一种注射用左旋聚乳酸和交联透明质酸复合凝胶的制备方法及所得产品技术

本发明专利技术公开了一种注射用左旋聚乳酸和交联透明质酸复合凝胶的制备方法及所得产品，将透明质酸或其盐与左旋聚乳酸先制成海绵状复合物，然后再将海绵状复合物溶解后在不同的温度下进行两次酸性交联，得最终产品。海绵状复合物极易吸水，降低了原料的混匀难度，缩短了混匀所需时间，可提高透明质酸在溶液中的浓度、降低交联剂的使用，也可以减少透明质酸在酸性环境下的降解，提高了安全性。通过交联将左旋聚乳酸微粒锁定在凝胶内部，减少了因颗粒聚集造成的不良反应，减少了在推注过程中因左旋聚乳酸微粒在凝胶间活动而造成的针头部位堆积阻塞情况的发生，并且酸性条件下交联减少了左旋聚乳酸的降解，更好的维持了左旋聚乳酸颗粒的稳定性。

Preparation method and product of L-lactic acid and crosslinked hyaluronic acid composite gel for injection

【技术实现步骤摘要】
一种注射用左旋聚乳酸和交联透明质酸复合凝胶的制备方法及所得产品
本领域涉及一种注射用左旋聚乳酸和交联透明质酸复合凝胶的制备方法及所得产品，具体涉及一种安全性高、稳定性好、注射容易、聚乳酸微粒不易发生移位和堆积、不良反应少的注射用左旋聚乳酸和交联透明质酸复合凝胶的制备方法及所得产品。
技术介绍
透明质酸(Hyaluronicacid，HA)是由N-乙酰葡萄糖胺和D-葡萄糖醛酸组成的一种高分子多糖，广泛存在于动物体和微生物体中，无种属差异性和免疫原性，具有很高的生物安全性，是备受关注的新型生物医学材料，具有很高的医用价值。近年来，在微整形手术中，软组织填充手术越来越受欢迎，主要是填充皱纹、填平凹陷部位、修正面部轮廓。在所用的软组织填充剂中，透明质酸因其安全性高、生物相容性好、术后的不良反应少、注射后填充效果立即显现等优势成为国内外最常用的软组织填充剂。但透明质酸类填充剂因其自身限制，在体内的维持时间较短，仅为6-12个月。聚乳酸(Polylacticacid，PLA)是20世纪90年代迅速发展起来的新一代可完全降解高分子材料，它是以乳酸为单体聚合而成，在人体内可以通过非酶水解缓慢降解为乳酸，最终降解为CO2和H2O。左旋聚乳酸(PLLA)作为美容注射用材料也有其独特之处。与单纯填充剂不同，它是一种可以刺激皮下胶原蛋白生长的人工合成真皮填充剂。PLLA可以引起一种异物巨细胞反应，从而导致胶原蛋白逐渐生成。随着时间的增加使真皮层增厚，填充部位完全被新生的自体组织代替，在人体内可以维持2年以上，得到一个“永久性美容”的效果。目前市售聚乳酸填充剂多为聚乳酸与透明质酸或羧甲基纤维素钠的混合冻干产品，这类产品使用时需要先用注射水混匀后使用，混合水化时间长，如果混合不充分均匀注射时可能会发生针头阻塞，并且该类填充剂中以聚乳酸为主，其注射后填充效果不能立即显现。公开号为CN104258470A的专利提供了一种注射用聚乳酸微球和交联透明质酸混合凝胶的制备方法，该方法先制备交联透明质酸钠凝胶，再加入聚乳酸微球混匀制得混合凝胶。该混合凝胶的聚乳酸微球容易与凝胶分离，在注射过程中容易引起微球堆积，造成注射器针头的阻塞，给医生造成很大麻烦。同时，这种简单的混匀方式使得注射后聚乳酸微球容易发生移位和堆积，加大了皮下结节、肉芽肿的发生机率。公开号为CN105879124A的专利提供了一种注射用左旋聚乳酸填充剂的制备方法，其为左旋聚乳酸与蜂巢HA、增效剂复配后的冻干产品，该填充剂中蜂巢HA含量低，作用是提高左旋聚乳酸的分散性，只有左旋聚乳酸起到美容填充作用。这类冻干产品填充机理主要是植入凹陷部位后聚乳酸微粉刺激胶原生成，注射后填充效果无法立即显现，需要通过胶原的慢慢生成来填充凹陷部位。公开号为CN102911380A的专利提供了一种透明质酸与生物可降解高分子改性材料的制备方法，该方法在有机相二氯甲烷中将聚乳酸与透明质酸溶解，酸性条件下碳二亚胺(EDC)活化后用己二酸二酰肼(ADH)交联得到不溶于水的固体颗粒，该方法制备过程中用到有机试剂和毒性物质(EDC有毒)，对后期产品纯化产生很大压力，并且所得产品并非凝胶，不是理想的注射填充材料。