一种甲芪肝纤颗粒的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种甲芪肝纤颗粒的检测方法，包括薄层色谱法鉴别甲芪肝纤颗粒中桃仁的有效成分，以及高效液相色谱法测定苦杏仁苷的含量。本发明专利技术中薄层鉴别斑点清晰，分离度较好，阴性无干扰；含量测定方法精密度、稳定性、重复性良好，提高了甲芪肝纤颗粒质量标准的可控性，进一步确保产品内在质量和疗效。进一步确保产品内在质量和疗效。进一步确保产品内在质量和疗效。

【技术实现步骤摘要】
一种甲芪肝纤颗粒的检测方法


[0001]本专利技术涉及中药的检测方法，尤其涉及一种甲芪肝纤颗粒的检测方法。

技术介绍

[0002]甲芪肝纤颗粒为九芝堂股份有限公司生产的独家中成药品种[标准号: WS3‑
737(Z
‑
203)
‑
2006(Z)
‑
2007]，由黄芪、防己、茯苓、厚朴、延胡索、赤芍、牛膝、桃仁、莪术、鳖甲、土鳖虫等11味中药材组成，具有疏肝活血、健脾祛湿的功效。桃仁为本品处方中的臣药，苦杏仁苷为其主要有效成分，现代药理学研究表明其具有神经保护、抗纤维化、抗肿瘤等作用。但本品该现行质量标准中，未建立桃仁的相关质控项目，存在一定的临床用药安全隐患，不能满足现有中药制剂标准日益严格的需求。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的在于提供一种甲芪肝纤颗粒的检测方法，提高甲芪肝纤颗粒质量标准的可控性，进一步确保产品内在质量和疗效。本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：
[0004]一种甲芪肝纤颗粒的检测方法，所述甲芪肝纤颗粒的制备原料包括黄芪、防己、茯苓、厚朴、延胡索、赤芍、牛膝、桃仁、莪术、鳖甲、土鳖虫，其特征在于，采用薄层色谱法鉴定桃仁的有效成分，采用高效液相色谱法检测苦杏仁苷含量。
[0005]其中，所述的薄层色谱层析法鉴别桃仁的有效成分时，鉴定包括以下步骤：
[0006](1.1)制备供试品溶液
[0007]取甲芪肝纤颗粒，研细，加甲醇超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加温水使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱，加水洗脱，弃去水液，用氨试液洗脱，弃去氨液，再用水洗脱，弃去水液，继用乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇，使溶解，作为供试品溶液；
[0008](1.2)制备对照药材溶液
[0009]称取桃仁对照药材加水煎煮，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，制成桃仁对照药材溶液；
[0010](1.3)制备对照品溶液
[0011]取苦杏仁苷对照品适量，加甲醇制成苦杏仁苷对照品溶液；
[0012](1.4)制备阴性对照溶液
[0013]取缺桃仁的阴性样品，同步骤(1.1)方法制成缺桃仁阴性对照溶液；
[0014](1.5)薄层色谱鉴定
[0015]照薄层色谱法(中国药典2020年版四部通则0502)试验，吸取上述供试品溶液、桃仁对照药材溶液、苦杏仁苷对照品溶液、缺桃仁阴性对照溶液各5
‑
10μl，分别点于同一硅胶G 薄层板，以体积比为(14
‑
16):(38
‑
42):(28
‑
32):(9
‑
11)的三氯甲烷
‑
乙酸乙酯
‑
甲醇
‑
水在 5
‑
10℃下放置10
‑
14小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；
[0016](1.6)结果分析：供试品色谱中，在与桃仁对照药材和苦杏仁苷对照品色谱相应位
置上，判断是否显相同颜色的荧光斑点。
[0017]优选地，所述薄层色谱法鉴别桃仁的步骤如下：
[0018](2.1)制备供试品溶液
[0019]称取甲芪肝纤颗粒4
‑
8g，研细，加甲醇10
‑
20mL，超声处理15
‑
25分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加温水4
‑
8mL使溶解，放冷﹐通过D101型大孔吸附树脂柱，加15
‑
25ml水洗脱，弃去水液，用氨试液(4
→
100)25
‑
50mL洗脱，弃去氨液，再用水8
‑
15mL洗脱，弃去水液，继用体积分数为15％
‑
25％的乙醇25
‑
50mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇l
‑
2mL使溶解，作为供试品溶液；
[0020](2.2)制备对照药材溶液
[0021]称取桃仁对照药材1
‑
1.5g，加水40
‑
75mL，煎煮25
‑
40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1
‑
2mL使溶解，作为对照药材溶液；
[0022](2.3)制备苦杏仁苷对照品溶液
[0023]取苦杏仁苷对照品适量，加甲醇制成每lmL含2mg的对照品溶液；
[0024](2.4)制备阴性对照溶液
[0025]取缺桃仁的阴性样品5g，同步骤(2.1)的方法制成缺桃仁阴性对照溶液；
[0026](2.5)薄层色谱鉴定
[0027]照薄层色谱法(中国药典2020年版四部通则0502)试验，分别吸取所述的供试品溶液、桃仁对照药材溶液、苦杏仁苷对照品溶液、缺桃仁阴性对照溶液各5
‑
10μl，分别点于同一硅胶G薄层板，以体积比为(14
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16):(38
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42):(28
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32):(9
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11)的三氯甲烷
‑
乙酸乙酯
‑
甲醇
ꢀ‑
水在5
‑
10℃下放置10
‑
14小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；
[0028](2.6)结果分析：供试品色谱中，在与桃仁对照药材和苦杏仁苷对照品色谱相应位置上，判断是否显相同颜色的荧光斑点。
[0029]进一步优选的，所述薄层色谱法鉴别桃仁的步骤如下：
[0030](3.1)制备供试品溶液
[0031]称取甲芪肝纤颗粒5g，研细，加甲醇15mL，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加温水5mL使溶解，放冷﹐通过D101型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长8cm)，加20ml 水洗脱，弃去水液，用氨试液(4
→
100)30mL洗脱,弃去氨液，再用水10mL洗脱，弃去水液，继用体积分数为20％乙醇30mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lmL使溶解，作为供试品溶液；
[0032](3.2)制备对照药材溶液
[0033]称取桃仁对照药材1g，加水50mL，煎煮30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL 使溶解，作为对照药材溶液；
[0034](3.3)制备苦杏仁苷对照品溶液
[0035]取苦杏仁苷对照品适量，加甲醇制成每lmL含2mg的对照品溶液；
[0036](3.4)制备阴性对照溶液
[0037]取缺桃仁的阴性样品5g，同步骤(3.1)的方法制成缺桃仁阴性对照溶液；
[0038](3.5)薄层色谱鉴定
