具有降血糖活性的桑黄酚类提取物及其制备与应用制造技术

本发明专利技术涉及一种具有降血糖活性的桑黄酚类提取物，及其制备方法和应用。本发明专利技术采用超声波乙醇水溶液辅助提取、溶剂分部萃取获得了一个酚类纯度较高(≥70％)的乙酸乙酯提取物，主要由osmudacetone、hispidin、davallialactone、2,5‑bis(4,7‑dihydroxy‑8‑methyl‑2‑oxo‑2H‑chromen‑3‑yl)cyclohexa‑2,5‑diene‑1,4‑dione、hypholomine B和inoscavin A等物质组成。本发明专利技术桑黄酚类提取物酚类含量高，对α‑糖苷酶具有显著的抑制作用，并对HepG

【技术实现步骤摘要】
具有降血糖活性的桑黄酚类提取物及其制备与应用(一)
本专利技术涉及一种具有降血糖活性的桑黄酚类提取物，及其制备方法和应用。(二)
技术介绍
糖尿病(diabetesmellitus，DM)是一种因体内胰岛素绝对或相对分泌不足而引起的碳水化合物、脂肪、蛋白质、水、电解质紊乱的慢性内分泌代谢疾病，与遗传因素以及多种环境因素相关。其典型表现以“三多一少”——多饮、多食、多尿、消瘦，和血糖增高为特征。糖尿病(diabetesmellitus，DM)是一种因体内胰岛素绝对或相对分泌不足而引起的碳水化合物、脂肪、蛋白质、水、电解质紊乱的慢性内分泌代谢疾病，与遗传因素以及多种环境因素相关。其典型表现以“三多一少”——多饮、多食、多尿、消瘦，和血糖增高为特征。随着现代社会发展，不良生活和工作方式增多，人口老龄化不断加剧，近几十年来，世界上糖尿病的发病率一直呈迅速上升趋势。据国际糖尿病联盟(IDF)的统计数据，2019年全球约4.63亿20-79岁成人患糖尿病；预计到2030年，糖尿病患者会达到5.784亿；预计到2045年，糖尿病患者会达到7.002亿。而糖尿病患者人数，中国排名第一，总人数约为1.164亿人，高血糖可以导致心脏病、高血压、肾衰竭、失明、下肢溃疡或坏死等多种糖尿病并发症，从而使患者残疾或死亡，已经成为仅次于肿瘤和心血管疾病的“第三号杀手”，2019年我国因糖尿病及其并发症死亡的人数高达83万，在我国相关的医疗费用每年数以千亿计。目前，对于I型糖尿病的治疗，研究方向是开发给药方便、有效的胰岛素制剂及代用品。而对于II型糖尿病的治疗，不能单存依靠补充胰岛素，还需口服降糖药如胰岛素促泌剂(如磺酰脲类)、胰岛素增敏剂(如噻唑烷二酮类)、葡萄糖代谢增强剂(如双胍类)和α-葡萄糖苷酶抑制剂(如目前临床上已应用的阿卡波糖Acarbose、伏格列波糖Voglibose和米格列醇Miglitol，其主要降糖机理是对小肠α-葡糖苷酶起一种竞争性、剂量依赖性的抑制作用，从而阻止不易吸收的多糖化合物转变成易吸收的单糖)。这些化学降糖类药物尽管见效较快，但对肝、肾等脏器损害较大，某些降血糖药物可使血糖降至正常范围以下，甚至有发生低血糖的危险，且对于糖尿病患者起到治标不治本的作用。而纯天然提取物一般具有作用温和、毒副作用小等优点，开发利用潜力巨大。桑黄(phellinusigniarius)，又称桑黄菇、桑臣、胡孙眼、桑耳，是担子纲目、多孔菌目、多孔菌科、针层孔属的药用真菌。素有“森林黄金”之称的野生桑黄在我国分布广泛，尤其在华北、东北、西北、云南、四川等地较多。1000多年前，我国第一部本草《神农本草经》就有桑黄的记载，李时珍的《本草纲目》对桑黄的产地、药性、功能等有明确的记载。桑黄兼性寄生，以腐生为主，是高温性药用真菌，喜寄生在杨柳桑白桦、栋、样等阔叶树的枯树枝上，而造成心材白腐。桑黄菌由孢子萌发生成菌丝，菌丝聚集形成菌丝体，菌丝体构成子实体，子实体又可以产生抱子，不断繁衍生桑黄味微苦，但具有利五脏，排毒，止血，活血等功效，其中子实体入药最《药性本草》中有：“治女子崩中带下，月闭血凝，产后血凝，男子玄癖”等的记载。现代研究表明，桑黄具有提高免疫力、抗肿瘤、抗氧化、保护肝脏、抗炎、抗菌、抗突变、降血糖及抗糖尿病等功效。其主要化学成分是多糖，还含有脂肪酸、甾醇、三萜、黄酮、芳香酸、黑色素及酚类等物质。最近几年，桑黄子实体的规模化人工栽培获得成功，弥补了野生桑黄资源稀缺的问题。在桑黄降血糖及抗糖尿病方面，目前已有的文献和专利基本都集中于桑黄多糖的成分。如张暴研究表明，桑黄菌丝体多糖能降低链脲佐霉素所导致的糖尿病小鼠的血糖浓度。桑黄菌丝体多糖高、中、低剂量组对糖尿病小鼠的降糖率分别是0.92％，0.90％和1.99％，阳性对照组的降糖率是3.31％(张暴，桑黄菌丝体多糖降血糖、保护肝功能生物活性研究，东北师范大学硕士论文，2007)。廖尊胜研究表明，桑黄菌丝多糖对四氧嘧啶小鼠高血糖模型具有较好的降血糖效果(廖尊胜，桑黄菌质多糖的分离纯化及降血糖作用的研究，福建农林大学硕士学位论文，2013)。