公开号为CN109621003A的专利公开了一种含有微球的可注射透明质酸钠凝胶的制备方法，包括以下步骤：将透明质酸钠溶解到纯水中，得到溶液A；向溶液A中加入微球材料，均匀搅拌得到均匀分散的悬浊液B；调节悬浊液B的pH值，得到悬浊液C；向悬浊液C中加入交联剂，并均匀搅拌得到混合均匀的悬浊液D，反应一定时间后，悬浊液D中的透明质酸钠交联形成含有均匀分散微球材料的胶体E；将胶体E粉碎，得到凝胶颗粒F，通过不同目数的筛网，得到凝胶颗粒G；将凝胶颗粒G通过反复浸泡或者透析的方式，将可溶性杂质、交联剂除去，得到凝胶颗粒H；使用平衡用PBS缓冲液反复浸泡得到凝胶颗粒I；经过半脱水、灌装、灭菌步骤得到透明质酸钠凝胶。该法在微球混匀过程中需要较低的透明质酸钠溶液浓度(即溶液A的浓度低，所述溶液A的浓度为1％～15％)，这种情况下交联得到凝胶需要加入大量交联剂，对后期纯化造成压力，并且残留交联剂会对人体产生伤害；如果透明质酸钠溶液浓度高，溶液会过于粘稠，无法将微粒彻底混匀，造成凝胶中微粒不均匀现象，从而植入后容易发生肉芽肿等不良反应。
技术实现思路
针对现有技术存在的不足，本专利技术提供了一种注射用左旋聚乳酸和交联透明质酸复合凝胶的制备方法，该方法将左旋聚乳酸和透明质酸或其盐先制成更容易溶解分散的海绵状复合物，然后将该海绵状复合物加入含交联剂的酸性环境下进行交联，原料分散快速，透明质酸或其盐在交联体系中浓度高，交联剂用量少，左旋聚乳酸微粒通过交联可以均匀且牢固的固定在凝胶中，所得产品注射过程平顺，不易发生左旋聚乳酸微粒的位移和堆积，减少了不良反应的发生。本专利技术还提供了按照上述方法制得的注射用左旋聚乳酸和交联透明质酸复合凝胶，左旋聚乳酸在复合凝胶中均匀、稳定的存在，不易发生团聚和分离，注射后不易发生位移和堆积，注射后不良反应少，且凝胶同时具备交联透明质酸凝胶与左旋聚乳酸填充剂的优点，凝胶注射后功效立即显现，且维持时间长。本专利技术是通过以下技术方案实现的：一种注射用左旋聚乳酸和交联透明质酸复合凝胶的制备方法，该方法包括以下步骤：(1)在搅拌下，向透明质酸或其盐的水溶液中加入左旋聚乳酸，超声分散，混合均匀后进行真空冷冻干燥，得到透明质酸-左旋聚乳酸海绵状复合物；(2)将上述透明质酸-左旋聚乳酸海绵状复合物加入含有交联剂的酸性水溶液中，混合均匀，调整温度进行第一次交联，第一次交联后改变交联温度再进行第二次交联；(3)交联后，调节pH至中性，透析，得注射用左旋聚乳酸和交联透明质酸复合凝胶。进一步的，本专利技术选择在酸性环境下交联，以避免左旋聚乳酸的降解，但是为了降低透明质酸或其盐在酸性环境的降解，因此要尽量缩短透明质酸或其盐在酸性水溶液中的分散时间。本专利技术将左旋聚乳酸与透明质酸或其盐混合分散均匀，然后冻干成海绵状复合物。海绵状的结构使该复合物极易吸水，且透明质酸或其盐固定在海绵状结构中，可以更容易的在酸性水溶液中分散混合均匀，极大的降低了混匀难度，缩短了混合时间，减少了透明质酸或其盐与酸性环境的接触时间，降低了透明质酸或其盐的降解。进一步的，步骤(1)中，透明质酸或其盐的分子量为1000-3000kDa。左旋聚乳酸的分子量为10-80kDa，左旋聚乳酸的粒径为5-80μm。所述透明质酸盐为透明质酸的钠盐、钾盐或钙盐。进一步的，步骤(1)中，透明质酸或其盐与左旋聚乳酸的质量比为1:0.1-1:10。在此范围内，所得复合凝胶性能更佳。进一步的，步骤(1)中，透明质酸或其盐在水溶液中的浓度没有特殊要求，只要使透明质酸或其盐与左旋聚乳酸容易混合即可，优选的可以选择较低的浓度，以便透明质酸或其盐与左旋聚乳酸的快速混匀。经过冷冻干燥后，水分被去除，产品以海绵状复合物的固体形式加入到步骤(2)中，因为该海绵状复合物吸水速度快、粘度低，因此可以提高步骤(2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种注射用左旋聚乳酸和交联透明质酸复合凝胶的制备方法，其特征是包括以下步骤：/n（1）在搅拌下，向透明质酸或其盐的水溶液中加入左旋聚乳酸，超声分散，混合均匀后进行真空冷冻干燥，得到透明质酸-左旋聚乳酸海绵状复合物；/n（2）将上述透明质酸-左旋聚乳酸海绵状复合物加入含有交联剂的酸性水溶液中，混合均匀，调整温度进行第一次交联，第一次交联后改变交联温度再进行第二次交联；/n（3）交联后，调节pH至中性，透析，得注射用左旋聚乳酸和交联透明质酸复合凝胶。/n

