多管藻四分孢子成苗的方法技术

一种多管藻四分孢子成苗的方法，其特征是从野生群体中采集成熟的四分孢子体，先用干净的海水刷洗数遍，直到无明显的杂藻；然后用超声波清洗３－５遍，到无杂藻为止；切取藻体靠近端部的孢子囊较多的部位培养，温度为１５－２０℃、光强２０００－３０００ｌｕｘ，光照时间１０－１２小时；待孢子放散达到需求量后，取走藻体，继续培养水体中的四分孢子，直到萌发成配子体藻体。本发明专利技术的优点：１．四分孢子萌发成不同性别的配子体，是相关的遗传学研究的重要材料；２．超声波清洗时间短，效果好；３．四分孢子体在自然界存在时间长，生物量大，保证了充足的种源；４．四分孢子萌发率高，不需有性过程可直接获得后代藻体。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种多管藻四分孢子成苗的方法。
技术介绍
多管藻属是红藻门真红藻纲松节藻科的一类红藻。近年的研究表 明，多管藻具有抗细菌和真菌、抗疱疹病毒和抗氧化活性，并对多种 癌细胞(如结肠癌细胞、神经鞘瘤细胞)有细胞毒活性，所以在海藻药物开发方面具有重要的开发前景；另外，多管藻中还含有丰富的硫 酸半乳糖、藻红蛋白等物质，也有重要的经济价值。良好的开发利用 前景使多管藻的自然资源不能满足潜在的开发需要，所以发展可用于 人工栽培生产的方法尤其是种苗获得方法是前瞻性的做法，但目前尚 未见多管藻四分孢子成苗方法的相关报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种多管藻四分孢子成苗的方法，它能满足 现有技术的上述需求。一种多管藻四分孢子成苗的方法，其特征是从野生群体中采集具 有成熟四分孢子囊的个体，先用煮沸后冷却的海水刷洗数遍，直到无 明显的杂藻；然后用超声波清洗3-5遍，到藻体上没有杂藻污染为止； 用解剖刀在解剖镜下切取藻体靠近端部的孢子囊较多的部位，在光照 培养箱中培养，温度为15-20°C、光强2000-30001ux，光照时间10-12 小时；待确定孢子放散达到需求量后，将孢子体藻体取走，剩下水体 中的四分孢子继续培养，直到萌发成配子体藻体。本专利技术的优点是1、四分孢子是单倍染色体，所以萌发成的幼苗是配子体；由于配子体是雌雄异体，所以可获得不同性别的单倍体个 体，对相关的遗传学研究有重要意义；2、超声波清洗时间短，效果好； 3、真红藻纲种类的生活史中有果孢子和四分孢子两种孢子，果孢子来 自雌配子体，四分孢子来自四分孢子体；与雌配子体相比，四分孢子 体在自然界存在时间长，且生物量大，容易从自然界获得，保证了充 足的种源；而且用四分孢子做种苗，萌发率高，生长快，不需有性过 程可直接获得后代藻体。所以，这一方法对真红藻纲种类的四分孢子 成苗有广泛的参考意义。 具体实施例方式本专利技术人于2007年3-4月间，将采自青岛海滨的多管藻孢子体带 回室内，从中选取健康的、四分孢子成熟好的个体。在煮沸后冷却的 海水中，用棉球刷洗至无明显的杂藻及附着物；这时，往往还有少量 的杂藻如硅藻等附着在藻体上， 一旦给予适宜条件会快速繁殖起来， 影响多管藻的生长。为了进一步清洗藻体，将刷洗过的多管藻孢子体 浸入干净海水中，用超声波细胞破碎仪清冼多次， 一般功率为150瓦， 每次不超过IO秒钟，不可时间过长，以免因产热过多对藻体或四分孢 子囊造成机械损伤， 一般3-5次即可去除所有杂藻，但每次清洗后要 换上洁净的海水。镜检确定无杂藻附着为止。将洗好的藻体基部1/3 以上的藻体用解剖刀切下(如果藻体不大于5厘米也可不切)，浸入干 净海水中，在培养箱内培养，培养温度为15-2(TC、光强200()-30001ux， 光照时间10-12小时，每日下午检査放散量；检查方法是在磁力搅拌 器的搅拌下，每天下午2点取一定量的孢子水(如0.1ml)，计数后， 根据培养用海水的总体积(事先确认)推算出当日的孢子放散量；计 算完后，给孢子体换上新鲜的干净海水继续培养。待确定孢子放散达 到需求量后，在采集孢子的前一天傍晚，将孢子体的培养液更新，更 新时，将孢子体在干净的海水中涮洗数遍，以确保已经放散的孢子不 会附着在藻体上，然后，将藻体在干净的海水中培养，条件不变，次 日中午将孢子体藻体从培养液中取走，当日放散的新鲜孢子即存留在 培养液中。在磁力搅拌器的搅拌下，将水体中的四分孢子均匀分到不 同的培养器皿(如培养皿)中在原来条件继续培养，器皿底部根据需 要可加入另外的附着基质(如玻片、维尼龙绳等)，注意孢子附着前不 可剧烈摇动培养器皿以免孢子聚集；健康的孢子在1天内即可附着，附着后即可换上加入营养盐的海水培养液培养，3-5天换一次培养液，直到四分孢子萌发成配子体藻体， 一般需要一周可萌发成上百个细胞 的藻体。若需要的幼苗较大，待幼苗长到数毫米长后，将培养温度提高2-3°C，更利于较大幼苗分枝的生长及假根的数目增多。可根据海 况及幼苗的大小，决定幼苗下海的时间以获得最大成活率。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多管藻四分孢子成苗的方法，其特征是从野生群体中采集具有成熟四分孢子囊的个体，先用煮沸后冷却的海水刷洗数遍，直到无明显的杂藻；然后用超声波清洗３－５遍，到藻体上没有杂藻为止；用解剖刀在解剖镜下切取藻体靠近端部的孢子囊较多的部位，在光照培养箱中培养，温度为１５－２０℃、光强２０００－３０００ｌｕｘ，光照时间１０－１２小时；待确定孢子放散达到需求量后，将孢子体藻体取走，剩下水体中的四分孢子继续培养，直到萌发成配子体藻体。

【技术特征摘要】
1、一种多管藻四分孢子成苗的方法，其特征是从野生群体中采集具有成熟四分孢子囊的个体，先用煮沸后冷却的海水刷洗数遍，直到无明显的杂藻；然后用超声波清洗3-5遍，到藻体上没有杂藻为止；用解剖刀在解剖镜下切取藻体靠近端...

【专利技术属性】
技术研发人员：汤晓荣，仪梅，
申请(专利权)人：中国海洋大学，
类型：发明
国别省市：95[中国|青岛]