【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】适合用于移植的脐带血细胞部分的选择方法以及用途
与
技术介绍
本专利技术涉及一种选择用于离体扩增、分离CD133+/CD34+阳性部分以及未培养的CD133+/CD34+阴性部分的多个脐带血单位的方法、一种用于扩增所述选择的CD133+/CD34+部分的方法、一种用于选择用于移植入有需要的多个受试者的多个CD133+/CD34+脐带血细胞的多个扩增的群体的方法、以及一种将适当选择的离体扩增的CD133+/CD34+脐带血部分以及未选择的CD133/CD34阴性脐带血部分于临床环境中的移植用于血液恶性肿瘤治疗的治疗用途。本专利技术还预想了包括所述扩增的以及未选择的脐带血部分的试剂盒。超过三分之二的等待造血干细胞移植的患者缺乏一合适的匹配相关供体，因此必须进行非相关的供体移植。脐带血、骨髓以及其他造血丰富的组织是干细胞的一宝贵来源，特别是在一合理时间内无法找到一匹配的非相关供体的情况下。使用脐带血的优点包含以下事实：脐带血易于获得、携带血源性传染病的风险较小，且与来自相关或非相关供体的外周血(peripheralblood)或骨髓的相似...
【技术保护点】
1.一种选择用于离体扩增以及移植入一受试者的一解冻的脐带血单位的方法，其特征在于：所述方法包括：在将所述脐带血单位分离为CD133+/CD34+部分以及CD/133-/CD34-部分前，确定在所述解冻的脐带血单位中所述多个细胞的存活率百分比，以及选择具有约40％至约85％存活率的多个单位，从而选择适合用于离体扩增以及移植入所述受试者的一解冻的脐带血单位。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170516 US 62/506,6991.一种选择用于离体扩增以及移植入一受试者的一解冻的脐带血单位的方法，其特征在于：所述方法包括：在将所述脐带血单位分离为CD133+/CD34+部分以及CD/133-/CD34-部分前，确定在所述解冻的脐带血单位中所述多个细胞的存活率百分比，以及选择具有约40％至约85％存活率的多个单位，从而选择适合用于离体扩增以及移植入所述受试者的一解冻的脐带血单位。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法包括：选择具有约40％至约70％存活率的多个单位。
3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述方法更包括步骤：
(a)将适合用于离体扩增以及移植入所述受试者的被选择的所述解冻的脐带血单位分离为：(i)一第一选择的血细胞部分，包括多个CD133+/CD34+选择的细胞，以及(ii)一第二未选择的血细胞部分，包括多个CD133/CD34阴性细胞；
(b)在所述第一选择的CD133+/CD34+部分中，确定以下多个分离后的参数：
(i)约20×105至约75×105个细胞总数；
(ii)约70％至约85％的存活率；
(iii)约70％至约85％的多个CD133+细胞；
(iv)约70％至约85％的多个CD34+细胞；
(v)在CD133+/CD34+选择后，约0.02％至约1％的产率；
(vi)每1000个细胞约15至约75个菌落形成单位；以及
(vii)低于3内毒素单位/毫升的内毒素；以及
(c)根据所述多个参数选择或排除所述第一选择的CD133+/CD34+部分，从而选择适合用于离体扩增以及移植入所述受试者的一CD133+/CD34+脐带血部分。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于：所述步骤(a)的分离包括对CD133+的免疫磁珠选择。
5.如权利要求3所述的方法，其特征在于：包括多个CD133/CD34阴性细胞的所述第二未选择的血细胞部分包括低于0.5％的多个CD133+/CD34+细胞。
6.如权利要求3所述的方法，其特征在于：包括多个CD133/CD34阴性细胞的所述第二未选择的血细胞部分包括低于0.01％的多个CD133+/CD34+细胞。
7.如权利要求3所述的方法，其特征在于：包括多个CD133/CD34阴性细胞的所述第二未选择的血细胞部分包括多个免疫细胞，所述多个免疫细胞包含多个T淋巴细胞、多个B淋巴细胞以及多个自然杀手(NK)细胞。
8.一种制备用于移植入一受试者的一脐带血单位的方法，其特征在于：所述方法包括：
(a)将适合用于移植入所述受试者的一单一的解冻的脐带血单位分离为：
(i)一第一选择的血细胞部分，包括多个CD133+/CD34+选择的细胞，以及(ii)一第二未选择的血细胞部分，包括多个CD133/CD34阴性细胞；以及
(b)在允许细胞增殖的多个条件下，离体培养包括多个CD133+/CD34+选择的细胞的所述第一血细胞部分，所述多个条件包括提供营养素、血清与多个细胞因子以及烟酰胺，所述多个细胞因子包含干细胞因子、血小板生成素、FLt3配体以及IL-6中的每一个，所述烟酰胺的量在1.0毫摩尔至10毫摩尔之间。
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于：所述第一选择的CD133+/CD34+血细胞部分(a)(i)是根据权利要求3或4中任一项所述的方法选择的适合用于离体扩增以及移植入所述受试者的一CD133+/CD34+脐带血部分。
10.如权利要求8或9所述的方法，其特征在于：所述方法更包括：排除在所述离体扩增的第7天或第14天具有大于3.0内毒素单位/毫升的内毒素、及/或细菌、酵母菌或霉菌生长的多个单位。
11.如权利要求8至10中任一项所述的方法，其特征在于：适合用于移植的所述单一的脐带血单位的特征为以下多个冷冻保存前的参数：
(i)约8×106至约15×106个CD34+细胞总数；
(ii)在6个I类HLA(HLA-A以及HLA-B，低分辨率)以及II类HLA(HLA-DRB1，高分辨率)位点中至少4个与所述受试者有HLA匹配；
(iii)约1.8×109至约3.0×109个冷冻保存前的有核细胞总数；以及
(iv)每公斤受试者体重具有约1.5×107至约3.0×107个冷冻保存前的有核细胞总数。
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【专利技术属性】
技术研发人员：托尼·佩莱德，多丽特·哈拉蒂，埃夫拉特·兰道，
申请(专利权)人：盖米达细胞有限公司，
类型：发明
国别省市：以色列;IL
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