【技术特征摘要】
1.一种注射用左旋聚乳酸和交联透明质酸复合凝胶的制备方法，其特征是包括以下步骤：
（1）在搅拌下，向透明质酸或其盐的水溶液中加入左旋聚乳酸，超声分散，混合均匀后进行真空冷冻干燥，得到透明质酸-左旋聚乳酸海绵状复合物；
（2）将上述透明质酸-左旋聚乳酸海绵状复合物加入含有交联剂的酸性水溶液中，混合均匀，调整温度进行第一次交联，第一次交联后改变交联温度再进行第二次交联；
（3）交联后，调节pH至中性，透析，得注射用左旋聚乳酸和交联透明质酸复合凝胶。


2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是：步骤（1）中，透明质酸或其盐与左旋聚乳酸的质量比为1:0.1-1:10。


3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征是：步骤（1）中，真空冷冻干燥的温度为-10～-50℃，时间为24-60h。


4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是：步骤（1）中，透明质酸或其盐的分子量为1000-3000kDa；优选的，透明质酸盐为透明质酸的钠盐、钾盐或钙盐；优选的，步骤（1）中，左旋聚乳酸的分子量为10-80kDa，左旋聚乳酸的粒径为5-80μm。


5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是：透明质酸或其盐与酸性水溶液的质量比为1:3-10，优选为1:4-10。
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【专利技术属性】
技术研发人员：苏江伟，吴万福，张燕，刘建建，郭学平，
申请(专利权)人：华熙生物科技股份有限公司，山东华熙海御生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37