一种液液微制备处理食用植物油样品检测苯并[a]芘的方法技术

本发明专利技术公开了一种液液微制备处理食用植物油样品检测苯并[a]芘的方法，以脱氢乙酸/乙腈的混合有机溶液作为苯并[a]芘萃取剂，对食用植物油前处理萃取两次后萃取液即可进行高效液相色谱法检测，通过转换计算即可得出食用植物油样品中苯并[a]芘的含量，对比常规环己烷等前处理萃取剂，加样回收率有大幅提高，具有萃取效率高的优点，萃取剂用量少，无需旋蒸或者氮吹浓缩过程，操作简便，步骤少，耗时短。

A method for the determination of benzo [a] pyrene in edible vegetable oil samples

【技术实现步骤摘要】
一种液液微制备处理食用植物油样品检测苯并[a]芘的方法
本专利技术涉及食用油检测
，特别涉及一种液液微制备处理食用植物油样品检测苯并[a]芘的方法。
技术介绍
苯并[a]芘不溶于水,易溶于氯仿、苯、丙酮等有机溶剂,是一种常见的高活性间接致癌物和突变原,并被确认为多环芳烃中致癌性最强的一种化合物目前,测定苯并[a]芘的主要方法有液相色谱-荧光检测法和气相色谱-质谱法等。进样前所使用的样品前处理技术主要是液液萃取,固相萃取,超声萃取,加速溶剂萃取等,但均存在操作繁琐、成本高、易带来二次污染等缺点。分散液液微制备(DLLME)是一种环境友好型新技术,由于操作简单,消耗有机溶剂少,且不需要特殊的昂贵装置,很多科研工作者已将其与分析仪器联用测定食品和环境水样中的农药残留及激素类污染物,而利用分散液液微制备作为食用油样品中化学物质检测的前处理方法的报道并不多见。目前，液液萃取法的一般技术方案一般为：1、称取一定量样品，液体样品可直接进行萃取，固体样品需要用被萃取剂分散；2、加入萃取剂进行萃取，一般进行两次或多次萃取；3、合并萃取剂并进行旋蒸或者氮吹浓缩；4、用合适溶剂复溶，测定。而液液萃取方法在食用植物油检测苯并[a]芘的应用中存在一些不足之处，主要有以下几个方面：1、所选溶剂萃取率较低，需要多次萃取；2、萃取剂的消耗量比较多；3、需要氮吹或者旋蒸，操作繁琐、耗时长。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题：本技术专利技术主要是为了解决食用植物油中液液萃取法测定苯并[a]芘的过程中存在的不足之处，主要目标是开发出一种消耗萃取剂少、简便、快速的食用植物油中测定苯并[a]芘的方法。为解决上述技术问题，本专利技术提供以下的技术方案：一种液液微制备处理食用植物油样品检测苯并[a]芘的方法，包含如下具体步骤：(1)称量样品：食用植物油样品称样量为0.0500～0.1500g；(2)样品前处理：将称取的食用植物油样品置于1.5mL离心管中，加入0.50～1.50mL脱氢乙酸/乙腈萃取剂，涡旋震荡混匀后，放入预先设定好的35℃恒温超声波水浴中，超声完毕后离心，取出样品吸出上层萃取液于5mL离心管中，下层液体中再加入0.50～1.50mL脱氢乙酸/乙腈萃取剂再重复萃取一次，将两次上层萃取液合并后置于同一离心管中，充分混匀得HPLC上样样品；所述脱氢乙酸/乙腈萃取剂为乙腈和脱氢乙酸的混合物；(3)将HPLC上样样品利用高效液相色谱荧光法测定苯并[a]芘含量，换算为食用植物油中的苯并[a]芘含量。优选地，所述脱氢乙酸/乙腈萃取剂以乙腈作为溶剂，加入脱氢乙酸至饱和后，用于食用植物油中苯并[a]芘的萃取。优选地，所述超声功率恒定为500～800W，超声时间5～10min；所述离心操作为6500～8000rpm速度下离心3～5min。优选地，所述液液微制备处理食用植物油样品检测苯并[a]芘的方法以三倍信噪比为方法检出限，检出限为0.2μg/kg；以十倍信噪比为方法定量限，定量限为0.5μg/kg。优选地，所述脱氢乙酸/乙腈萃取剂在两次萃取中的加入量相同，在食用植物油样品称样量为0.1000g时，加入量均为1.00mL萃取剂。优选地，所述高效液相色谱荧光法测定条件如下：色谱柱：C8,柱长250mm,内径4.6mm,粒径5μm；流动相：乙腈+水＝88％+12％；流速：1.0mL/min；荧光检测器：激发波长384nm,发射波长406nm；柱温：30℃；单次进样量：20μL。本专利技术获得的有益效果：以脱氢乙酸/乙腈的混合有机溶液作为苯并[a]芘萃取剂具有萃取效率高的优点，萃取剂用量少，经过两次超声辅助微制备后即可上机测定，无需旋蒸或者氮吹浓缩过程，操作简便，步骤少，耗时短。附图说明：图1苯并[a]芘标准曲线；图2苯并[a]芘标准物质色谱图；图3苯并[a]芘样品色谱图。具体实施方式下面通过对实施例的描述，对本专利技术的具体实施方式作进一步详细的说明，以帮助本领域的技术人员对本专利技术的专利技术构思、技术方案有更完整、准确和深入的理解。实施例1：一、试剂准备和预制脱氢乙酸/乙腈萃取剂为乙腈和脱氢乙酸的混合物，乙腈作为溶剂，脱氢乙酸在乙腈中的浓度为0.10g/mL；二、采用液液微制备处理食用植物油样品检测苯并[a]芘，包含如下具体步骤：(1)称量样品：本专利技术着眼于液液微制备的方法，以三倍信噪比为方法检出限，检出限为0.2μg/kg；以十倍信噪比为方法定量限，定量限为0.5μg/kg，综合考虑苯并[a]芘的仪器检出限和样品的稀释体积，将食用植物油样品称样量确定为0.0500g；(2)样品前处理：将称取的食用植物油样品置于1.5mL离心管中，加入0.50mL脱氢乙酸/乙腈萃取剂，涡旋震荡混匀后，放入预先设定好的35℃恒温超声波水浴中，超声功率恒定为500W，超声时间5min；超声完毕后离心，离心操作为6500rpm速度下离心3min。取出样品吸出上层萃取液于5mL离心管中，下层液体中再加入1.50mL脱氢乙酸/乙腈萃取剂再重复萃取一次，将两次上层萃取液合并后置于同一离心管中，充分混匀得HPLC上样样品；(3)将HPLC上样样品利用高效液相色谱荧光法测定苯并[a]芘含量，高效液相色谱荧光法测定条件如下：色谱柱：C8,柱长250mm,内径4.6mm,粒径5μm；流动相：乙腈+水＝88％+12％；流速：1.0mL/min；荧光检测器：激发波长384nm,发射波长406nm；柱温：30℃；单次进样量：20μL。(4)通过将HPLC上样样品中的苯并[a]芘含量换算为食用植物油样品中的苯并[a]芘含量。实施例2：一、试剂准备和预制脱氢乙酸/乙腈萃取剂为乙腈和脱氢乙酸的混合物，乙腈作为溶剂，脱氢乙酸在乙腈中的浓度为0.08g/mL；二、采用液液微制备处理食用植物油样品检测苯并[a]芘，包含如下具体步骤：(1)称量样品：本专利技术着眼于液液微制备的方法，以三倍信噪比为方法检出限，检出限为0.2μg/kg；以十倍信噪比为方法定量限，定量限为0.5μg/kg，综合考虑苯并[a]芘的仪器检出限和样品的稀释体积，将食用植物油样品称样量确定为0.1500g；(2)样品前处理：将称取的食用植物油样品置于2mL离心管中，加入1.50mL脱氢乙酸/乙腈萃取剂，涡旋震荡混匀后，放入预先设定好的35℃恒温超声波水浴中，超声功率恒定为800W，超声时间10min；超声完毕后离心，离心操作为8000rpm速度下离心5min。取出样品吸出上层萃取液于5mL离心管中，下层液体中再加入0.50mL脱氢乙酸/乙腈萃取剂再重复萃取一次，将两次上层萃取液合并后置于同一离心管中，充分混匀得HPLC上样样品；(3)将HPLC上样样品利用高效液相色谱荧光法测定苯并[a]本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种液液微制备处理食用植物油样品检测苯并[a]芘的方法，其特征在于，包含如下具体步骤：/n(1)称量样品：食用植物油样品称样量为0.0500～0.1500g；/n(2)样品前处理：将称取的食用植物油样品置于1.5mL离心管中，加入0.50～1.50mL脱氢乙酸/乙腈萃取剂，涡旋震荡混匀后，放入预先设定好的35℃恒温超声波水浴中，超声完毕后离心，取出样品吸出上层萃取液于5mL离心管中，下层液体中再加入0.50～1.50mL脱氢乙酸/乙腈萃取剂再重复萃取一次，将两次上层萃取液合并后置于同一离心管中，充分混匀得HPLC上样样品；所述脱氢乙酸/乙腈萃取剂为乙腈和脱氢乙酸的混合物；/n(3)将HPLC上样样品利用高效液相色谱荧光法测定苯并[a]芘含量，换算为食用植物油中的苯并[a]芘含量。/n

