一种用于辅助诊断RA的试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术提供了一种用于辅助诊断RA的试剂盒及检测方法。该技术方案首先研究发现，不同活动期间RA患者外周血单个核细胞中的ATG5、ATG12基因的mRNA相对表达水平呈不同程度的表达差异，同时，ATG5、ATG12、Atg12‑Atg5蛋白含量也表现出相应的规律性，由此可确认，ATG5、ATG12基因表达变化或其相关蛋白含量的变化对RA的预后及活动具有一定的相关性和指向性。基于以上有益的发现，本发明专利技术开发了一种基于自噬性基因检测的RA辅助诊断试剂盒，该试剂盒以人的血清、血浆或其它体液作为生物检材，采用竞争抑制ELISA法定量测定其中ATG5、ATG12、Atg12‑Atg5偶联蛋白含量，可以此为依据来实现RA的辅助检查，并评价RA的病理特征和发展进程。

A kit and detection method for RA diagnosis

【技术实现步骤摘要】
一种用于辅助诊断RA的试剂盒及检测方法
本专利技术涉及疾病诊断试剂盒
，进一步涉及基于基因检测的疾病辅助诊断技术，具体涉及一种用于辅助诊断RA的试剂盒及检测方法。
技术介绍
类风湿关节炎(RA)是一种病因未明的慢性、以炎性滑膜炎为主的系统性疾病。RA关节炎的病理主要有滑膜衬里细胞增生、间质大量炎性细胞浸润，以及微血管的新生、血管翳的形成及软骨和骨组织的破坏等。症状多表现为手、足小关节的多关节、对称性、侵袭性关节炎症，经常伴有关节外器官受累及血清类风湿因子阳性，可以导致关节畸形及功能丧失。RA的发病可能与遗传、感染、性激素等有关，诊断标准包括以下一系列特征：1)晨僵≥30分钟；2)大于3个关节区的关节炎；3)手关节炎；4)类风湿因子(RF)阳性；5)抗CCP抗体阳性。14个关节区包括：双侧肘、腕、掌指、近端指间、膝、踝和跖趾关节；以上特征满足3条以上可诊断为RA。近年来，随着分子生物学和医学影像学的发展，其他检测依据被引入了RA的诊断中，例如，RA患者自身抗体的检出，是RA有别于其他炎性关节炎，如银屑病关节炎、反应性关节炎和骨关节炎本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于辅助诊断RA的试剂盒，其特征在于包括：/n分别包被有ATG5抗原、ATG12抗原、Atg12-Atg5偶联蛋白抗原的孔板；/n阳性质控：ATG5阳性血清，ATG12阳性血清，Atg12-Atg5偶联蛋白阳性血清；/n阴性质控：健康人阴性血清；/n工作液R：标记有HRP的抗人ATG5抗体，标记有HRP的抗人ATG12抗体，标记有HRP的抗人Atg12-Atg5偶联蛋白抗体；/n稀释液：去离子水；/nTMB底物；/n终止液：1mol/L的H

【技术特征摘要】
1.一种用于辅助诊断RA的试剂盒，其特征在于包括：
分别包被有ATG5抗原、ATG12抗原、Atg12-Atg5偶联蛋白抗原的孔板；
阳性质控：ATG5阳性血清，ATG12阳性血清，Atg12-Atg5偶联蛋白阳性血清；
阴性质控：健康人阴性血清；
工作液R：标记有HRP的抗人ATG5抗体，标记有HRP的抗人ATG12抗体，标记有HRP的抗人Atg12-Atg5偶联蛋白抗体；
稀释液：去离子水；
TMB底物；
终止液：1mol/L的H2SO4溶液；
浓缩清洗洗涤液：PBS-Tween缓冲液。


2.根据权利要求1所述的一种用于辅助诊断RA的试剂盒，其特征在于所述孔板为96孔板。


3.根据权利要求1所述的一种用于辅助诊断RA的试剂盒，其特征在于所述ATG5阳性血清，ATG12阳性血清，Atg12-Atg5偶联蛋白阳性血清各为50μL。


4.根据权利要求1所述的一种用于辅助诊断RA的试剂盒，其特征在于所述健康人阴性血清为50μL。


5.根据权利要求1所述的一种用于辅助诊断RA的试剂盒，其特征在于所述标记有HRP的抗人ATG5抗体，标记有HRP的抗人ATG12抗体，标记有HRP的抗人Atg12-Atg5偶联蛋白抗体各为150μL。


6.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭月丽，
申请(专利权)人：漳州卫生职业学院，
类型：发明
国别省市：福建;35