检测Lasiodiplodia paraphysoides的LAMP引物及试剂盒制造技术

本发明专利技术提供一套检测蓝莓枝枯病病菌(Lasiodiplodia paraphysoides)的LAMP引物及试剂盒。所述LAMP引物包括外侧正、反向引物以及内侧正、反向引物，它们的核苷酸序列如SEQ ID NO：1‑4所示。本发明专利技术将LAMP引物恒温扩增技术用于Lasiodiplodia paraphysoides病菌的快速检测，可从发病植物组织及苗木中复杂的病原菌环境准确地检测出该致病菌。该方法的特异性、灵敏度及可重复性均较常规PCR方法更高，对Lasiodiplodia paraphysoides早期预警、疫区的病原监测等方面具有重要意义；同时可避免高昂的仪器投入，便于基层推广使用。

Lamp primers and kits for the detection of Lasiodiplodia paraphysoides

【技术实现步骤摘要】
检测Lasiodiplodiaparaphysoides的LAMP引物及试剂盒
本专利技术属于微生物检测
，具体地说，涉及一种检测Lasiodiplodiaparaphysoides的LAMP引物及试剂盒。
技术介绍
葡萄座腔菌科真菌(Botryosphaericeae)侵染引起的蓝莓茎溃疡病(BlueberryStemBlight)，目前在我国主要蓝莓产区已有发生报道，对中国蓝莓产业健康发展带来严重危害。该菌从蓝莓植株的伤口或自然孔口进行侵染，导致皮层和韧皮部的枯死在田间引起蓝莓枝条枯萎、木质部坏死及植株死亡等症状。目前，葡萄座腔菌科中已有多种能引发此病害(Botryosphaeriacortices，Botryosphaeriadothidea，Fusicoccumaesculin，Lasiodiplodiachinesis，Lasiodiplodiaparaphysoides，Lasiodiplodiatheobromae，Lasiodiplodiavaccinii，Neofusicoccumarbuti，Neofusicoccum本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于检测蓝莓枝枯病病菌(Lasiodiplodia paraphysoides)的LAMP引物，其特征在于，所述LAMP引物为：/n外侧正向引物F3：5'-TCCGTCCCTCGGACAAG-3’；/n外侧反向引物B3：5'-TCACCGGGGACACCCT-3’；/n内侧正向引物FIP：5'-TCCACACGACCGACGGGGACCCCTCCAGGACGTCTAC-3’；/n内侧反向引物BIP：5'-GGTGTTATCAAGGCGGGCATGGCATCTCGACGGACTTGACC-3’。/n

【技术特征摘要】
1.用于检测蓝莓枝枯病病菌(Lasiodiplodiaparaphysoides)的LAMP引物，其特征在于，所述LAMP引物为：
外侧正向引物F3：5'-TCCGTCCCTCGGACAAG-3’；
外侧反向引物B3：5'-TCACCGGGGACACCCT-3’；
内侧正向引物FIP：5'-TCCACACGACCGACGGGGACCCCTCCAGGACGTCTAC-3’；
内侧反向引物BIP：5'-GGTGTTATCAAGGCGGGCATGGCATCTCGACGGACTTGACC-3’。


2.含有权利要求1所述LAMP引物的检测试剂或试剂盒。


3.蓝莓枝枯病病菌(Lasiodiplodiaparaphysoides)检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1所述LAMP引物，还包含dNTPs、BstDNA聚合酶、反应缓冲液、标准阳性模板中的至少一种。


4.权利要求1所述LAMP引物、权利要求2所述检测试剂或试剂盒，或权利要求3所述检测试剂盒在检测蓝莓枝枯病病菌(Lasiodiplodiaparaphysoides)中的应用。


5.蓝莓枝枯病病菌(Lasiodiplodiaparaphysoides)检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)提取待测样品中的DNA；
2)以步骤1)中提取的DNA为模板，利用权利要求1所述LAMP引物进行LAMP扩增反应；
3)扩增结果判定。


6.根据权利要求5...

【专利技术属性】
技术研发人员：张英，王宇，
申请(专利权)人：北京林业大学，
类型：发明
国别省市：北京;11