搭载核酸的单元型聚离子复合物制造技术

本发明专利技术提供一种单元型聚离子复合物，该单元型聚离子复合物由特定数量的嵌段共聚物和特定数量的核酸构成，该嵌段共聚物具有聚乙二醇链段和阳离子性聚氨基酸链段，该单元型聚离子复合物中的来自该嵌段共聚物的阳离子性聚氨基酸链段的侧链的正电荷量的总和不被来自该核酸的负电荷量的总和抵消，该核酸的链长为10～50个碱基长度，该聚乙二醇链段的分子量为40×10

Unit type polyion complex carrying nucleic acid

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】搭载核酸的单元型聚离子复合物
本专利技术涉及一种搭载核酸的单元型聚离子复合物和包含该单元型聚离子复合物的组合物。
技术介绍
由于核酸药物可以控制细胞中的各种基因，因此，迫切期望将其应用于目前为止被认为难以治疗的癌症、遗传性疾病等各种疾病。而另一方面，由于核酸分子本身在生物体内的稳定性低，因此，核酸药物需要将其适当地递送至靶细胞的技术。例如，作为核酸递送技术，目前，有利用具有亲水性聚合物链段和阳离子性聚合物链段的嵌段共聚物，通过静电相互作用使核酸与该嵌段共聚物形成复合体(聚离子复合物)的技术。作为通过上述现有技术得到的聚离子复合物，例如，可列举：一种分别由非特定数量的核酸与嵌段共聚物构成的聚离子复合物，在该聚离子复合物中，该嵌段共聚物使亲水性聚合物链段朝向外侧，并且使阳离子性聚合物链段朝向内侧，在包裹核酸的状态下以放射状排列(下面，有时称为“胶束型聚离子复合物”)；以及一种分别由特定数量的核酸与嵌段共聚物构成的聚离子复合物，该聚离子复合物在生物体内例如在血中以稳定的结构单元体存在(下面，有时称为“单元型聚离子复合物”或“uPIC”)(例如，专利文献1)。专利文献1中记载的单元型聚离子复合物具有分别由特定数量的核酸与嵌段共聚物构成的明确的结构，能够提高核酸的血中滞留性。现有技术文献专利文献专利文献1：国际公开第2013/162041号小册子
技术实现思路
专利技术所要解决的技术问题在专利文献1中所记载的单元型聚离子复合物的制备中，需要谨慎地设计核酸和/或嵌段共聚物，以使来自核酸的负电荷与来自嵌段共聚物的正电荷相抵消，使单元型聚离子复合物成为电中性。本申请专利技术是为了解决上述技术问题而完成的，其主要目的在于提供一种能够更简便地设计的单元型聚离子复合物。用于解决技术问题的技术方案根据本专利技术，提供了一种单元型聚离子复合物，该单元型聚离子复合物由特定数量的嵌段共聚物和特定数量的核酸构成，该特定数量的嵌段共聚物具有聚乙二醇链段和阳离子性聚氨基酸链段。在该单元型聚离子复合物中，来自该嵌段共聚物的阳离子性聚氨基酸链段的侧链的正电荷量的总和不被来自该核酸的负电荷量的总和抵消；该核酸的链长为10～50个碱基长度；该聚乙二醇链段的分子量为40×103以上；该嵌段共聚物相对于该核酸的结合常数(Ka)为3.0×105以上。在一种实施方式中，上述单元型聚离子复合物由两分子的上述嵌段共聚物与一分子的上述核酸构成。在一种实施方式中，上述核酸为双链核酸。在一种实施方式中，上述聚乙二醇链段的分子量为60×103以上。在一种实施方式中，上述聚乙二醇链段为双链支链型，各聚乙二醇链的分子量为20×103以上。在一种实施方式中，上述阳离子性聚氨基酸包含鸟氨酸作为构成氨基酸。根据本专利技术的另一方面，提供一种核酸递送用组合物，该核酸递送用组合物包含：上述单元型聚离子复合物；以及能够构成该单元型聚离子复合物的嵌段共聚物，该嵌段共聚物为游离的嵌段共聚物。在一种实施方式中，上述组合物中的来自上述嵌段共聚物的氨基的摩尔浓度与来自上述核酸的磷酸基的摩尔浓度之比(N/P比)为1～20。专利技术的效果在本专利技术中，使用对核酸具有规定的亲和性的嵌段共聚物。令人惊奇的是，由此能够得到即使在电荷不被抵消的状态在也能够提高核酸的血中滞留性的单元型聚离子复合物。这样的单元型聚离子复合物在制备时不需要严格控制来自核酸的负电荷与来自嵌段共聚物的正电荷，因此，能够比现有的单元型聚离子复合物更简便地进行设计。附图说明图1为对本专利技术的一种实施方式中的单元型聚离子复合物的构成进行说明的概略图。图2为表示单元型聚离子复合物的平均粒径和单元型聚离子复合物中的核酸缔合数的图表。图3为表示核酸的血中滞留性的图表。具体实施方式[A.单元型聚离子复合物]根据本专利技术，提供一种单元型聚离子复合物，该单元型聚离子复合物由特定数量的嵌段共聚物和特定数量的核酸构成，该嵌段共聚物具有聚乙二醇链段与阳离子性聚氨基酸链段，该单元型聚离子复合物中的来自嵌段共聚物的阳离子性聚氨基酸链段的侧链的正电荷量的总和不被来自核酸的负电荷量的总和抵消(结果形成没有被电中和的单元型聚离子复合物)。