SUV39H1缺陷的免疫细胞制造技术

本发明专利技术涉及Suv39h1缺陷的工程化免疫细胞。优选地，所述工程化免疫细胞还包含特异性结合靶抗原的基因工程化抗原受体。本发明专利技术还涉及获得基因工程化免疫细胞的方法，其包括抑制免疫细胞中Suv39h1的表达和/或活性的步骤；并且还任选地包括将特异性结合靶抗原的基因工程化抗原受体引入所述免疫细胞的步骤。本发明专利技术还涵盖所述工程化免疫细胞在过继治疗，特别是癌症的治疗中的用途。

Suv39h1 defective immune cells

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】SUV39H1缺陷的免疫细胞
本专利技术涉及过继治疗领域。本专利技术提供过继转移后具有增强的存活、重构潜力和中央记忆表型的Suv39h1缺陷的免疫细胞。
技术介绍
采用配备重组T细胞受体(TCR)和嵌合抗原受体(CAR)技术的T细胞的过继T细胞疗法(ATCT)在针对许多机构的若干恶性肿瘤的早期临床测试中显示出非常令人鼓舞的活性(KershawMH,WestwoodJA,DarcyPK.NatRevCancer.2013；13:525–541)。一个新兴的主题是治疗性T细胞的有效移植和长期存留与积极的治疗结果相关。若干临床前研究表明，初始和早期分化的T细胞具有增强的长期存留的能力(BergerCetal.,JClinInvest.2008；118:294–305；HinrichsCSetal.,ProcNatlAcadSci.2009；106:17469–17474；TanelAetal.,ExpertRevVaccines.2009；8(3):299–312)并且可以引起有效的抗肿瘤应答(GattinoniLetal.,JClinInvestig.2005；115:1616–1626；LugliEetal.JClinInvest.2013；123:594–599)。此外，过继转移细胞的增加的存留似乎取决于中央记忆T细胞(TCM)群的获得(PowellDJetal.,Blood.2005；105(1):241–50；HuangJ,KhongHTetal.JImmunother.2005；28:258–267)。稳定的基因转移已在临床上常规实现，特别是通过使用γ逆转录病毒载体通过CAR(例如参见GuestRDetal.,CancerImmunolImmunother.2014；63:133–145)和TCR(尤其参见JohnsonLAetal.,Blood.2009；114(3):535–46)转导多克隆T细胞，其中这些工程化细胞在移植CART细胞超过10年的患者中没有显示出明显的不良安全适应症(SchollerJetal.,SciTranslMed.2012；4:132ra153)。为了通过逆转录病毒载体或慢病毒进行有效转导，需要使原代T细胞活跃增殖(StacchiniAetal.,LeukRes.1999；23:127–136)，这通常是通过对静止的原代T细胞进行有丝分裂刺激来实现的。但是，一旦激活，T细胞将以不可逆的线性方式向效应子(TE)表型发展(MahnkeYDetal.,EurJImmunol.2013；43:2797–2809；FarberDL.SeminImmunol.2009；21:84-91)。因此，逆转录病毒或慢病毒转导的促有丝分裂激活促使T细胞从初始型向TE表型分化。与离体培养方案相结合，将转导的T细胞数量扩展至临床应用所需的数量(约109–1011)，T细胞趋向于更具分化的表型，这对于全身性留存而言不是最佳的。因此，尽管在过去的几年中，包括基于CART细胞疗法的过继性T细胞疗法在治疗某些血液系统癌症方面取得了显著的治疗成功，但仅在少数血液癌症类型和少数实体瘤类型中显示出有效性。已经假设，过继转移后有限的T细胞存活可能导致治疗功效低下。因此，本领域仍然需要在过继转移后表现出增强的中央记忆表型和增强的存活的经修饰或工程化的T细胞。特别是，仍然需要提供可用于过继治疗的免疫细胞，特别是T细胞，这显著地支持有效且大规模的癌症治疗。专利技术简述现在，专利技术人令人惊讶地发现，Suv39h1缺陷的T细胞在过继转移后携带增强的中央记忆表型和增强的存活。特别地，专利技术人表明，Suv39h1缺陷的T细胞以提高的效率积聚并重编程到表达CD44和CD62L两者的长寿中央记忆T细胞中。因而，本专利技术涉及修饰或工程化的免疫细胞，特别是修饰的T细胞，其中Suv39h1被灭活。因而，所述修饰或工程化的免疫细胞因其在过继治疗中的用途而引起极大兴趣。因此，本专利技术更具体地涉及Suv39h1缺陷的工程化或修饰的免疫细胞，其中免疫细胞优选还包含特异性结合靶抗原的基因工程化抗原受体。典型地，权利要求1的工程化免疫细胞是T细胞或NK细胞，特别是CD4+或CD8+T细胞。