三叶因子3及三叶因子3表达促进剂在制备预防治疗肝损伤药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供三叶因子3及三叶因子3表达促进剂在制备预防和/或治疗肝损伤药物中的应用。肝损伤包括非酒精性脂肪性肝炎、病毒性肝炎、药物性肝损伤、酒精性肝病等造成的肝损伤。本发明专利技术研究发现非酒精性脂肪性肝炎患者血清TFF3含量较健康成人降低，并与肝功能负相关，提示TFF3有保肝作用。进一步研究发现，TFF3可减轻肝细胞损伤、减轻炎症反应，并促进肝细胞增殖修复。过表达TFF3小鼠诱导的肝损伤程度较对照显著减轻。因此，可应用TFF3进行预防和治疗多种原因导致的肝损伤。

Application of trefoil factor 3 and trefoil factor 3 expression promoter in preparation of drugs for prevention and treatment of liver injury

【技术实现步骤摘要】
三叶因子3及三叶因子3表达促进剂在制备预防治疗肝损伤药物中的应用
本专利技术属于生物医学治疗领域，具体涉及三叶因子3(TFF3)基因在制备预防和治疗酒精性脂肪性肝炎、病毒性肝炎、药物性肝损伤、酒精性肝病等造成的肝损伤的药物中的用途。
技术介绍
肝脏是腹腔内最大的实质性器官，担负人体的重要生理功能。肝损伤为多种肝脏疾病的病变结果，其中代谢性、病毒性、酒精性、物理性、化学性、环境性等导致的肝损伤为目前严重的多发疾病。肝脏损害持续，可致细胞弥漫性变性和坏死、肝纤维化出现，肝脏肿胀、渗出和充血，如不及时治疗，可造成肝硬化、肝衰竭、甚至肝癌等终末期肝脏病。我国每年有近28万人死于肝硬化、肝癌等肝脏相关的疾病，给社会带来极大负担。研究发现，炎症因子和氧化应激是肝损伤中的重要机制。持续病毒感染和内毒素血症是单核/巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β的强刺激剂，TNF-α除可诱导肝脏Schwartzman反应和免疫病理反应外，尚可直接介导肝细胞凋亡，IL-1β可增加肝细胞对TNF-α的敏感性，加重TNF-α介导的肝损害。肝损伤时细胞色素P4502E1(CytochromeP4502E1,CYP2E1)增加促进氧自由基产生，可氧化细胞内脂质和蛋白，导致肝细胞结构与功能的破坏。丙二醛(Malondialdehyde,MDA)是脂质过氧化产物，其增高与脂质过氧化物清除剂减少有关，其中最主要的是超氧化物歧化酶(SuperoxideDismutase,SOD)。SOD的功能不足导致自由基清除障碍，是细胞损伤的重要原因之一。>目前临床上针对各种肝病，除病因治疗，多同时进行减轻肝损伤的保肝降酶治疗，以改善其临床症状，减慢疾病进展。保肝药是指具有肝脏保护功能、促进肝细胞再生、增强肝脏解毒功能、提高机体免疫力等功效的药物，其种类繁多，但常用的保肝药大致可以分为解毒类、促肝细胞再生类、促进能量代谢类、利胆类、中草药及其提取物等。随着医药科技的飞速发展，尽管治疗肝损伤的药物已经研究报道很多，但是一些研究表明，有些抗肝损伤的药物还会不可避免的产生生物毒性，对生命造成危险，况且靶向性给药也不强。研究开发具有良好治疗作用的肝损伤药物是非常迫切。三叶因子3(trefoilfactorfamily3,TFF3)又名肠三叶因子(intestinaltrefoilfactor，ITF)。TFF3是一种分泌型小分子多肽，生理条件下主要在胃肠道杯状细胞表达。TFF3在保持胃肠道黏膜完整性、促进胃肠道黏膜修复中起到重要的作用，具有黏膜保护、促进上皮修复、抑制炎症反应、调节细胞增殖、迁移和细胞凋亡等功能。我们分析了非酒精性脂肪性肝炎临床患者与对照组血清TFF3的表达水平及与肝损伤的相关性，说明其保肝重要性。另外，通过体外和体内实验研究TFF3核酸或肽在非酒精性脂肪性肝炎、急性肝损伤动物模型中对肝脏炎症、凋亡、组织修复的作用及相关调控信号通路，以及促进TFF3表达的降脂颗粒、小檗碱、甘草酸在治疗肝损伤中的作用,以期发现新的肝损伤防治药物。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于，提供一类治疗肝损伤的新的药物，为肝损伤的治疗提供新的方案。为解决上述技术问题，本专利技术提供三叶因子3在制备预防和/或治疗肝损伤药物中的应用。具体的，所述肝损伤包括非酒精性脂肪性肝炎、病毒性肝炎、药物性肝损伤、酒精性肝病等造成的肝损伤。肝细胞过表达TFF3基因或直接应用TFF3小分子多肽可减轻肝细胞损伤和炎症反应，并促进肝细胞增殖修复。