[0039]照薄层色谱法(中国药典2020年版四部通则0502)试验，分别吸取所述的供试品溶液和缺桃本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种甲芪肝纤颗粒的检测方法，所述甲芪肝纤颗粒的制备原料包括黄芪、防己、茯苓、厚朴、延胡索、赤芍、牛膝、桃仁、莪术、鳖甲、土鳖虫，其特征在于，采用薄层色谱法鉴定桃仁的有效成分，采用高效液相色谱法检测苦杏仁苷含量。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，鉴定对象为桃仁的有效成分时，所述的薄层色谱层析法鉴定包括以下步骤：(1.1)制备供试品溶液取甲芪肝纤颗粒，研细，加甲醇超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加温水使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱，加水洗脱，弃去水液，用氨试液洗脱，弃去氨液，再用水洗脱，弃去水液，继用乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇，使溶解，作为供试品溶液；(1.2)制备对照药材溶液称取桃仁对照药材加水煎煮，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，制成桃仁对照药材溶液；(1.3)制备对照品溶液取苦杏仁苷对照品适量，加甲醇制成苦杏仁苷对照品溶液；(1.4)制备阴性对照溶液取缺桃仁的阴性样品，同步骤(1.1)方法制成缺桃仁阴性对照溶液；(1.5)薄层色谱鉴定照薄层色谱法(中国药典2020年版四部通则0502)试验，吸取上述供试品溶液、桃仁对照药材溶液、苦杏仁苷对照品溶液、缺桃仁阴性对照溶液各5
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10μl，分别点于同一硅胶G薄层板，以体积比为(14
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16):(38
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42):(28
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32):(9
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11)的三氯甲烷
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乙酸乙酯
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甲醇
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水在5
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10℃下放置10
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14小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；(1.6)结果分析：供试品色谱中，在与桃仁对照药材和苦杏仁苷对照品色谱相应位置上，判断是否显相同颜色的荧光斑点。3.如权利要求2所述的检测方法，其中，鉴定对象为桃仁的有效成分时，所述的薄层色谱层析法鉴定包括：(2.1)制备供试品溶液称取甲芪肝纤颗粒4
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8g，研细，加甲醇10
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20mL，超声处理15
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25分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加温水4
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8mL使溶解，放冷﹐通过D101型大孔吸附树脂柱，加15
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25ml水洗脱，弃去水液，用氨试液(4
→
100)25
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50mL洗脱，弃去氨液，再用水8
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15mL洗脱，弃去水液，继用体积分数为15％
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25％的乙醇25
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50mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇l
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2mL使溶解，作为供试品溶液；(2.2)制备对照药材溶液称取桃仁对照药材1
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1.5g，加水40
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75mL，煎煮25
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40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1
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2mL使溶解，作为对照药材溶液；(2.3)制备苦杏仁苷对照品溶液取苦杏仁苷对照品适量，加甲醇制成每lmL含2mg的对照品溶液；(2.4)制备阴性对照溶液取缺桃仁的阴性样品5g，同步骤(2.1)的方法制成缺桃仁阴性对照溶液；
(2.5)薄层色谱鉴定照薄层色谱法(中国药典2020年版四部通则0502)试验，分别吸取所述的供试品溶液、桃仁对照药材溶液、苦杏仁苷对照品溶液、缺桃仁阴性对照溶液各5
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10μl，分别点于同一硅胶G薄层板，以体积比为(14
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32):(9
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11)的三氯甲烷
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乙酸乙酯
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甲醇
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水在5
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10℃下放置10
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14小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在1...

【专利技术属性】
技术研发人员：李敏，叶惠煊，罗菲菲，唐梦香，黄胜，
申请(专利权)人：九芝堂股份有限公司，
类型：发明
国别省市：