牦牛肉中喹诺酮类药物时间分辨荧光免疫层析定量检测方法技术

技术编号:23147538 阅读:29 留言:0更新日期:2020-01-18 12:53
本发明专利技术公开了牦牛肉中喹诺酮类药物时间分辨荧光免疫层析定量检测方法。本发明专利技术提供了检测试剂卡,包括底板和放置在其上的样品垫、含有铕微球标记的抗喹诺酮类药物抗体的释放垫、含有喹诺酮类药物检测线T以及质控线C的硝酸纤维素膜,和吸水垫。上述试剂卡中,所述抗喹诺酮类药物抗体为抗环丙沙星单克隆抗体;所述抗环丙沙星单克隆抗体的轻链可变区的氨基酸序列为1;所述抗环丙沙星单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列为2。本发明专利技术通过建立时间分辨荧光免疫层析方法来检测牦牛肉中环丙沙星残留量,其灵敏度高于ELISA方法。

Quantitative determination of quinolones in yak meat by time-resolved fluorescence immunochromatography

【技术实现步骤摘要】
牦牛肉中喹诺酮类药物时间分辨荧光免疫层析定量检测方法
本专利技术属于生物
,尤其涉及一种牦牛肉中喹诺酮类药物时间分辨荧光免疫层析定量检测方法。
技术介绍
牦牛是青藏高原特有的家畜品种之一。大多分布于高寒草原牧区,不仅是高寒草原藏民族及其他少数民族聚居区经济发展的基础和象征,而且已成为青藏高原地区畜牧业发展的独立板块。随着牦牛养殖规模的扩大,由于养殖户基本以牧民为主,知识水平较低、生态养殖观念较差,为控制牦牛疫病的发生,在养殖过程中就存在着养殖者乱用、滥用、长期或超量使用兽药,严重影响了牦牛肉的安全性。喹诺酮类(Quinolones,简称QNS)药物是人工合成的广谱抗生素,该类药物具有高效、低毒、广谱的特点,因而被广泛应用于畜牧、水产等养殖业的疾病防治。长期使用喹诺酮会导致药物残留和耐药性的产生,这些危害会通过动物源性食品危害人类的健康。因此欧盟、美国、日本已将喹诺酮类药物列为动物源性食品中残留检测的重点监控项目,美国FDA在2005年宣布禁止用于治疗家禽细菌感染的抗菌药物恩诺沙星的销售和使用,我国农业部在235号公告《动物性食品中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种喹诺酮类药物时间分辨荧光免疫检测试剂卡,包括底板和放置在其上的样品垫、含有铕微球标记的抗喹诺酮类药物抗体的释放垫、含有喹诺酮类药物检测线T以及质控线C的硝酸纤维素膜,和吸水垫。/n

【技术特征摘要】
1.一种喹诺酮类药物时间分辨荧光免疫检测试剂卡,包括底板和放置在其上的样品垫、含有铕微球标记的抗喹诺酮类药物抗体的释放垫、含有喹诺酮类药物检测线T以及质控线C的硝酸纤维素膜,和吸水垫。


2.根据权利要求1所述的试剂卡,其特征在于:所述抗喹诺酮类药物抗体为抗环丙沙星单克隆抗体;
所述抗环丙沙星单克隆抗体的轻链可变区的氨基酸序列为1;
所述抗环丙沙星单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列为2。


3.根据权利要求2所述的试剂卡,其特征在于:
所述含有铕微球标记的抗喹诺酮类药物抗体的释放垫为将铕微球标记的抗环丙沙星抗体溶液喷于释放垫上形成;
所述铕微球标记的抗环丙沙星抗体溶液的包被浓度为1.4mg/mL。


4.根据权利要求3所述的试剂卡,其特征在于:所述铕微球标记的抗环丙沙星抗体溶液中,所述抗环丙沙星抗体和铕微球的质量比为7:20;
或,所述铕微球为200nm羧基化铕微球。


5.根据权利要求1-4中任一所述的试剂卡,其特征在于:
所述喹诺酮类药物检测线T由环丙沙星抗原或其溶液形成;
或,所述环丙沙星抗原溶液的包被浓度具体为1.0mg/mL;
或,所述质控线C由IgG抗体或IgG抗体溶液形成;
或,所述IgG抗体溶液的包被浓度具体为0.875mg/mL;
或,所述含有喹诺酮类药物检测线T以及质控线C的硝酸纤维素膜为将所述环丙沙星抗原溶液包被在硝酸纤维素膜形成检测线T,且将所述IgG抗体溶液包被在硝酸纤维素膜形成质控线C,得到含有喹诺酮类药物检测线T和质控线C的硝酸纤维素膜。


6.一种制备权利要求1-5中任一所述的试剂卡的方法,包括如下步骤:先制备含有铕微球标记的抗喹诺酮类药物抗体的释放垫和制备含有喹诺酮类药物检测线T和质控线C的硝酸纤维素膜;再将样品垫、所述含有铕微球标记的抗喹诺酮类药物抗体的释放垫、所述含有喹诺酮类药物检测线T和质控线C的硝酸纤维素膜和吸水垫组装到底板上,得到试剂卡;
所述含有铕微球标记的抗喹诺酮类药物抗体的释放垫为将铕微球标记的抗喹诺酮类药物抗体溶液喷于释放垫上形成;
所述铕微球标记的抗环丙沙星抗体溶液的浓度为1.4mg/mL;
所述抗喹诺酮类药物抗体为抗环丙沙星单克隆抗体;
所述抗环丙沙星单克隆抗体的轻链可变区的氨基酸序列为1;
所述抗环丙沙星单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列为2;
所述喹诺酮类药物检测线T由环丙沙星抗原或其溶液形成;
或,所述环丙沙星抗原溶液的包被浓度具体为1.0mg/mL;
所述质控线C由IgG抗体或IgG抗体溶液形成;
或,所述IgG抗体溶液的浓度具体为0.875mg/mL;
所述含有喹诺酮类药物检测线T以及质控线C的硝酸纤维素膜为将所述环丙沙星抗原溶液包被在硝酸纤维素膜形成检测线T,且将所述IgG抗...

【专利技术属性】
技术研发人员:王云平张汉青赵维章刘河冰马立才张正英刘海珍张沛黄文颖郝云晴都占林
申请(专利权)人:青海省动物疫病预防控制中心北京维德维康生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:青海;63

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