张雪丹研究表明，对固态发酵法得到的桑黄菌丝体进行热水提取及脱蛋白，并对提取物进行灌胃，能有效调节I型糖尿病小鼠的血糖水平，改善其高血糖症状(张雪丹，桑黄菌丝提取物及壳寡糖降血糖活性的研究，华中农业大学硕士学位论文，2015)。宮云鹤研究表明，灌胃桑黄菌丝体多糖，能降低糖尿病小鼠的血糖，并提高耐糖性(宮云鹤，桑黄多糖的抗氧化性及降血糖作用研究，边大学硕士学位论文，2017年)。吉林的史得君等人，研究发现高剂量的桑黄多糖提取物有助于改善链脲佐菌素(STZ)建模的I型糖尿病(DM)小鼠(史得君等，桑黄多糖对I型糖尿病小鼠模型的影响，延边大学农学学报，2017)。福建的黄倩等研究发现桑黄多糖可调节MMP-2/TIMP-2平衡，减轻糖尿病肾病小鼠肾间质纤维化(黄倩等，桑黄多糖通过P311/TGF-β1/Snail1通路抗糖尿病小鼠肾间质纤维化的研究，中药药理与临床，2019)。而在酚类方面，上海的张超等人研究结果表明从鲍姆桑黄孔菌大米发酵菌丝体中分离出的原儿茶醛、柚皮素和黄芩素3种化合物对HepG2细胞葡萄糖消耗量具有明显的促进作用(张超等，鲍姆桑黄孔菌化合物对HepG2细胞葡萄糖消耗的影响及其作用机制的研究，菌物学报，2016)。刘斌等人的专利技术“一种桑黄多糖与中药复方降血糖口服液及其制备方法”，显示桑黄固体发酵菌丝体多糖与中药复方降血糖复合物具有很强的降血糖效果(申请公布号，CN103405639A)。张满锦的专利技术“一种药物组合在制备治疗和预防高血糖药物”，提供了一种药物组合在制备治疗和预防高血糖药物中的应用，该药物组合物含北五味子、桑黄子实体、葛根混合或提取而得(申请公布号，CN104383084A)。彭友良的专利技术“一种防治糖尿病的药用真菌配方及其制备方法”，声明一种药用真菌配方可以防治II型糖尿病，配方包括：桦褐孔菌、桑黄、云芝、紫灵芝、平盖灵芝、松针层孔菌和薄树芝(申请公布号CN106389483A)。综合以上的桑黄降血糖及抗糖尿病文献专利方面，主要集中在桑黄多糖方面，且提取的均是粗多糖混合物，具体的成分及结构不清，而且大分子的多糖精细结构的表征在目前仍有难度。仅有一篇酚类，表明原儿茶醛、柚皮素和黄芩素3种化合物对HepG2细胞葡萄糖消耗量具有明显的促进作用，但是要获得这三种纯品化合物，成本较高。(三)
技术实现思路
本专利技术目的是针对现有技术的不足，提供一种具有体外降血糖功效的桑黄酚类高含量提取物，及其制备方法和应用。本专利技术采用的技术方案是：一种具有降血糖活性的桑黄酚类提取物，其酚类纯度≥70％，由如下方法获得：(1)桑黄固体栽培子实体于40～60℃真空干燥，粉碎过筛至40～80目，按照1:10～1:30固液比加入60％～80％乙醇水溶液，超声辅助提取1～3次，每次20～40min，离心，取上清液；(2)步骤(1)上清液本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有降血糖活性的桑黄酚类提取物，其酚类纯度≥70％，由如下方法获得：/n(1)桑黄固体栽培子实体于40～60℃真空干燥，粉碎过筛至40～80目，按照1:10～1:30固液比加入60％～80％乙醇水溶液，超声辅助提取1～3次，每次20～40min，离心，取上清液；/n(2)步骤(1)上清液旋转蒸发，浓缩，冷冻干燥，得到桑黄乙醇提取物，加纯净水超声悬混，再加入同等体积的石油醚30～60℃萃取1～3次，收集石油醚萃取物，剩余相加入同等体积乙酸乙酯萃取1～3次，合并收集乙酸乙酯萃取相；/n(3)收集步骤(2)乙酸乙酯萃取相，真空旋转蒸发浓缩至无有机溶剂味，冷冻干燥，即得所述具有降血糖活性的桑黄酚类提取物。/n

【技术特征摘要】
1.一种具有降血糖活性的桑黄酚类提取物，其酚类纯度≥70％，由如下方法获得：
(1)桑黄固体栽培子实体于40～60℃真空干燥，粉碎过筛至40～80目，按照1:10～1:30固液比加入60％～80％乙醇水溶液，超声辅助提取1～3次，每次20～40min，离心，取上清液；
(2)步骤(1)上清液旋转蒸发，浓缩，冷冻干燥，得到桑黄乙醇提取物，加纯净水超声悬混，再加入同等体积的石油醚30～60℃萃取1～3次，收集石油醚萃取物，剩余相加入同等体积乙酸乙酯萃取1～3次，合并收集乙酸乙酯萃取相；
(3)收集步骤(2)乙酸乙酯萃取相，真空旋转蒸发浓缩至无有机溶剂味，冷冻干燥，即得所述具有降血糖活性的桑黄酚类提取物。


2.制备权利要求1所述的桑黄酚类提取物的方法，所述方法包括：
(1)桑黄固体栽培子实体于40～60℃真空干燥，粉碎过筛至40～80目，按照1:10～1:30固液比加入60％～80％乙醇水溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨开，张酥，蔡铭，关荣发，孙培龙，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33