一种麦冬降解提取物及其在制备降糖药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开一种具有更高降糖活性的麦冬降解提取物。制备方法为：药材按液料比5～20，水提取1～3次，每次提取0.5～2小时，滤过，滤液浓缩至原料含量为0.5～2g/ml的浸膏，加乙醇使含醇量达75％～90％，沉淀蒸干得麦冬粗多糖；采用Sevage法脱蛋白纯化；纯化后加水充分溶解至透明状态，按料液比10:1加入2mol/L的酸，降解4～6h，加碱溶液至中性,超滤截留得分子量范围在500－2500之间的降解物，浓缩冷冻干燥，即得。与现有技术相比，本提取物在降血糖方面具有更高的活性，明显优于麦冬粗多糖及其他现有方法获得的麦冬小分子多糖。产率可以高达95％以上，且方法简单易行，可规模化生产。

A degradation extract of Ophiopogon japonicus and its application in the preparation of hypoglycemic drugs

【技术实现步骤摘要】
一种麦冬降解提取物及其在制备降糖药物中的应用
本专利技术涉及一种麦冬降解提取物及其在制备降糖药物中的应用。
技术介绍
麦冬为百合科植物麦冬Ophiopogonjaponicus(L.f)Ker-Gawl的干燥块根。麦冬为传统滋阴中药之一，其味甘、微苦，性微寒，归心、肺、胃经，有养阴生津，润肺清心的功效，用于肺燥干咳、虚痨咳嗽、津伤口渴、心烦失眠、内热消渴、肠燥便秘。麦冬的活性成分主要有甾体皂苷、多糖、高异黄酮类等。药理及临床试验研究表明，从麦冬中提取得到的粗多糖能有效的降低实验性糖尿病小鼠的血糖水平，降低II型糖尿病患者空腹血糖和餐后2h血糖水平，改善胰岛素抵抗。多糖的活性主要由分子质量决定，分子质量较小的多糖活性更高，更容易被人体吸收利用。麦冬多糖常规提取方法为水提醇沉法，得到的麦冬多糖分子质量较大。现有技术制备小分子麦冬多糖采用超滤法，大于10000分子量的多糖被过滤除去，通过多糖的降解，使大分子多糖变成小分子多糖，多糖可以得到充分的利用，并且活性增加。为了用较简便易行的方法得到分子质量较小的低聚麦冬多糖，我们采用化学降解法，进行多糖分子的降解，得到活性更强的小分子多糖。
技术实现思路
本专利技术的目的为提供一种具有更高活性的麦冬降解提取物，且制备方法简单易行。本专利技术的麦冬降解提取物由以下方法制备，包括以下步骤：1.提取麦冬粗多糖：将麦冬药材按液料比5～20，加水提取1～3次，每次提取0.5～2小时，滤过，滤液浓缩至原料含量为0.5～2g/ml的浸膏，加乙醇使含醇量达75％～90％，静置，取沉淀蒸干得到麦冬粗多糖；2.脱蛋白：麦冬粗多糖采用Sevage法脱蛋白纯化；3.降解：将步骤(2)所述麦冬多糖加水充分溶解至透明状态，以麦冬药材的质量计，按料液比10:1加入2mol/L的酸，降解4～6h，加入NaOH溶液中和至中性,超滤截留得分子量范围在500－2500之间的降解物，浓缩冷冻干燥，即得麦冬降解提取物。其中，步骤1工艺优选为：将麦冬药材加水提取2次，液料比10，每次提取2小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至原料含量为1g/ml的浸膏，加乙醇使含醇量达80％，静置过夜；滤去上清液，沉淀蒸干得到麦冬粗多糖。步骤3所述的酸优选盐酸或硫酸，降解温度优选50℃～100℃，最优为50℃。步骤2优选工艺为：取麦冬粗多糖，加蒸馏水溶解，加入三氯甲烷：正丁醇(4：1)，搅拌充分溶解，分液漏斗静置，取下层液于高速离心机5000r/min离心10分钟，除沉淀，清液经乙醇沉淀，干燥，得纯化的麦冬多糖。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术的降解提取物在降血糖方面具有更高的活性，明显优于麦冬粗多糖及其他现有方法获得的麦冬小分子多糖。产率可以高达98％以上，且方法简单易行，可规模化生产。具体实施方式以下通过具体实施例对本专利技术作进一步说明。实施例1：取麦冬药材5000克，加水煎煮提取1次，加水20倍量，煎煮2小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至原料含量为1g/ml的浸膏，加入乙醇至含醇量为80％，放置过夜，沉淀经过滤干燥后得到麦冬粗多糖。麦冬粗多糖溶液采用Sevage法脱蛋白，乙醇沉淀，干燥，得纯化的麦冬多糖；将纯化后的麦冬多糖加水充分溶解至透明状态，加入2mol/L硫酸500ml，50℃降解4个时，加入NaOH溶液中和至中性,降解液经超滤截留分子量10000以下的降解物，超滤液再采用纳滤技术进行浓缩，浓缩液经冷冻干燥，即得麦冬降解提取物。实施例2：取麦冬药材5000克，加水煎煮提取2次，加水10倍量，煎煮2小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至原料含量为1.5g/ml的浸膏，加入乙醇至含醇量为85％，放置过夜，沉淀经过滤干燥后得到麦冬粗多糖。麦冬粗多糖溶液采用Sevage法脱蛋白，乙醇沉淀，干燥，得纯化的麦冬多糖；将纯化后的麦冬多糖加水充分溶解至透明状态，加入2mol/L盐酸500ml，70℃降解5个时，加入NaOH溶液中和至中性,降解液经超滤截留分子量10000以下的降解物，超滤液再采用纳滤技术进行浓缩，浓缩液经冷冻干燥，即得麦冬降解提取物。实施例3：取麦冬药材5000克，加水煎煮提取1次，加水20倍量，煎煮2小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至原料含量为1g/ml的浸膏，加入乙醇至含醇量为80％，放置过夜，沉淀经过滤干燥后得到麦冬粗多糖。麦冬粗多糖溶液采用Sevage法脱蛋白，乙醇沉淀，干燥，得纯化的麦冬多糖；将纯化后的麦冬多糖加水充分溶解至透明状态，加入2mol/L硫酸500ml，80℃降解3个时，加入NaOH溶液中和至中性,降解液经超滤截留分子量10000以下的降解物，超滤液再采用纳滤技术进行浓缩，浓缩液经冷冻干燥，即得麦冬降解提取物。实施例4：取麦冬药材5000克，加水煎煮提取2次，加水5倍量，煎煮1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至原料含量为0.5g/ml的浸膏，加入乙醇至含醇量为75％，放置过夜，沉淀经过滤干燥后得到麦冬粗多糖。麦冬粗多糖溶液采用Sevage法脱蛋白，乙醇沉淀，干燥，得纯化的麦冬多糖；将纯化后的麦冬多糖加水充分溶解至透明状态，加入2mol/L盐酸500ml，100℃降解1个时，加入NaOH溶液中和至中性,降解液经超滤截留分子量10000以下的降解物，超滤液再采用纳滤技术进行浓缩，浓缩液经冷冻干燥，即得麦冬降解提取物。实施例5：麦冬降解提取物多糖含量的测定:采用硫酸蒽酮法测定多糖含量(1)标准溶液的配制：取经105℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品33mg，精密称定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。(2)标准曲线的制备标准曲线的制备精密量取对浑品溶液0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml、0.6ml，分别置10ml具塞刻度试管中，各加水至2.0ml，摇匀，在冰水浴中缓缓滴加0.2％蒽酮-硫酸溶液至刻度，混匀，放冷后置水浴中保温10分钟，取出，立即置冰水浴中冷却10分钟，取出，以相应试剂为空白。照紫外-可见分光光度法，在582nm波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。(3)样品溶液的制备精密称取降解提取物约10mg，加水溶解后转移至50ml容量瓶中，加水至刻度，摇匀。(4)样品测定精密吸取样品溶液0.1ml，按“标准曲线制备”项下操作，测得样品的吸光度值，计算含量。测得麦冬降解提取物中糖的含量，其中实施例1的糖含量大于98％，实施例2的糖含量为97％，实施例3和4的糖含量为95％。实施例6:麦冬降解提取物分子量范围的测定：将各麦冬降解提取物配成2μg/ml溶液，分别取0.5ul样品溶液与5mg/ml的基质2，5-二羟基苯甲酸(DHB)互溶挥干溶液，MALDI-TOF-MASS进样检测，结果测得麦冬降解提取物的分子量范围圴在500－2500之间。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种麦冬降解提取物，其特征在于由以下方法制备：/n(1)提取麦冬粗多糖：将麦冬药材按液料比5～20，加水提取1～3次，每次提取0.5～2小时，滤过，滤液浓缩至原料含量为0.5～2g/ml的浸膏，加乙醇使含醇量达75％～90％，静置，取沉淀蒸干得到麦冬粗多糖；/n(2)脱蛋白：麦冬粗多糖采用Sevage法脱蛋白纯化；/n(3)降解：将步骤(2)所述麦冬多糖加水充分溶解至透明状态，以麦冬药材的质量计，按料液比10:1加入2mol/L的酸，降解4～6h，加入NaOH溶液中和至中性,超滤截留得分子量范围在500－2500之间的降解物，浓缩冷冻干燥，即得麦冬降解提取物。/n