所述三叶因子3在制备预防和/或治疗肝损伤药物中的应用，包括直接使用三叶因子3制备成预防和/或治疗肝损伤的药物。所述三叶因子3在制备预防和/或治疗肝损伤药物中的应用，包括使用携带三叶因子3基因的载体制备成预防和/或治疗肝损伤的药物。所述载体包括质粒、噬菌体和病毒等形式。所述三叶因子3在制备预防和/或治疗肝损伤药物，包括依据TFF3基因序列或TFF3分子结构获得的具有预防和/或治疗肝损伤的效果的化合物。所述药物的有效活性成分可以是核酸或蛋白质或天然化合物、化学小分子，对于化合物的来源、性质及机理无特别限制。其中，三叶因子3是一种分泌型小分子多肽，其来源包括人、牛、猪、大鼠、小鼠来源或其重组体。为解决上述技术问题，本专利技术还提供三叶因子3表达促进剂在制备预防和/或治疗肝损伤药物中的应用。具体的，所述三叶因子3表达促进剂是指能够上调三叶因子3表达水平的试剂。一种优选的实施方式为，所述三叶因子3表达促进剂选自小檗碱。一种优选的实施方式为，所述三叶因子3表达促进剂选自甘草酸。一种优选的实施方式为，所述三叶因子3表达促进剂选自中药复方降脂颗粒(JZ)。具体的，该中药复方降脂颗粒的组分为绞股蓝、丹参、虎杖、茵陈、荷叶。本专利技术所述的TFF3防治肝损伤的给药方式包括口服、静脉注射，可单独给药或联合其它治疗。本专利技术是针对现有技术的上述不足，依据专利技术人对TFF3基因在人和小鼠肝脏损伤疾病中的变化、对肝细胞、巨噬细胞生物学功能的调控作用及其对肝损伤的防治效应的研究，提出TFF3针对肝损伤的预防和治疗的一种新用途。本专利技术首先检测分析临床NASH患者与对照组血清TFF3的表达水平及与肝损伤的相关性，以期发现新的NASH诊疗靶标。通过小鼠肝组织RNAsequence研究发现，在非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠肝组织中TFF3水平较正常饮食小鼠下降，中药复方降脂颗粒(JZ)、小檗碱(BBR)、甘草酸(Glycyrrhizin)干预小鼠肝组织导致TFF3水平显著上调，改善肝损伤，提示TFF3与NASH发生发展及药物降脂颗粒、小檗碱、甘草酸苷改善NASH的药效机制相关。通过上调TFF3表达或直接用重组TFF3肽可减轻肝细胞炎症反应和细胞凋亡，显著改善肝细胞损伤。附图说明图1降脂颗粒(JZ)上调NASH小鼠肝组织TFF3表达水平治疗小鼠肝损伤的作用图，JZ(与对照比较，*P<0.05，与模型组比较，#P＜0.05)。图2为小檗碱、甘草酸上调小鼠肝组织TFF3表达改善肝损伤的作用图(与对照比较，*P<0.05，与模型组比较，#P＜0.05)。图3为重组TFF3肽(rhTFF3)减少棕榈酸(PA)诱导的肝细胞凋亡图(与对照比较，***P<0.001，与模型组比较，##P＜0.01)。图4为重组TFF3肽(rhTFF3)抑制棕榈酸(PA)诱导的人肝细胞炎症反应图(与对照比较，*P<0.05,与模型组比较，#P＜0.05)。图5为重组TFF3肽(rhTFF3)促进肝细胞增殖图(与对照比较，*P<0.05)。图6为重组TFF3肽(rhTFF3)减轻LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7炎症反应图(与对照比较，***P<0.01，与模型组比较，###P＜0.001)图7为TFF3在预防小鼠急性肝损伤中的作用图(与对照比较，*P<0.05)。具体实施方式本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.三叶因子3在制备预防和/或治疗肝损伤药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.三叶因子3在制备预防和/或治疗肝损伤药物中的应用。


2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肝损伤是指非酒精性脂肪性肝炎、病毒性肝炎、药物性肝损伤、或酒精性肝病造成的肝损伤。


3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用包括直接使用三叶因子3小分子多肽制备成预防和/或治疗肝损伤的药物。


4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用包括使用携带三叶因子3基因的载体制备成预防和/或治疗肝损伤的药物。


5.三叶因子3表达促进剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋海燕，郑培永，张一凡，杨丽丽，崔恬冰，李怡萍，张春蕾，
申请(专利权)人：上海中医药大学附属龙华医院，
类型：发明
国别省市：上海;31