一种促进软骨再生的肽GGS11及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种促进软骨再生的肽GGS11，其与SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相比，具有9/11以上的序列一致性。本发明专利技术提供的一种来源于IGF‑1且能够显著促进软骨再生的多肽GGS11，其长度为11个氨基酸，具有效应强、易于合成、免疫原性低等优点，因此，本发明专利技术的多肽GGS11在软骨损伤和骨关节炎治疗中具有广阔的应用前景。

A peptide ggs11 for cartilage regeneration and its application

【技术实现步骤摘要】
一种促进软骨再生的肽GGS11及其应用
本专利技术涉及多肽
，尤其是一种促进软骨再生的肽GGS11及其在制备修复软骨和/或治疗骨关节炎的药物中的应用。
技术介绍
骨关节炎(osteoarthritis，OA)是一种常见的关节疾病，表现为关节疼痛、僵硬，软骨损伤是导致骨关节炎的主要成因。本病在中年以后多发，女性多于男性，40岁人群的患病率为10％-17％，60岁以上为50％，而在75岁以上人群则高达80％。该病致残率可高达53％。而随着人口的日益老龄化，骨关节炎将成为影响人们生活质量的重要问题，骨关节炎药物市场需求将不断扩大。目前，临床上对于骨关节炎的治疗药物分为特异性治疗药物与非特异性治疗药物。非特异性治疗药物以镇痛和控制症状为主，但对软骨没有保护作用，如非甾体抗炎药等。特异性治疗药物可保护关节软骨，延缓骨关节炎进展，如氨基葡萄糖、硫酸软骨素等，但一般起效较慢，需治疗数月才见效，而且对受损软骨的再生没有作用。因此，开发一种安全性好、疗效突出的新型骨关节炎治疗药物成为医学界的一大目标。如上文所述，软骨损伤是导致骨关节炎的主要成因，关节软骨是由丰富的细胞外基质(ECM)和嵌于其中的少数软骨细胞所组成。软骨细胞的代谢受到许多细胞因子的调节，如胰岛素样生长因子1(Insulin-likegrowthfactor-1，IGF-1)等。IGF-1是由肝脏分泌的、70个氨基酸残基组成的多肽，是软骨合成代谢的主要因子。IGF-1能够保持软骨细胞在正常软骨中的代谢动态平衡，刺激软骨细胞分裂增殖，并促进软骨细胞合成Ⅱ型胶原和蛋白多糖，来维持软骨细胞表型(参见非专利文献1)。研究表明，IGF-1能定向诱导干细胞向软骨细胞方向分化(参见非专利文献2)，是比转化生长因子β2(transforminggrowthfactorsβ2，TGF-β2)和成纤维细胞生长因子2(fibroblastgrowthfactor2，FGF-2)更强的效应分子。参考文献：非专利文献1：LangdahlBL,KassemM,MollerMK,etal.TheeffectsofIGF-1andIGF-11onproliferationanddifferentiationofhumanosteoblastsandinteractionswithgrowthhormone.EurJGlinInvest,1998,28(3):176-183.非专利文献2：付勤等.外源性TGF-β1及IGF-1诱导大鼠脂肪干细胞向软骨细胞分化的实验研究.中国骨质疏松杂志,2007,13(12):848-853.
技术实现思路
基于上述问题，本专利技术的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种可促进软骨再生的肽GGS11，其用于治疗软骨损伤或骨关节炎效果显著，安全性高。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：一种促进软骨再生的肽GGS11，其与SEQIDNO.1所示的氨基酸序列相比，具有9/11以上的序列一致性。优选地，肽GGS11的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。其中，促进软骨再生的肽包括但不限于与SEQIDNO.1所示的氨基酸，还可以是与SEQIDNO.1所示的氨基酸序列相比具有9/11、10/11或11/11序列一致性且能促进软骨再生的多肽。优选地，肽GGS11的羧基端具有酰胺化或羰基化修饰，更优选酰胺化修饰。作为本专利技术的另一个方面，本专利技术还提供了上述肽GGS11在制备治疗软骨损伤或/和骨关节炎的药物中的应用。