【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于纳米药物载体领域，具体涉及一种具有p糖蛋白抑制功能的纳米药物载体、制备方法及应用。
技术介绍
1、癌症是一种由细胞异常增殖形成的疾病，具有高发病率、高死亡率等特点，每年造成数千万人死亡，是全球范围内的主要死亡原因之一。
2、目前，化疗仍是治疗癌症的主要手段之一。传统的化疗药物要么经口服进入胃肠道，被消化系统吸收后，进入血液循环，然后通过血液输送到体内的肿瘤部位，要么静脉注射，直接进入血液循环，从而达到全身各部位，包括肿瘤部位。总而言之，无论口服还是静脉注射，因缺乏靶向能力，药物非选择性且低效地输送到病灶部位，无法避免其对周围健康组织或细胞造成毒副作用。此外，反复暴露于化疗药物的肿瘤细胞可能受到药物选择压力的影响，导致细胞内p糖蛋白(p-glycoprotein，p-gp)过表达；p-gp是一种跨膜转运蛋白，具有将化疗药物从细胞内排出的功能，因此p糖蛋白过度表达可减少药物在细胞内的积累，降低药物对细胞的毒性，造成癌症耐药。
3、encequidar(er)是一种特异性p-gp抑制剂，用于开发紫杉醇(paclitaxel，ptx)口服制剂与紫杉醇结合通过口服给药仅可以抑制胃肠道组织的p-gp，虽然提高了ptx的血药浓度，但带来极大的胃肠道副反应，并且er无法到达肿瘤细胞的胞浆抑制此处的p-gp，所以对耐药性细胞癌疗效有限。因此，实现er特异性抑制肿瘤胞浆p-gp，增强活性物质摄取，同时减少副作用，是减轻肿瘤耐药并延长患者生存时间的有效方法；er的化学结构如下：
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6、纳米载药技术是近年来医药领域的一项重要技术进步，其应用广泛，旨在提高药物的疗效和减少副作用；该技术利用纳米尺度的载体将药物精确地输送到目标组织或细胞内部，从而实现药物的靶向治疗；这项技术的发展源于对传统药物输送系统的限制和不足，例如药物的低生物利用度、非特异性分布和副作用增加等。纳米载药技术通过优化药物的释放特性和增强药物的稳定性，已成为一种备受关注的新型药物输送系统。
7、甲氧基聚乙二醇(mpeg)和聚乳酸(pdlla)均为生物相容性良好的材料，对机体几乎没有毒性和免疫原性，因此能够降低药物输送系统对机体的不良反应；同时具有良好的稳定性，能够保护药物免受降解和失活，延长药物的血浆半衰期；因此，在纳米药物载体领域，mpeg-pdlla共聚物具有广阔的应用前景和发展潜力。但是，mpeg-pdlla作为抗肿瘤药物载体材料也存在诸多不足：(1)药物载荷量限制，mpeg-pdlla载体的药物载荷量可能受到限制，这可能会影响药物的疗效和治疗效果；(2)药物释放无选择性，无法于肿瘤组织或肿瘤细胞内快速药物释放；(3)治疗抵抗性，mpeg-pdlla载体的纳米药物虽能经胞吞作用进入细胞，暂时绕过p-gp外排作用，但释放后的抗肿瘤药物仍会被p-gp泵出细胞，造成耐药。
8、因此，开发一种提高药物载荷量，实现药物的控释，具有p-gp抑制功能又可以包载疏水性药物的mpeg-pdlla纳米药物载体是本
的一个极具前景的研究方向。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供具有p糖蛋白抑制功能的纳米药物载体、制备方法及应用。
2、为达到此专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：
3、第一方面，本专利技术提供一种具有p糖蛋白抑制功能的纳米药物载体，所述纳米药物载体由甲氧基聚乙二醇-聚乳酸共聚物(mpeg-pdlla)通过二硫键linker共价偶联p-gp抑制剂(er)构成，结构式如下所示：
4、
5、所述纳米药物载体(sh181)分子中含有所述二硫键linker和所述p-gp抑制剂(er)，相比所述mpeg-pdlla共聚物具有良好的肿瘤细胞内氧化还原响应性和p-gp抑制能力。
6、第二方面，本专利技术提供了一种具有p糖蛋白抑制功能的纳米药物载体(sh181)的制备方法，包括：
7、将所述mpeg-pdlla共聚物通过所述二硫键linker与所述p-gp抑制剂(er)共价偶联，离心除去杂质，干燥后得到所述具有p糖蛋白抑制功能的纳米药物载体(sh181)。具体包括以下步骤：
8、(1)以四氢呋喃为溶剂，先将所述p-gp抑制剂(er)和所述二硫键linker偶联；
9、(2)以无水二氯甲烷为溶剂，将步骤(1)所得与所述mpeg-pdlla共聚物在催化剂作用下偶联；
10、(3)将步骤(2)所得溶于去离子水，涡旋振荡，超声乳化，得到乳液；