【技术特征摘要】
1.一种麦冬降解提取物，其特征在于由以下方法制备：
(1)提取麦冬粗多糖：将麦冬药材按液料比5～20，加水提取1～3次，每次提取0.5～2小时，滤过，滤液浓缩至原料含量为0.5～2g/ml的浸膏，加乙醇使含醇量达75％～90％，静置，取沉淀蒸干得到麦冬粗多糖；
(2)脱蛋白：麦冬粗多糖采用Sevage法脱蛋白纯化；
(3)降解：将步骤(2)所述麦冬多糖加水充分溶解至透明状态，以麦冬药材的质量计，按料液比10:1加入2mol/L的酸，降解4～6h，加入NaOH溶液中和至中性,超滤截留得分子量范围在500－2500之间的降解物，浓缩冷冻干燥，即得麦冬降解提取物。


2.根据权利要求1所述的提取物，其特征在于步骤(1)具体为：将麦冬药材加水提取2次，液料比10，每次提取2小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至原料含量为1g/ml的浸膏，加乙醇使含醇量达80％，静置过夜；滤去上清液，沉淀蒸干得到麦...

【专利技术属性】
技术研发人员：林爱华，刘奕明，王永刚，陈宝婷，
申请(专利权)人：广东省中医院广州中医药大学第二附属医院，广州中医药大学第二临床医学院，广东省中医药科学院，
类型：发明
国别省市：广东;44