下面，对本专利技术的实施方式进行说明，但本专利技术不限于这些实施方式。需要说明的是，在本专利技术中使用的嵌段共聚物和核酸分别作为聚合反应物得到的情况下，它们会显示一定程度的多分散性。因此，在本说明书中，在提及嵌段共聚物的性能(分子量、聚合度、电荷等)以及核酸的性能(碱基长度、电荷等)时，除非另有说明，否则表示显示多分散性的所有聚合反应物的平均。因而，例如，以实际测得的阳离子性氨基酸残基的聚合度为平均聚合度，基于该平均聚合度来算出嵌段共聚物的电荷量。另外，例如，作为聚乙二醇链段的分子量，能够应用实际测得的平均分子量(例如，数均分子量)。[A-1.第一实施方式][A-1-1.单元型聚离子复合物的整体构成]图1的(a)～(d)为对本专利技术的第一实施方式中的uPIC的一个例子进行说明的概略图。具体而言，图1的(a)为本专利技术中能够使用的嵌段共聚物的概略图，图1的(b)为本专利技术中能够使用的核酸的概略图，图1的(c)为由图1的(a)的嵌段共聚物与图1的(b)的核酸构成的uPIC的概略图，图1的(d)为表示图1的(c)的uPIC中PEG链段的空间扩展的概略图。图1的(a)所示的嵌段共聚物10a、10b分别具有双链支链型的PEG链段13a、14a、13b、14b与阳离子性聚氨基酸链段12a、12b。另外，图1的(b)所示的核酸20a为分别具有两个碱基的突出端的双链核酸。嵌段共聚物10a、10b与核酸20a通过来自阳离子性聚氨基酸链段12a、12b的正电荷与来自核酸20a的负电荷之间的静电相互作用而缔合，由此，形成了uPIC100(图1的(c))。在uPIC100中，嵌段共聚物10a、10b通常能够在核酸20a的主链方向上以彼此相反的朝向排列。由此，能够抑制PEG链段13a、13b、14a、14b的相互重叠所造成的空间位阻。其结果，即使是具有支链型的长链PEG链段的嵌段共聚物，也能够与核酸适当地静电结合而形成uPIC。另外，通过这样进行排列，如图1的(d)所示，四根PEG链段13a、13b、14a、14b能够以覆盖核酸20a的整体的方式进行扩展，能够有助于对核酸20a的高度保护。在一种实施方式中，四根PEG链段能够以使各自的端部成为大致正四面体的顶点的方式定位，核酸能够位于该正四面体内。本实施方式的uPIC只要由特定数量的嵌段共聚物与特定数量的核酸构成即可，不限于上述图示例子的构成。作为本实施方式的uPIC，在生理pH环境(pH＝约7.4)下，来自嵌段共聚物的阳离子性聚氨基酸链段的侧链的正电荷量不会被来自核酸的负电荷量抵消，作为结果，没有被电中和。需要说明的是，在本说明书中，“单元型聚离子复合物中的来自嵌段共聚物的阳离子性聚氨基酸链段的侧链的正电荷量本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种单元型聚离子复合物，其特征在于：/n其由特定数量的嵌段共聚物和特定数量的核酸构成，所述嵌段共聚物具有聚乙二醇链段和阳离子性聚氨基酸链段，/n该单元型聚离子复合物中的来自该嵌段共聚物的阳离子性聚氨基酸链段的侧链的正电荷量的总和不被来自该核酸的负电荷量的总和抵消，/n该核酸的链长为10～50个碱基长度，/n该聚乙二醇链段的分子量为40×10

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170831 JP 2017-1667351.一种单元型聚离子复合物，其特征在于：
其由特定数量的嵌段共聚物和特定数量的核酸构成，所述嵌段共聚物具有聚乙二醇链段和阳离子性聚氨基酸链段，
该单元型聚离子复合物中的来自该嵌段共聚物的阳离子性聚氨基酸链段的侧链的正电荷量的总和不被来自该核酸的负电荷量的总和抵消，
该核酸的链长为10～50个碱基长度，
该聚乙二醇链段的分子量为40×103以上，
该嵌段共聚物对该核酸的结合常数Ka为3.0×105以上。


2.根据权利要求1所述的单元型聚离子复合物，其特征在于：
由两分子的所述嵌段共聚物与一分子的所述核酸构成。


3.根据权利要求1或2所述的单元型聚离子复合物，其特征在于：
所述核酸为双链核酸。


4.根据权利要求1～...

【专利技术属性】
技术研发人员：片冈一则，宫田完二郎，福岛重人，林光太朗，渡边秀美代，金铉琎，藤加珠子，
申请(专利权)人：国立大学法人东京大学，公益财团法人川崎市产业振兴财团，
类型：发明
国别省市：日本;JP