11、(4)将所述乳液低温超速离心，上清液转移至超滤离心管，离心，洗涤，冷冻干燥即得。
12、进一步的，步骤(1)所述p-gp抑制剂(er)和所述二硫键linker投料比是1：2。
13、进一步的，步骤(2)所述mpeg-pdlla数均分子量是4kd。
14、进一步的，步骤(2)所述催化剂为4-二甲氨基吡啶和二环己基碳二亚胺。
15、进一步的，步骤(3)所述超声功率为8w，超声时间为15s。
16、进一步的，步骤(4)所述低温超速离心，指的是4℃、12000rpm的条件下离心15min，所述超滤离心管的最小截留分子量为3.5kd。
17、第三方面，本专利技术提供一种具有p糖蛋白抑制功能的纳米药物载体(sh181)的应用，包括在制备抗耐药肿瘤纳米药物方面的应用。
18、具体的，具有p糖蛋白抑制功能的纳米药物载体(sh181)用于包载难溶性抗肿瘤药物以制备抗耐药肿瘤纳米药物。
19、进一步的，所述难溶性抗肿瘤药物包括，紫杉醇(paclitaxel,ptx)、多西他赛(docetaxel，dtx)、卡巴他赛(cabazitaxel，ctx)。
20、进一步的，以包载所述紫杉醇为例，包载方法包括制备对应的纳米胶束：
21、(1)以适量体积的二甲基亚砜溶解适量的所述纳米药物载体和所述紫杉醇(质量比纳米药物载体：紫杉醇＝10：1)，涡旋振荡使之混合均匀，充分溶解；
22、(2)将步骤(1)所得混合溶液，逐滴加入到适量去离子水中，室温下1000rpm持续搅拌20min；
23、(3)将步骤(2)所得溶液转移至截留分子量为3.5kd的透析袋中，室温下透析8h；
24、(4)将步骤(3)所得液体过膜(0.22μm)，分装，冷冻干燥即得紫杉醇纳米胶束(sh181@ptx nps)。
25、本专利技术优势在于：
26、本专利技术针对临床治疗耐药肿瘤纳米药物载体现有技术不足，进行了深入的研究，并提出了有效的解决方案：(1)增加了二硫键，赋予载体肿瘤细胞内氧化还原响应性，从而提高药物在治疗部位的局部浓度，降低毒性和副作用；(2)通过精确的比例控制，将p-gp抑制剂er与mpeg-pdlla分子共价偶联，既保证了载体稳定性，又赋予其p-gp抑制能本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种具有P糖蛋白抑制功能的纳米药物载体，其特征在于：纳米药物载体由甲氧基聚乙二醇-聚乳酸共聚物(mPEG-PDLLA)通过二硫键Linker共价偶联P-gp抑制剂(ER)构成，结构式如下所示：
2.一种如权利要求1所述的具有P糖蛋白抑制功能的纳米药物载体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
3.如权利要求2所述的具有P糖蛋白抑制功能的纳米药物载体的制备方法，其特征在于：
4.如权利要求2所述的具有P糖蛋白抑制功能的纳米药物载体的制备方法，其特征在于：
5.如权利要求2所述的具有P糖蛋白抑制功能的纳米药物载体的制备方法，其特征在于：
6.如权利要求2所述的具有P糖蛋白抑制功能的纳米药物载体的制备方法，其特征在于：
7.一种如权利要求1所述的具有P糖蛋白抑制功能的纳米药物载体在制备抗耐药肿瘤纳米药物方面的应用。
8.如权利要求7所述的具有P糖蛋白抑制功能的纳米药物载体在制备抗耐药肿瘤纳米药物方面的应用，其特征在于：所述P糖蛋白抑制功能的纳米药物载体用于包载难溶性抗肿瘤药物。
<...【技术特征摘要】
1.一种具有p糖蛋白抑制功能的纳米药物载体，其特征在于：纳米药物载体由甲氧基聚乙二醇-聚乳酸共聚物(mpeg-pdlla)通过二硫键linker共价偶联p-gp抑制剂(er)构成，结构式如下所示：
2.一种如权利要求1所述的具有p糖蛋白抑制功能的纳米药物载体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
3.如权利要求2所述的具有p糖蛋白抑制功能的纳米药物载体的制备方法，其特征在于：
4.如权利要求2所述的具有p糖蛋白抑制功能的纳米药物载体的制备方法，其特征在于：
5.如权利要求2所述的具有p糖蛋白抑制功能的纳米药物载体的制备方法，其特征在于：
6.如权利要求2所述的具有p糖蛋白抑制功能的纳米药物载体的制备方法，其特征在于：
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【专利技术属性】
技术研发人员：王成，朱思峰，蔡梓民，刘文典，李云艳，赵来恩，
申请(专利权)人：中国海洋大学，
类型：发明
国别省市：
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