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一种猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体检测免疫阻断层析试剂盒及其应用制造技术

技术编号:23786357 阅读:40 留言:0更新日期:2020-04-15 00:04
本发明专利技术公开了一种猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体检测免疫阻断层析试剂盒及其应用,属于免疫检测分析技术领域。所述的免疫阻断层析试剂盒,包括免疫阻断层析试纸条。本发明专利技术的免疫阻断层析试纸条对现有侧向层析试纸条进行重新设计和改进,突破了传统的免疫层析检测技术不能进行抗体鉴别诊断的局限性,将免疫层析检测技术扩展到了一个全新的检测领域,建立了一种全新的蛋白抗体鉴别诊断的技术,该技术相对于传统鉴别诊断技术具有应用范围广、检测成本低、检测速度快、操作简便、无需专业人员操作、仪器便携等优点,非常适用于大规模筛选和现场检测,具有重要的应用和推广价值。

A kit for detection of antibody against Ge protein of PRV and its application

【技术实现步骤摘要】
一种猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体检测免疫阻断层析试剂盒及其应用
本专利技术属于免疫检测分析
,具体涉及一种猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体检测免疫阻断层析试剂盒及其应用。
技术介绍
琼脂糖扩散实验、酶联免疫吸附试验、乳胶凝集实验、中和实验和免疫层析技术是目前常用的抗体水平的检测方法,能够实现对病原微生物(病毒、致病菌等)感染血清的临床快速、灵敏、廉价的检测和诊断,在疾病防控、生物医学、新药研发、环境监测、食品质量与安全等众多领域具有重要意义。琼脂糖扩散实验是利用可溶性抗原与相应抗体在含有电解质的半固体凝胶(琼脂或琼脂糖)中进行的一种沉淀试验用于判断血清的阴阳性,然而这种方法灵敏度和特异性都较低,现在已很少在临床使用了。乳胶凝集实验的原理是首先将乳胶载体上吸附抗原或抗体,然后将免疫乳胶滴在黑色塑料薄膜卡纸上,利用抗原抗体反应在乳胶液上形成肉眼可见的凝胶反应,间接反应血清的阴阳性。这种方法灵敏度和特异性较低,耗时长,也不适合现场检测。血清中和实验是病毒与相应的抗体结合后,失去对易感动物致病力的试验方法,曾是病毒抗体检测的标准方法之一,其具本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种免疫阻断层析试剂盒,其特征在于,包括免疫阻断层析试纸条;其中,免疫阻断层析试纸条包括底板;底板上依次设有样品垫、结合垫、层析膜、吸收垫,且样品垫、结合垫、层析膜和吸收垫依次搭接;结合垫上含有信号物标记的大分子抗原A和信号物标记的抗体A;层析膜包含质控线和检测线,质控线上包被有抗体B,检测线上包被有能特异识别大分子抗原A特异性蛋白表位的单克隆抗体;抗体A能识别抗体B,抗体A不与能特异识别大分子抗原A特异性蛋白表位的单克隆抗体结合。/n

【技术特征摘要】
1.一种免疫阻断层析试剂盒,其特征在于,包括免疫阻断层析试纸条;其中,免疫阻断层析试纸条包括底板;底板上依次设有样品垫、结合垫、层析膜、吸收垫,且样品垫、结合垫、层析膜和吸收垫依次搭接;结合垫上含有信号物标记的大分子抗原A和信号物标记的抗体A;层析膜包含质控线和检测线,质控线上包被有抗体B,检测线上包被有能特异识别大分子抗原A特异性蛋白表位的单克隆抗体;抗体A能识别抗体B,抗体A不与能特异识别大分子抗原A特异性蛋白表位的单克隆抗体结合。


2.根据权利要求1所述的免疫阻断层析试剂盒,其特征在于,所述的免疫阻断层析试纸条还包括设置于底板外部的外壳;
所述的外壳上设置有加样孔和观察区;
所述的加样孔位于所述的样品垫所在区域的上方;
所述的观察区位于所述的层析膜上质控线和检测线所在区域的上方。


3.根据权利要求2所述的免疫阻断层析试剂盒,其特征在于,
所述的信号物为可视化信号物、荧光信号物、拉曼信号物、磁信号物和放射性信号物中的至少一种;
所述的可视化信号物包括胶体金、胶体银、彩色乳胶微球和彩色染料中的至少一种;
所述的荧光信号物包括荧光微球、量子点中的至少一种;
所述的荧光微球包括上转换荧光微球、时间分辨荧光微球中的至少一种。


4.根据权利要求3所述的免疫阻断层析试剂盒,其特征在于,
所述的信号物为胶体金时,采用调节溶液的pH值的方法进行信号物分别与大分子抗原A和抗体A的偶联;
所述的信号物为彩色乳胶微球或荧光微球时,采用碳二亚胺法活化信号物表面的羧基基团,进行信号物分别与大分子抗原A和抗体A的偶联。


5.根据权利要求2所述的免疫阻断层析试剂盒,其特征在于,
所述的大分子抗原A包括病原体、病毒、细菌和真菌中的至少一种;
所述的信号物标记的大分子抗原A通过如下步骤制备得到:活化信号物表面的电荷或功能基团,反应后进行固液分离,弃液体,取固体;在固体中加入大分子抗原A进行振荡反应,然后加入封闭剂封闭多余的位点,反应后再次固液分离,取固体;加入复溶液重悬沉淀,得到信号物标记的大分子抗原A;
所述的信号物的用量按信号物:大分子抗原A的摩尔比=1~100:1配比计算。


6.根据权利要求3所述的免疫阻断层析试剂盒,其特征在于,
所述的抗体A为羊抗鸡IgY抗体;
所述的信号物标记的抗体A通过如下步骤制备得到:活化信号物表面的电荷或功能基团,反应后进行固液分离,弃液体,取固体;在固体中加入抗体A进行振荡反应,然后加入封闭剂封闭多余的位点,反应后再次固液分离,取固体;加入复溶液重悬沉淀,得到信号物标记的抗体A;
所述的信号物的用量按信号物:抗体A的摩尔比=1~100:1配比计算;
所述的信号物标记的大分子抗原A和所述的信号物标记的抗体...

【专利技术属性】
技术研发人员:唐勇陈辉黄立平
申请(专利权)人:暨南大学
类型:发明
国别省市:广东;44

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