癌症。进一步优选的，所述癌症为乳腺癌。本专利技术还提供了上述糖苷化合物的制备方法，包括以下步骤：(1)从化合物2出发，通过Dess-Martin氧化伯羟基成醛，再通过Wittig反应延长碳链到设计的含有不饱和双键的碳链长度，得到化合物3；对化合物3中的双键进行Sharpless双羟基化，接着通过与苯甲醛的缩合反应得到化合物6；(2)植物鞘氨醇与化合物6在缩合剂存在条件下，通过胺基与羧基的酰胺化反应，向其产物中先加入叔丁基二苯基氯硅烷，然后再加入苯甲酰氯，区分开伯羟基和两个仲羟基形成化合物8，用氟化氢脱出TBDPS基团，并与糖基供体10发生糖基化反应，产物经甲醇钠处理脱除苯甲酰基Bz，最后催化氢化脱除苄基Bn，得到目标化合物1，即为权利要求1所述糖苷化合物；现有技术相比，本专利技术具有以下优点：本专利技术的新型糖苷化合物，具有化合物1所示结构。本专利技术通过在侧链上引入多个羟基，加强糖苷化合物与受体蛋白间的氢键相互作用，提高糖苷化合物与CD1d的亲和力，提高其免疫抗癌活性。通过动物实验可知，本专利技术的糖苷化合物表现出与临床环磷酰胺相当的抑制淋巴瘤的效率，联合实验环磷酰胺与化合物的抑瘤效果更好。本专利技术的糖苷化合物还能增加小鼠血液中的淋巴细胞及单核细胞的数量，说明本专利技术糖苷化合物可以刺激哺乳动物的免疫系统，进而产生强烈的免疫抑制肿瘤的能力。通过小鼠肺转移模型实验，表明本专利技术的糖苷化合物能够抑制肿瘤细胞的迁移，抑制强度与抑制迁移的能力成正比。相对于已知KRN7000类似物而言，本专利技术化合物1所示的糖苷化合物具有更高的免疫抗癌活性，且能抑制肿瘤的转移。本专利技术首次利用化学方法合成了化合物1所示糖苷化合物。从已知化合物2出发制备邻二羟基化合物6，再通过植物鞘氨醇与邻二醇化合物6经过多步反应制备得到目标化合物1。本专利技术糖苷化合物的制备方法总产率高、反应过程容易控制、常规处理简单、易于大量制备。附图说明图1为糖苷化合物1的结构式。图2为化合物处理后小鼠血相的淋巴细胞数。图3为化合物处理后小鼠血相的单核细胞数。图4为乳腺癌模型细胞4T1-LG12向小鼠肺部迁移的结果。图5为化合物处理对小鼠乳腺肿瘤的抑制效果。具体实施方式下面对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术为了改善已发表的KRN7000及其衍生物活性较差的不足，提供了一种新型的糖苷化合物，该化合物具有以下结构：本专利技术通过在脂肪链上引入羟基，增强了糖苷化合物和CD1d蛋白的结合能力，提高了糖苷化合物的免疫活性和抗肿瘤活性。动物实验表明，本专利技术的糖苷化合物能够增加血液中的淋巴细胞和单核细胞含量，抑制肿瘤的大小和/或迁移。由于本专利技术的糖苷化合物可预期用于疫苗或用于治疗例如各种癌症的病症，还期望含有上述糖苷化合物的药物组合物。因此本专利技术还涉及含有上述糖苷化合物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。该药物组合物可使用本领域技术人员所公知的方法制备，本专利技术对此不做限定。本专利技术对该药物组合物的剂型及给药方式均不做限定，本领域技术人员根据已知药物制作技术及应用范围做出调整。本专利技术药物组合物剂型包括但不限于片剂、丸剂、锭剂、胶囊、酏剂、悬浮剂、注射剂、糖浆、贴片、可咀嚼胶体等。组合物中的赋形剂根据药物剂型种类的需求选择合适的赋形剂，如片剂中的黏合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂；中药丸剂中的酒、醋、药汁等；液体制剂中的防腐剂、抗氧剂、矫味剂、芳香剂、助溶剂、乳化剂、增溶剂、渗透压调节剂、着色剂等。本专利技术药物组合物的给药方式包括但不限于肠胃外给药，如通过静脉内、肌内、鞘内或皮下注射给药；直肠给药、经皮给药等。本专利技术还涉及在哺乳动物中刺激免疫系统的方法，所述方法包括向哺乳动物给药有效量的本专利技术糖苷化合物。在一个实施方案中，有效量的糖苷化合物以药物组合物的形式给药到哺乳动物。在一个实施方案中，哺乳动物为人。在一个实施方案中，哺乳动物患有癌症。本专利技术还涉及上述糖苷化合物的制备方法，通过以下两个合成步骤完成：(1)制备邻二羟基化合物6：以下合成图描述了制备邻二羟基化合物6的合成方法：其中，上述合成方法中的试剂与反应条件：(a)(i)Dess-Martin试剂，二氯甲烷；(ii)C14H27Ph3P+Br-(十四烷基季磷盐)，LHMDS(六甲基二硅基氨基锂),四氢呋喃；(b)AD-Mix-β,对甲磺酰胺；(c)2,2-二甲氧基甲苯,四氢呋喃；(d)氢氧化锂，四氢呋喃-甲醇-水体系。(2)制备糖苷化合物1：以下合成图描述了制备糖苷化合物1的合成方法：其中，上述合成方法中的试剂与条件：(a)(i)6,EDCI(1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐)，HOBt(1-羟基苯并三唑)，DIPEA(N,N'-二异丙基乙胺)，DMF(二甲基甲酰胺本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种糖苷化合物，具有化合物1所述结构：/n

【技术特征摘要】
1.一种糖苷化合物，具有化合物1所述结构：





2.权利要求1所述糖苷化合物用于制备疫苗的药物用途。


3.根据权利要求2所述的用途，所述疫苗在接种后，增加血液中的淋巴细胞和单核细胞含量。


4.权利要求1所述糖苷化合物用于制备抑制肿瘤的药物用途。


5.根据权利要求4所述的用途，所述抑制肿瘤包括抑制肿瘤的大小和/或迁移。


6.一种药物组合物，包括权利要求1所述糖苷化合物和药学上可接受的赋形剂。


7.权利要求6所述药物组合物在制备在哺乳动物中刺激免疫系统的药物的用途，其中调整所述糖苷化合物，以向哺乳动物给药有效量的药物组合物。


8.根据权利要求7所述的用途，所述哺乳动物患有癌症。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：程薇颖，程青格，
申请(专利权)人：郑州市御合源生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41