优选的细胞可以选自TN细胞、TSCM、TCM或TEM细胞及它们的组合。典型地，工程化免疫细胞也分离自受试者。优选地，所述受试者患有癌症，或处于患癌的风险中。基因工程化抗原受体特异性结合的靶抗原优选在癌细胞上表达和/或为通用肿瘤抗原。基因工程化抗原受体可以是嵌合抗原受体(CAR)，其包含特异性结合靶抗原的细胞外抗原识别结构域。基因工程化抗原受体也可以是T细胞受体(TCR)。优选地，在所述工程化免疫细胞中Suv39h1的活性和/或表达被选择性地抑制或阻断。在一个实施方案中，所述工程化免疫细胞表达编码无功能Suv39h1蛋白的Suv39h1核酸。本专利技术还涉及产生基因工程化免疫细胞的方法，其包括抑制免疫细胞中Suv39h1的表达和/或活性的步骤；以及任选地将特异性结合靶抗原的基因工程化抗原受体引入免疫细胞的步骤。优选地，抑制Suv39h1活性和/或表达包括将细胞与至少一种抑制Suv39h1的表达和/或活性和/或破坏Suv39h1基因的试剂接触或进行接触。所述试剂可以选自小分子抑制剂；抗体衍生物；适配子；阻断转录或翻译的核酸分子；或基因编辑剂。本专利技术还涉及如本文所述的工程化免疫细胞或包含所述工程化免疫细胞的组合物在过继细胞疗法，特别是癌症的过继疗法中的用途。专利技术详述定义本文中术语“抗体”以最广义使用，并且包括多克隆和单克隆抗体，包括完整抗体和功能性(抗原结合)抗体片段，包括片段抗原结合(Fab)片段、F(ab')2片段、Fab'片段、Fv片段、重组IgG(rlgG)片段、能够特异性结合抗原的可变重链(VH)区、单链抗体片段(包括单链可变片段(scFv))和单结构域抗体(例如sdAb、sdFv、纳米抗体)片段。该术语涵盖基因工程化和/或其他修饰的免疫球蛋白形式，诸如胞内抗体、肽抗体、嵌合抗体、完全人抗体、人源化抗体和杂缀合物抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体)、双抗体、三抗体和四抗体、串联di-scFv、串联tri-scFv。除非另有说明，否则术语“抗体”应理解为涵盖其功能性抗体片段。该术语还涵盖完整的或全长的抗体，包括任何类别或亚类的抗体，包括IgG及其亚类、IgM、IgE、IgA和IgD。“抗体片段”是指除完整抗体以外的分子，其包含结合完整抗体所结合的抗原的完整抗体的一部分。抗体片段的实例包括但不限于Fv、Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')2；双抗体；线性抗体；可变重链(VH)区；单链抗体分子(诸如scFvs)和单结构域VH单抗体；以及由抗体片段形成的多特异性抗体。在具体实施方案中，抗体是包含可变重链区和/或可变轻链区的单链抗体片段，诸如scFv。“单结构域抗体”是包含抗体的全部或一部分重链可变域或全部或一部分轻链可变域的抗体片段。在某本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种工程化免疫细胞，其是Suv39h1缺陷的。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170620 EP 17305757.11.一种工程化免疫细胞，其是Suv39h1缺陷的。


2.根据权利要求1所述的工程化免疫细胞，其还包含特异性结合靶抗原的基因工程化抗原受体。


3.根据权利要求1或2所述的工程化免疫细胞，其是T细胞或NK细胞。


4.根据权利要求1-3中任一项所述的工程化免疫细胞，其是CD4或CD8+T细胞。


5.根据权利要求1-4中任一项所述的工程化免疫细胞，其分离自受试者。


6.根据权利要求5所述的工程化免疫细胞，其中所述受试者患有癌症，或处于患癌的风险中。


7.根据权利要求1-6中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述工程化免疫细胞中Suv39h1的活性和/或表达被选择性地抑制或阻断。


8.根据权利要求1-7中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述工程化免疫细胞表达编码无功能Suv39h1蛋白的Suv39h1核酸。


9.根据权利要求2-8中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述靶抗原在癌细胞上...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·阿米格瑞纳，E·皮亚乔，C·古多，L·佩斯，G·阿尔莫兹尼，
申请(专利权)人：居里研究所，国家医疗保健研究所，国家科学研究中心，
类型：发明
国别省市：法国;FR