基于ARMS-PCR的MyD88基因L265P突变检测试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术提供一种基于ARMS‑PCR的MyD88基因L265P突变检测试剂盒，包含：(1)外周血单个核细胞富集试剂；(2)蛋白酶K；(3)DNA抽提柱；(4)DNA抽提套管；(5)清洗液A；(6)清洗液B；(7)DNA洗脱液；(8)ARMS‑PCR特异性引物Fw；(9)ARMS‑PCR特异性引物Fm；(10)ARMS‑PCR特异性引物R0；(11)ARMS‑PCR反应体系试剂。本发明专利技术在特异性引物的3’末端人为地引入了一个错配，以提高其特异性；同时控制反应中DNA模板、引物的浓度均在一个较低的水平以保证其反应的特异性。

Detection kit and method of l265p mutation of MyD88 gene based on ARMS-PCR

【技术实现步骤摘要】
基于ARMS-PCR的MyD88基因L265P突变检测试剂盒及检测方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种基于ARMS-PCR的MyD88基因L265P突变检测试剂盒及检测方法。
技术介绍
淋巴浆细胞淋巴瘤(lymphoplasmacyticlymphoma,LPL)/华氏巨球蛋白血症(macroglobulinemia,WM)是一种血液系统肿瘤性疾病，其发病率和年龄正相关，并具有一定的家族倾向性。在LPL/WM的患者中MyD88基因L265P突变是最常见的体细胞突变之一，其检出率可达90％以上，且这一突变与肿瘤细胞的生长、存活相关。虽然在如弥漫大B细胞淋巴瘤、IgM型意义未明的单克隆丙种球蛋白血症等其他的一些血液系统疾病中也能有MyD88L265P突变的检出，但2016年这一突变仍作为一个重要的辅助诊断指标写进了淋巴浆细胞淋巴瘤/华氏巨球蛋白诊断与治疗的专家共识中，因此针对该突变敏感的检测方法是针对相关血液系统疾病的重要辅助诊断指标。目前用于这一突变检测的Sanger测序法有着检出率低、检测灵敏度差的特点。ARMS-PCR作为一本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于ARMS-PCR的MyD88基因L265P突变检测试剂盒，其特征在于，包含：/n(1)外周血单个核细胞富集试剂；/n(2)蛋白酶K；/n(3)DNA抽提柱；/n(4)DNA抽提套管；/n(5)清洗液A；/n(6)清洗液B；/n(7)DNA洗脱液；/n(8)ARMS-PCR特异性引物Fw；/n(9)ARMS-PCR特异性引物Fm；/n(10)ARMS-PCR特异性引物R0；/n(11)ARMS-PCR反应体系试剂。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于ARMS-PCR的MyD88基因L265P突变检测试剂盒，其特征在于，包含：
(1)外周血单个核细胞富集试剂；
(2)蛋白酶K；
(3)DNA抽提柱；
(4)DNA抽提套管；
(5)清洗液A；
(6)清洗液B；
(7)DNA洗脱液；
(8)ARMS-PCR特异性引物Fw；
(9)ARMS-PCR特异性引物Fm；
(10)ARMS-PCR特异性引物R0；
(11)ARMS-PCR反应体系试剂。


2.根据权利要求1所述的基于ARMS-PCR的MyD88基因L265P突变检测试剂盒，其特征在于，步骤(1)中，所述外周血单个核细胞富集试剂采用Ficoll试剂。


3.根据权利要求1所述的基于ARMS-PCR的MyD88基因L265P突变检测试剂盒，其特征在于，步骤(8)中，所述ARMS-PCR特异性引物为：
Fw:5’-gtgcccatcagaagcgcct-3’。


4.根据权利要求1所述的基于ARMS-PCR的MyD88基因L265P突变检测试剂盒，其特征在于，步骤(9)中，所述ARMS-PCR特异性引物为：
Fm:5’-gtgcccatcagaagcgccc-3’。


5.根据权利要求1所述的基于ARMS-PCR的MyD88基因L265P突变检测试剂盒，...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁嘉扬，
申请(专利权)人：苏州艾可瑞斯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32