具有修饰的FCRN和保持的蛋白A结合性质的Fc区变体制造技术

在本文中报道了一种包含第一多肽和第二多肽的多肽，所述第一多肽和第二多肽各自在N‑端至C‑端方向包含含有一个或多个半胱氨酸残基的免疫球蛋白铰链区的至少一部分、免疫球蛋白CH2‑结构域和免疫球蛋白CH3‑结构域，其中i)所述第一多肽包含突变1253A、H310A和H435A并且所述第二多肽包含突变H310A、H433A和Y436A，或者ii)所述第一多肽包含突变1253A、H310A和H435A并且所述第二多肽包含突变L251D、L314D和L432D，或者iii)所述第一多肽包含突变1253A、H310A和H435A并且所述第二多肽包含突变L251S、L314S和L432S。

Fc region variants with modified FcRn and conserved protein a binding properties

【技术实现步骤摘要】
具有修饰的FCRN和保持的蛋白A结合性质的Fc区变体本申请是申请日为2015年1月12日、专利技术名称为“具有修饰的FCRN和保持的蛋白A结合性质的Fc区变体”的中国专利申请No.201580003626.0的分案申请。在本文中报道了就Fc-受体结合而言已经经过修饰而没有损害它们的纯化性质的IgGFc区。
技术介绍
对有成本效益的生产方法的需求已经导致优化下游纯化(包括一个或多个亲和色谱法步骤)的必要。要处理的较大体积和对原位清洁(cleaning-in-place,CIP)方案的较苛刻要求是需要解决的一些特征(Hober,S.,J.Chrom.B.848(2007)40-47)。借助于选择性的Fc区亲和配体来纯化单克隆抗体，是最有前途的用于大规模生产治疗性单克隆抗体的方法。实际上，该规程不需要建立与抗体的抗原特异性部分(即Fab结构域)的任何相互作用，所述抗原特异性部分因而保持完整且可以保留它的性质(参见Salvalaglio,M.,等人,J.Chrom.A1216(2009)8678-8686)。由于它的选择性，亲和纯化步骤在早期被用在纯本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种多肽，其包含/n第一多肽和第二多肽，所述第一多肽和第二多肽各自在N-端至C-端方向包含含有一个或多个半胱氨酸残基的免疫球蛋白铰链区的至少一部分、免疫球蛋白CH2-结构域和免疫球蛋白CH3-结构域，/n其中/ni)所述第一多肽包含突变I253A、H310A和H435A并且所述第二多肽包含突变H310A、H433A和Y436A，或者/nii)所述第一多肽包含突变I253A、H310A和H435A并且所述第二多肽包含突变L251D、L314D和L432D，或者/niii)所述第一多肽包含突变I253A、H310A和H435A并且所述第二多肽包含突变L251S、L314S和L432S。/n

【技术特征摘要】
20140115 EP 14151320.0;20140425 EP 14165923.51.一种多肽，其包含
第一多肽和第二多肽，所述第一多肽和第二多肽各自在N-端至C-端方向包含含有一个或多个半胱氨酸残基的免疫球蛋白铰链区的至少一部分、免疫球蛋白CH2-结构域和免疫球蛋白CH3-结构域，
其中
i)所述第一多肽包含突变I253A、H310A和H435A并且所述第二多肽包含突变H310A、H433A和Y436A，或者
ii)所述第一多肽包含突变I253A、H310A和H435A并且所述第二多肽包含突变L251D、L314D和L432D，或者
iii)所述第一多肽包含突变I253A、H310A和H435A并且所述第二多肽包含突变L251S、L314S和L432S。


2.根据权利要求1所述的多肽，其特征在于，所述多肽不特异性结合人FcRn并且的确特异性结合葡萄球菌蛋白A。


3.根据权利要求1-2中的任一项所述的多肽，其特征在于，i)所述第一多肽还包含突变Y349C、T366S、L368A和Y407V并且所述第二多肽包含突变S354C和T366W，或ii)所述第一多肽还包含突变S354C、T366S、L368A和Y407V并且所述第二多肽包含突变Y349C和T366W。


4.根据权利要求1-3中的任一项所述的多肽，其特征在于，所述免疫球蛋白铰链区、所述免疫球蛋白CH2-结构域和所述免疫球蛋白CH3-结构域是人IgG1亚类。


5.根据权利要求1-4中的任一项所述的多肽，其特征在于，所述第一多肽和所述第二多肽还包含突变L234A和L235A。


6.根据权利要求1-3中的任一项所述的多肽，其特征在于，所述免疫球蛋白铰链区、所述免疫球蛋白CH2-结构域和所述免疫球蛋白CH3-结构域是人IgG2亚类。


7.根据权利要求1-3中的任一项所述的多肽，其特征在于，所述免疫球蛋白铰链区、所述免疫球蛋白CH2-结构域和所述免疫球蛋白CH3-结构域是人IgG4亚类。


8.根据权利要求1-3和7中的任一项所述的多肽，其特征在于，所述第一多肽和所述第二多肽还包含突变S228P和L235E。


9.根据权利要求1-8中的任一项所述的多肽，其特征在于，所述第一多肽和所述第二多肽还包含突变P329G。


10.根据权利要求1-9中的任一项所述的多肽，其特征在于，所述多肽是双特异性抗体。


11.一种多肽，其包含
第一多肽，所述第一多肽在N-端至C-端方向包含第一重链可变结构域、亚类IgG1的免疫球蛋白CH1-结构域、亚类IgG1的免疫球蛋白铰链区、亚类IgG1的免疫球蛋白CH2-结构域和亚类IgG1的免疫球蛋白CH3-结构域，
第二多肽，所述第二多肽在N-端至C-端方向包含第二重链可变结构域、亚类IgG1的免疫球蛋白CH1-结构域、亚类IgG1的免疫球蛋白铰链区、亚类IgG1的免疫球蛋白CH2-结构域和亚类IgG1的免疫球蛋白CH3-结构域，
第三多肽，所述第三多肽在N-端至C-端方向包含第一轻链可变结构域和轻链恒定结构域，
第四多肽，所述第四多肽在N-端至C-端方向包含第二轻链可变结构域和轻链恒定结构域，
其中所述第一重链可变结构域和所述第一轻链可变结构域形成特异性结合第一抗原的第一结合位...

【专利技术属性】
技术研发人员：亚历山大·舍劳特，蒂尔曼·施洛特豪尔，
申请(专利权)人：豪夫迈·罗氏有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士;CH