一种中药制剂的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种中药制剂的检测方法，所述制剂由制何首乌、金樱子肉、桑椹桑椹、女贞子、豨莶草、川牛膝和菟丝子等七种药味组成，具有补肝肾、益精髓的功效，所述检测方法包括以下步骤：对制剂中的制何首乌、桑椹桑椹、川牛膝和女贞子进行鉴别；测定制剂中制何首乌中二苯乙烯苷的含量。

A test method of traditional Chinese medicine preparation

【技术实现步骤摘要】
一种中药制剂的检测方法
本专利技术涉及一种中药制剂的检测方法，属于中药

技术介绍
益龄精收载于《中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂第六册》，为九芝堂股份有限公司独家生产品种。该制剂由制何首乌、金樱子肉、桑椹、女贞子(酒蒸)、豨莶草(蜜酒蒸)、川牛膝(酒蒸)和菟丝子(酒蒸)等七种药味组成，具有补肝肾、益精髓的功效，临床上用于肝肾亏虚所致的头昏，目眩，耳鸣，心悸，乏力，咽干，失眠等症。现行质量标准中，只收载了制何首乌和桑椹的薄层鉴别方法，且无含量测定项。其中制何首乌鉴别项中展开体系含毒性较大的苯，对检验人员的健康影响较大；桑椹鉴别项中桑椹对照药材前处理时的加水量未明确，在实际检验工作中，不同检验人员的理解不同，容易造成结果重复性差；方中君药制何首乌具有补肝肾，益精血，乌须发，强筋骨，化浊降脂的作用，而二苯乙烯苷为其主要活性成分，具有抗氧化、抗肿瘤、调节血脂、神经保护等作用，以其作为指标性成分进行含量测定，能够较为客观的评价益龄精的质量。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种中药制剂益龄精的检测方法，利用该检测方法，可简便有效地定性定量检测中药制剂有效成分，确保对药品质量有效控制，为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：一种中药制剂益龄精的检测方法，所述制剂益龄精由制何首乌、金樱子肉、桑椹桑椹、女贞子、豨莶草、川牛膝和菟丝子等七味中药制成，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：(1)用TLC法对制剂中的制何首乌、桑椹、川牛膝和女贞子进行鉴别；>(2)用HPLC法测定制剂中制何首乌中二苯乙烯苷的含量。所述制剂中的制何首乌的鉴别包括以下步骤：取该制剂40ml，置分液漏斗中，加二氯甲烷振摇提取3次，第一次加二氯甲烷40ml，第二次加二氯甲烷30ml，第三次加二氯甲烷30ml，分取合并二氯甲烷液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取缺制首乌的阴性样品40ml，同法制成阴性对照溶液；再取何首乌对照药材0.2g，加二氯甲烷20ml，超声30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典2015年版四部通则0502薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为9:1:0.1的甲苯-醋酸乙酯-甲酸混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，结果供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。所述制剂中的川牛膝的鉴别包括以下步骤：取该制剂40ml，置分液漏斗中，加二氯甲烷振摇提取3次，第一次加二氯甲烷40ml，第二次加二氯甲烷30ml，第三次加二氯甲烷30ml，分取合并二氯甲烷液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；取缺川牛膝的阴性样品溶液40ml，同法制成阴性对照溶液；另取川牛膝对照药材1g，加水50ml，煎煮30分钟，滤过，滤液浓缩至约20ml，置分液漏斗中，加二氯甲烷30ml振摇提取，分取二氯甲烷液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液，照中国药典2015年版四部通则0502薄层色谱法试验，吸取上述对照药材溶液20μl，供试品溶液和缺川牛膝阴性对照溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为1:1的沸程为60～90℃的石油醚-醋酸乙酯混合溶液为展开剂，饱和30min，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，结果供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。所述制剂中的桑椹的鉴别包括以下步骤：取该制剂40ml，置分液漏斗中，加二氯甲烷振摇提取3次，第一次加二氯甲烷40ml，第二次加二氯甲烷30ml，第三次加二氯甲烷30ml，分取合并二氯甲烷液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；取缺桑椹的阴性样品溶液40ml，同法制成阴性对照溶液；取桑椹对照药材2g，加水60ml煎煮30分钟，滤过，滤液浓缩至约20ml，置分液漏斗中，加二氯甲烷30ml振摇提取，分取二氯甲烷液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典2015年版四部通则0502薄层色谱法试验，吸取供试品溶液与缺桑椹阴性对照溶液各10μl，对照药材溶液20μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为5:4:1的甲苯-乙酸乙酯-甲酸混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，结果供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。所述制剂中的女贞子的鉴别包括以下步骤：取该制剂20ml，用乙醚振摇提取2次，每次20ml，合并乙醚液，低温挥干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取缺女贞子的阴性样品溶液20ml，同法制成阴性对照溶液；再取女贞子对照药材0.5g，加50％乙醇20ml，超声30min，滤过，滤液照供试品溶液制备方法处理，制成对照药材溶液；照中国药典2015年版四部通则0502薄层色谱法试验，吸取上述对照药材溶液，供试品溶液和阴性对照溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为20:11的环已烷-丙酮混合溶液为展开剂，饱和30min，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇液，热风吹至斑点显色清晰，结果供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。所述制剂中的制何首乌中二苯乙烯苷的含量测定，照中国药典2015年版四部通则0512高效液相色谱法试验，步骤如下：(1)色谱条件：色谱柱为PhenomenexC18柱(250mm×4.6mm,5μm)；检测波长为310-330nm；流动相A为乙腈，流动相B为水，分析时间30分钟，等度洗脱，流动相A:流动相B的体积比为20:80；流速0.8-1.2mL·min-1；柱温为25-40℃；进样量10μl；理论塔板数不低于2000；(2)对照品溶液的制备：精密称取二苯乙烯苷(2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷)对照品13mg，置50ml容量瓶中，加稀乙醇溶解并定容至刻度，摇匀，得到对照品溶液母液。精密量取对照品溶液母液1mL置10ml容量瓶中，加稀乙醇稀释并定容至刻度，摇匀，即得浓度为0.0260mg/mL的对照品溶液；(3)供试品、阴性对照溶液的制备：精密量取制剂样品3.0ml，置于100ml量瓶中，加稀乙醇适量，振摇使溶解，再加稀乙醇稀释至刻度，摇匀，静置，过0.45μm微孔滤膜，取续滤液作为供试品溶液。取缺制何首乌的阴性样品，同供试品溶液方法制成缺制何首乌的阴性对照溶液。进一步地，所述制剂中的制何首乌中二苯乙烯苷的含量测定，照中国药典2015年版四部通则0512高效液相色谱法试验，所述步骤(1)中色谱条件优选为：色谱柱为PhenomenexC18柱(250mm×4.6mm,5μm)；检测波长为320nm；流动相A为乙腈，流动相B为水，分析时间30分钟，等度洗脱，流动相A:流动相B的体积比为20:80，流速1.0mL·min-1；柱温为30℃；进样量10μl；理论塔板数不低于2000。为了更好地理解本专利技术，以本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种中药制剂的检测方法，所述制剂由制何首乌、金樱子肉、桑椹、女贞子、豨莶草、川牛膝和菟丝子七味中药制成，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：/n(1)用TLC法对制剂中的制何首乌、桑椹、川牛膝和女贞子进行鉴别；/n(2)用HPLC法测定制剂中制何首乌中二苯乙烯苷的含量。/n

