一种沸石咪唑酯骨架化合物制备固定化酶的方法技术

本发明专利技术公开一种沸石咪唑酯骨架化合物制备固定化酶的方法。该方法包括以下步骤：分别配置2‑甲基咪唑溶液、乙酸锌水溶液和聚乙二醇水溶液；将酶原液离心后去除上清液，然后加入所述聚乙二醇水溶液，超声后得到聚乙二醇/羧肽酶A复合物溶液，将该复合物溶液超滤，用2‑甲基咪唑水溶液将聚乙二醇/羧肽酶A复合物转移至2‑甲基咪唑水溶液中，形成混合溶液；将乙酸锌水溶液加入到混合溶液中，磁力搅拌后静置老化，离心收集固体产物并水洗后干燥，得到沸石咪唑酯骨架化合物制备的固定化酶。该方法可以大幅提高酶的稳定性和负载率，延长酶的储存时间，所制备的沸石咪唑酯骨架化合物负载羧肽酶A复合物的回收操作简单，经济高效，重复利用性高。

A method for preparation of immobilized enzyme with zeolites and imidazoles

【技术实现步骤摘要】
一种沸石咪唑酯骨架化合物制备固定化酶的方法
本专利技术涉及固定化酶技术，适用于粮食食品安全等工业领域，具体涉及一种沸石咪唑酯骨架化合物制备固定化酶的方法。
技术介绍
酶的固定化有物理吸附法、偶联合、截留法、包埋法、交联法等。金属有机骨架化合物可以作为酶固定的载体材料。将酶吸附进预先合成的金属有机骨架化合物的孔内，虽然这种固定化酶可以通过简单的操作步骤实现，但是由于大多数金属有机骨架化合物的孔隙尺寸远小于酶的尺寸，因此通过物理吸附形成复合酶的方法具有一定的局限性，即便金属有机骨架化合物的孔径与酶的尺寸相近或更大，如果它们之间结合相对较弱，那么酶也很可能被冲洗掉，而且现有吸附法的负载率为19％左右。偶联合是通过载体与酶之间化学交联，酶与载体结合力强，但酶分子的结构容易受到影响。包埋法是将酶包在高分子凝胶或半透膜微胶囊中，但该方法容易发生化学聚合反应，导致酶活性降低。羧肽酶是一种能有效降解OTA的生物降解酶，目前人们认识清楚的只有CPA和CPB的三维晶体结构，其中羧肽酶A(CarboxypeptidaseA，CPA)存在于哺乳动物胰脏中，相对本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种沸石咪唑酯骨架化合物制备固定化酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)将2-甲基咪唑加入蒸馏水或超纯水中配置成浓度为10～210g/L的2-甲基咪唑溶液，将乙酸锌加入蒸馏水或超纯水配置成浓度为65～95g/L的乙酸锌水溶液，并配置浓度为10～20g/L的聚乙二醇水溶液；/n(2)将浓度为24～28g/L的酶原液离心3～7分钟后去除上清液，然后加入步骤(1)所述聚乙二醇水溶液，超声10～20分钟，得到聚乙二醇/羧肽酶A复合物溶液；/n(3)将步骤(2)所述聚乙二醇/羧肽酶A复合物溶液超滤20～40分钟，用步骤(1)中配置好的2-甲基咪唑水溶液将聚乙二醇/羧肽酶A复合物转移至2-甲基...

【技术特征摘要】
1.一种沸石咪唑酯骨架化合物制备固定化酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将2-甲基咪唑加入蒸馏水或超纯水中配置成浓度为10～210g/L的2-甲基咪唑溶液，将乙酸锌加入蒸馏水或超纯水配置成浓度为65～95g/L的乙酸锌水溶液，并配置浓度为10～20g/L的聚乙二醇水溶液；
(2)将浓度为24～28g/L的酶原液离心3～7分钟后去除上清液，然后加入步骤(1)所述聚乙二醇水溶液，超声10～20分钟，得到聚乙二醇/羧肽酶A复合物溶液；
(3)将步骤(2)所述聚乙二醇/羧肽酶A复合物溶液超滤20～40分钟，用步骤(1)中配置好的2-甲基咪唑水溶液将聚乙二醇/羧肽酶A复合物转移至2-甲基咪唑水溶液中，形成混合溶液；随后立即将步骤(1)所述乙酸锌水溶液加入到所述混合溶液中，磁力搅拌3-10分钟后静置老化5-24小时，离心收集固体产物并水洗1～3次后干燥，即可得到所述沸石咪唑酯骨架化合物制备的固定化酶。


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【专利技术属性】
技术研发人员：孔德昭，盛建国，马蕾，李波，李雅琪，康乐群，裘茜，
申请(专利权)人：江苏科技大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32