【技术特征摘要】
20190523 CN 201910432621X1.一种液液微制备处理食用植物油样品检测苯并[a]芘的方法，其特征在于，包含如下具体步骤：
(1)称量样品：食用植物油样品称样量为0.0500～0.1500g；
(2)样品前处理：将称取的食用植物油样品置于1.5mL离心管中，加入0.50～1.50mL脱氢乙酸/乙腈萃取剂，涡旋震荡混匀后，放入预先设定好的35℃恒温超声波水浴中，超声完毕后离心，取出样品吸出上层萃取液于5mL离心管中，下层液体中再加入0.50～1.50mL脱氢乙酸/乙腈萃取剂再重复萃取一次，将两次上层萃取液合并后置于同一离心管中，充分混匀得HPLC上样样品；所述脱氢乙酸/乙腈萃取剂为乙腈和脱氢乙酸的混合物；
(3)将HPLC上样样品利用高效液相色谱荧光法测定苯并[a]芘含量，换算为食用植物油中的苯并[a]芘含量。


2.根据权利要求1中所述的一种液液微制备处理食用植物油样品检测苯并[a]芘的方法，其特征在于：所述脱氢乙酸/乙腈萃取剂以乙腈作为溶剂，加入脱氢乙酸至饱和后，用于食用植物油中苯并[a]芘的萃取。


3.根据权利要求1中所述的一种液液微制备处理食用...

【专利技术属性】
技术研发人员：王晓亮，汪新华，张邦华，
申请(专利权)人：开化县检验检测研究院，
类型：发明
国别省市：浙江;33