【技术实现步骤摘要】
基于ddPCR及EGFR热点突变检测人循环肿瘤细胞的引物组、探针组、试剂盒及用途
本专利技术涉及基因检测
，更具体地，特别是涉及到基于ddPCR及EGFR热点突变(L858R、19del、T790M)检测人循环肿瘤细胞的引物组、探针组、试剂盒及在检测方法中的用途。
技术介绍
国家癌症中心发布的2018年全国最新癌症报告中，中国人群中，肺癌发病率、死亡率居首，每年发病约78.1万。非小细胞肺癌(包括腺癌、鳞癌和大细胞癌等多种)约占肺癌的80-85％，EGFR在非小细胞肺癌的突变频率约为40-55％。EGFR突变是亚洲人群中最主要的NSCLC驱动基因，主要发生在胞内TK区域的前四个外显子上(18-21)，目前发现的TK区域突变有30多种，它们能导致不依赖于配体的EGFRTK激活。激活突变有三种类型：缺失突变、替代突变、复制或插入突变，都发生在TK区域的ATP结合口袋上。酪氨酸激酶抑制剂(TKI)是近年来肺部肿瘤治疗的热点靶向药物，与传统放化疗药物相比，可明显延长肿瘤患者生存期，改善生存质量。EGFR突变是癌...
【技术保护点】
1.一种基于ddPCR及EGFR热点突变检测人循环肿瘤细胞的引物组，其特征在于，其中所述EGFR热点突变的位点包括L858R、19del和T790M，所述引物组包括：/n检测EGFR热点突变位点T790M的第一引物对，包括第一引物和第二引物，且所述第一引物的序列如SEQ ID NO.1所示，所述第二引物的序列如SEQ ID NO.2所示；/n检测EGFR热点突变位点19del的第二引物对，包括第三引物和第四引物，且所述第三引物的序列如SEQ ID NO.3所示，所述第四引物的序列如SEQ ID NO.4所示；/n检测EGFR热点突变位点L858R的第三引物对，包括第五引物和...
【技术特征摘要】
1.一种基于ddPCR及EGFR热点突变检测人循环肿瘤细胞的引物组，其特征在于，其中所述EGFR热点突变的位点包括L858R、19del和T790M，所述引物组包括：
检测EGFR热点突变位点T790M的第一引物对，包括第一引物和第二引物，且所述第一引物的序列如SEQIDNO.1所示，所述第二引物的序列如SEQIDNO.2所示；
检测EGFR热点突变位点19del的第二引物对，包括第三引物和第四引物，且所述第三引物的序列如SEQIDNO.3所示，所述第四引物的序列如SEQIDNO.4所示；
检测EGFR热点突变位点L858R的第三引物对，包括第五引物和第六引物，且所述第五引物的序列如SEQIDNO.5所示，所述第六引物的序列如SEQIDNO.6所示。
2.一种基于ddPCR及EGFR热点突变检测人循环肿瘤细胞的探针组，其特征在于，其中所述EGFR热点突变的位点包括L858R、19del和T790M，所述探针组包括：
检测EGFR热点突变位点T790M的第一探针，其序列如SEQIDNO.7所示；
检测EGFR热点突变位点19del的第二探针和第三探针，其序列分别如SEQIDNO.8、SEQIDNO.9所示；
检测EGFR热点突变位点L858R的第四探针，其序列如SEQIDNO.10所示。
3.一种基于ddPCR及EGFR热点突变检测人循环肿瘤细胞的试剂盒，其特征在于包括至少一引物组和至少一探针组，其中一引物组为权利要求1所述的引物组，一探针组为权利要求2所述的探针组。
4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于还包括荧光标记基团CY3、FAM...
【专利技术属性】
技术研发人员：张惠丹，戴敬，杨丽萍，赵洪玉，
申请(专利权)人：苏州绘真医学检验有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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