叶斑病致病菌Phoma exigua的检测引物、检测方法及其应用技术

本发明专利技术公开了叶斑病致病菌Phoma exigua的检测引物、检测方法及其应用，所述的引物如SEQ ID NO.1～2所示。通过提出目标基因组DNA，利用通用引物进行第一轮扩增，利用上述引物进行第二轮扩增，凝胶电泳检测，存在138bp的DNA特异性条带，则确定所检测样品中存在叶斑病致病菌Phoma exigua。将该引物用于检测Phoma exigua引起的竹节参叶斑病，证明其具有高效、快速、精准，灵敏的特点，有效提高了检测Phoma exigua引起竹节参叶斑病的便捷性、及时性和准确度。

Primer, detection method and application of Phoma exigua

【技术实现步骤摘要】
叶斑病致病菌Phomaexigua的检测引物、检测方法及其应用
本专利技术属于生物
，具体涉及叶斑病致病菌Phomaexigua的检测引物、检测方法及其应用。
技术介绍
竹节参(学名：Panaxjaponicus(T.Nees)C.A.Mey.)是五加科人参属多年生药用植物。分布于湖北、四川、湖南、江西、贵州、陕等省的高山地区。其性温，味甘、微苦，归肝经、脾经、肺经。具有抗炎、延缓衰老、降血糖作用，还有拟肾上腺皮质激素样作用。该药材效益高，目前在全国多地有人种植，但是由Phomaexigua(申请者前期已经在NCBI递交该致病菌ITS基因序列，GenBank登录号为KP284148)导致的竹节参叶斑病造成叶片腐烂，严重影响光合作用，最终可导致整株枯死，对竹节参产量和品质造成较大影响，申请人在湖北恩施竹节参基地调查发现，该菌导致的叶斑病发病率高达95％(You,etal.Plantdisease.2016,100(2):534)，目前由于该病害被误认为是炭疽菌导致的炭疽病，同时缺乏中药材植物保护专业人才的指导，在竹节参各大产区存在乱施滥用各本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种叶斑病致病菌Phoma exigua的检测引物，其特征在于，所述的引物如SEQ IDNO.1～2所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种叶斑病致病菌Phomaexigua的检测引物，其特征在于，所述的引物如SEQIDNO.1～2所示。


2.根据权利要求1所述的一种叶斑病致病菌Phomaexigua的检测引物，其特征在于，还包括通用引物，所述的通用引物如SEQIDNO.3～4所示。


3.一种快速检测叶斑病致病菌Phomaexigua的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)提取竹节参叶斑病致病菌Phomaexigua基因组DNA；
2)利用通用引物ITS1/ITS4进行第一轮PCR扩增；
3)将第一轮扩增产物稀释50倍，作为模板，利用特异引物ZJSF/ZJSR进行第二轮PCR扩增；
4)凝胶电泳检测，于凝胶成像系统下拍照检测，存在138bp的DNA特异性条带，则确定所检测样品中存在竹节参叶斑病致病菌。


4.根据权利要求3所述的一种快速检测叶斑病致病菌Phomaexigua的方法，其特征在于，所述的通用引物ITS1/ITS4如SEQIDNO.3～4所示。


5.根据权利要求3所述的一种快速检测叶斑病致病菌Phomaexigua的方法，其特征在于，所述的特异引物ZJSF/ZJSR如SEQIDNO.1～2所示。

【专利技术属性】
技术研发人员：游景茂，段媛媛，唐涛，王帆帆，郭杰，郭晓亮，
申请(专利权)人：湖北省农业科学院中药材研究所，
类型：发明
国别省市：湖北;42