作为本专利技术的又一个方面，本专利技术提供了一种治疗软骨损伤或/和骨关节炎的药物，其中含有上述的肽GGS11。需要说明的是，药物中肽GGS11还可以是肽的醋酸盐、盐酸盐或磷酸盐，优选为醋酸盐。优选地，所述药物中还含有透明质酸或非甾体抗炎药。优选地，所述药物的有效剂量为每次1～5mg。优选地，所述药物还包括药学上可接受的载体，载体优选为盐水溶液或胶体溶液。其中，药物可通过注射给药，优选膝关节腔注射或皮下注射。优选地，所述胶体溶液为透明质酸凝胶。综上所述，本专利技术的有益效果为：本专利技术提供了一种来源于IGF-1且能够显著促进软骨再生的多肽GGS11，其长度为11个氨基酸，具有效应强、易于合成、免疫原性低等优点，因此，本专利技术的多肽GGS11在软骨损伤和骨关节炎治疗中具有广阔的应用前景。附图说明图1为肽GGS11固相合成的HPLC检测结果图；图2为肽GGS11对Ⅱ型胶原(COL2A1)mRNA表达的作用结果图，其中通过定量PCR检测COL2A1mRNA的相对表达量，以PBS为阴性对照，人胰岛素样生长因子1(IGF-1)为阳性对照；图3为肽GGS11对蛋白多糖(ACAN)mRNA表达的作用结果图，其中通过定量PCR检测ACANmRNA的相对表达量，以PBS为阴性对照，IGF-1为阳性对照；图4为肽GGS11对大鼠软骨细胞增殖的作用结果图，其中通过MTS法测量细胞增殖，以PBS为阴性对照，IGF-1为阳性对照；图5为肽GGS11处理软骨细胞的COL2A1免疫组化结果图；图6为肽GGS11对斑马鱼受损软骨的修复作用结果图；图7为肽GGS11对斑马鱼受损软骨的修复作用的照片，其中A)为正常对照组；B)为模型对照组；C)为阳性对照组；D)为GGS11低剂量组；E)为GGS11中剂量组；F)为GGS11高剂量组；图8为肽GGS11对治疗大鼠OA模型的病理评分结果图。具体实施方式在一些实施例中，本专利技术提供了一种肽GGS11，其是来源于胰岛素样生长因子1(IGF-1)的片段，肽GGS11具有促进骨髓间充质干细胞分化为软骨细胞和促进软骨细胞增殖的活性，可以用于软骨修复和/或治疗骨关节炎。本专利技术促进软骨修复的肽GGS11的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。为更好的说明本专利技术的目的、技术方案和优点，下面将结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步说明。应当指出的，对本领域的技术人员来说，在不脱离本专利技术构思的前提下，可以做出许多变化和改进，这些都属于本专利技术的保护范围。如无特别说明，本专利技术中的实验方法均为常规方法。如无特别说明，本专利技术中的试剂、材料均可从市场上或其它公开渠道获得。实施例1肽GGS11的固相合成肽GGS11(SEQIDNO.1)采用常规固相工艺合成，合成的肽纯度＞95％(见图1)，合成500mg。实施例2肽GGS11体外对间充质干细胞分化的作用1)人间充质干细胞的培养和传代：将人骨髓间质干细胞(BMSCs，购自广州赛业生物科技有限公司)复苏，加入完全培养基，置于37℃、5％CO2、饱和湿度的培养箱中培养。复苏后的第二天，给复苏的细胞换用新鲜的完全培养基，每两天给细胞换新鲜的完全培养基直到细胞达80％-90％的汇合度，然后进行传代培养。2)成软骨诱导：将肽GGS11用磷酸缓冲液(PBS)溶解。用含不同浓度的肽GGS11(0.1、1和本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种促进软骨再生的肽GGS11，其与SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相比，具有9/11以上的序列一致性。/n

【技术特征摘要】
1.一种促进软骨再生的肽GGS11，其与SEQIDNO.1所示的氨基酸序列相比，具有9/11以上的序列一致性。


2.权利要求1所述的肽GGS11，其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。


3.权利要求1或2所述的肽GGS11，其羧基端具有酰胺化或羰基化修饰，优选酰胺化修饰。


4.权利要求1或2所述的肽GGS11在制备治疗软骨损伤或/和骨关节炎的药物中的应用。

【专利技术属性】
技术研发人员：宋燕，许元生，张时群，卢肖宇，
申请(专利权)人：广州领晟医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44