【技术特征摘要】
1.一种中药制剂的检测方法，所述制剂由制何首乌、金樱子肉、桑椹、女贞子、豨莶草、川牛膝和菟丝子七味中药制成，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：
(1)用TLC法对制剂中的制何首乌、桑椹、川牛膝和女贞子进行鉴别；
(2)用HPLC法测定制剂中制何首乌中二苯乙烯苷的含量。


2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述制剂中的制何首乌的鉴别包括以下步骤：
取该制剂40ml，置分液漏斗中，加二氯甲烷振摇提取3次，第一次加二氯甲烷40ml，第二次加二氯甲烷30ml，第三次加二氯甲烷30ml，分取合并二氯甲烷液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取缺制首乌的阴性样品40ml，同法制成阴性对照溶液；再取何首乌对照药材0.2g，加二氯甲烷20ml，超声30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典2015年版四部通则0502薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为9:1:0.1的甲苯-醋酸乙酯-甲酸混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，结果供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。


3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述制剂中的川牛膝的鉴别包括以下步骤：
取该制剂40ml，置分液漏斗中，加二氯甲烷振摇提取3次，第一次加二氯甲烷40ml，第二次加二氯甲烷30ml，第三次加二氯甲烷30ml，分取合并二氯甲烷液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；取缺川牛膝的阴性样品溶液40ml，同法制成阴性对照溶液；另取川牛膝对照药材1g，加水50ml，煎煮30分钟，滤过，滤液浓缩至约20ml，置分液漏斗中，加二氯甲烷30ml振摇提取，分取二氯甲烷液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典2015年版四部通则0502薄层色谱法试验，吸取上述对照药材溶液20μl，供试品溶液和缺川牛膝阴性对照溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为1:1的沸程为60～90℃的石油醚-醋酸乙酯混合溶液为展开剂，饱和30min，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，结果供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。


4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述制剂中的桑椹的鉴别包括以下步骤：
取该制剂40ml，置分液漏斗中，加二氯甲烷振摇提取3次，第一次加二氯甲烷40ml，第二次加二氯甲烷30ml，第三次加二氯甲烷30ml，分取合并二氯甲烷液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；取缺桑椹的阴性样品溶液40ml，同法制成阴性对照溶液；取桑椹对照药材2g，加水60ml煎煮30分钟，滤过，滤液浓缩...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐向平，夏新华，黄胜，朱丽，谢安，欧金秀，叶惠煊，
申请(专利权)人：九芝堂股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43